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香蕉枯萎病菌1号生理小种遗传转化体系的建立
被引量:
3
1
作者
林妃
曾涛
曾会才
《热带作物学报》
CSCD
2010年第10期1790-1796,共7页
利用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的转化方法,建立香蕉枯萎病菌1号生理小种(Fusariumoxysporum f.sp cubense race 1)遗传转化体系,并对影响转化效率的因子进行优化,明确了高效转化的条件为:农杆菌OD600为0.15,AS诱导浓度为15...
利用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的转化方法,建立香蕉枯萎病菌1号生理小种(Fusariumoxysporum f.sp cubense race 1)遗传转化体系,并对影响转化效率的因子进行优化,明确了高效转化的条件为:农杆菌OD600为0.15,AS诱导浓度为150μmol/L,诱导时间为7 h,Focr1-N2孢子浓度为1×106个/mL,潮霉素B筛选的浓度为150μg/mL,诱导培养基pH值为5.5,共培养温度为25℃,共培养时间为48 h为最佳条件。构建了包含1 200个突变体的突变体库,并对1 200个突变体进行了致病性测定,初步筛选出致病性丧失突变体20个,致病性显著减弱突变体18个,致病性严重增强突变体53个。
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关键词
香蕉枯萎病菌
1号生理小种
突变体
遗传转化
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职称材料
根癌农杆菌介导的香蕉枯萎病1号生理小种遗传转化体系的优化
2
作者
戴青冬
毛超
+4 位作者
郭立佳
杜和禾
汪军
潘江禹
黄俊生
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第22期165-168,F0004,共5页
针对香蕉枯萎病病原菌的1号生理小(Fusariumoxysporumf.spcubenseracel,Focl),以潮霉素抗性为选择标记,建立了根癌农杆菌介导的转化体系,确定影响转化效率主要因子是:YEB平板上单菌落培养时间为40h、在LB液体摇床培养中培养时间2...
针对香蕉枯萎病病原菌的1号生理小(Fusariumoxysporumf.spcubenseracel,Focl),以潮霉素抗性为选择标记,建立了根癌农杆菌介导的转化体系,确定影响转化效率主要因子是:YEB平板上单菌落培养时间为40h、在LB液体摇床培养中培养时间28~30h(200r/min)、乙酰丁香酮(AS)浓度为200μmol]L、共培养温度为25℃、IM固体培养基pH值为5.5。在此条件下,转化效率能达到150-200个转化子/10s个Focl孢子。在选择性培养基筛选转化子时,我们首次采用了直接覆盖选择性培养基方法,比传统的转膜反贴方法更方便简单。在荧光显微镜下观察到转化子的绿色荧光。潮霉素抗性测试发现转化子的抗性表现稳定。
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关键词
香蕉枯萎病
1号生理小种
根癌农杆菌
突变体
转化
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职称材料
题名
香蕉枯萎病菌1号生理小种遗传转化体系的建立
被引量:
3
1
作者
林妃
曾涛
曾会才
机构
中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点开放实验室
中国热带农业科学院海口实验站
出处
《热带作物学报》
CSCD
2010年第10期1790-1796,共7页
基金
国家自然科学基金项目(No.30860160)
科技部国际科技合作项目(No.2007DFA31460)
国家公益性行业(农业)科研专项课题(No.20093049-2)资助
文摘
利用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的转化方法,建立香蕉枯萎病菌1号生理小种(Fusariumoxysporum f.sp cubense race 1)遗传转化体系,并对影响转化效率的因子进行优化,明确了高效转化的条件为:农杆菌OD600为0.15,AS诱导浓度为150μmol/L,诱导时间为7 h,Focr1-N2孢子浓度为1×106个/mL,潮霉素B筛选的浓度为150μg/mL,诱导培养基pH值为5.5,共培养温度为25℃,共培养时间为48 h为最佳条件。构建了包含1 200个突变体的突变体库,并对1 200个突变体进行了致病性测定,初步筛选出致病性丧失突变体20个,致病性显著减弱突变体18个,致病性严重增强突变体53个。
关键词
香蕉枯萎病菌
1号生理小种
突变体
遗传转化
Keywords
Fusarium oxysporum f. sp. cubense (FOC) racel
Mutant
Genetic transformation
分类号
S432.4 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
根癌农杆菌介导的香蕉枯萎病1号生理小种遗传转化体系的优化
2
作者
戴青冬
毛超
郭立佳
杜和禾
汪军
潘江禹
黄俊生
机构
海南大学农学院
中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室
出处
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第22期165-168,F0004,共5页
基金
国家公益性行业(农业)科研专项"由尖孢镰刀菌引起的作物土传病害综合防控技术研究"(200903049)
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2011HZS1J022)
文摘
针对香蕉枯萎病病原菌的1号生理小(Fusariumoxysporumf.spcubenseracel,Focl),以潮霉素抗性为选择标记,建立了根癌农杆菌介导的转化体系,确定影响转化效率主要因子是:YEB平板上单菌落培养时间为40h、在LB液体摇床培养中培养时间28~30h(200r/min)、乙酰丁香酮(AS)浓度为200μmol]L、共培养温度为25℃、IM固体培养基pH值为5.5。在此条件下,转化效率能达到150-200个转化子/10s个Focl孢子。在选择性培养基筛选转化子时,我们首次采用了直接覆盖选择性培养基方法,比传统的转膜反贴方法更方便简单。在荧光显微镜下观察到转化子的绿色荧光。潮霉素抗性测试发现转化子的抗性表现稳定。
关键词
香蕉枯萎病
1号生理小种
根癌农杆菌
突变体
转化
Keywords
Fusarium wilt of banana
race
1
Agrobocterium tumefaciens
mutant
transformation
分类号
S436.67 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
香蕉枯萎病菌1号生理小种遗传转化体系的建立
林妃
曾涛
曾会才
《热带作物学报》
CSCD
2010
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
根癌农杆菌介导的香蕉枯萎病1号生理小种遗传转化体系的优化
戴青冬
毛超
郭立佳
杜和禾
汪军
潘江禹
黄俊生
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
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职称材料
已选择
0
条
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