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环状RNA 0032131调控NF-κB通路对骨关节炎软骨变性的影响
1
作者
周巧
刘健
+5 位作者
万磊
汪元
王桂珍
齐亚军
胡月迪
朱艳
《中国骨质疏松杂志》
北大核心
2025年第3期388-396,共9页
目的旨在探讨hsa_circRNA_0032131对白细胞介素(IL)-1β诱导的骨关节炎(OA)软骨变性的作用。方法IL-1β处理的软骨细胞(CHON-001)用作OA的体外模型。细胞转染建立小干扰(si-RNA)和过表达质粒(OE)模型,分为IL-1β、IL-1β+OE-NC、IL-1β+...
目的旨在探讨hsa_circRNA_0032131对白细胞介素(IL)-1β诱导的骨关节炎(OA)软骨变性的作用。方法IL-1β处理的软骨细胞(CHON-001)用作OA的体外模型。细胞转染建立小干扰(si-RNA)和过表达质粒(OE)模型,分为IL-1β、IL-1β+OE-NC、IL-1β+OE-circ_0032131、IL-1β+si-NC和IL-1β+si-circ_0032131共5组。定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ_0032131、ADAMTS5、MMP13、SOX9、COL2A1和NF-κB p65 mRNA的表达。CCK-8和流式细胞术评估细胞活力。蛋白免疫印迹法(WB)测定ADAMTS5、MMP13、SOX9、COL2A1蛋白水平。免疫荧光检测p-NF-κB p65和p-IKBα的平均荧光强度。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-1β和IL-4的表达。相关性分析circ_0032131与炎症因子、ECM产物和NF-κB的关系。ROC曲线计算circ_0032131曲线下面积。结果与未处理细胞相比,IL-1β诱导的CHON-001细胞中的circ_0032131上调,IL-4水平下降,ADAMTS5、MMP13和NF-κB p65 mRNA水平升高,SOX9和COL2A1 mRNA水平下降。ROC曲线结果,circ_0032131曲线下的面积为0.9156(0.8136~0.9271),与SOX9、COL2A1和IL-4呈负相关,与MMP13、IL-1β和NF-κB p65呈正相关。circ_0032131敲低减轻IL-1β诱导软骨细胞损伤,与IL-1β+si-NC相比,IL-1β+si-circ_0032131组细胞活力升高,细胞凋亡下降,SOX9和COL2A1蛋白水平升高,ADAMTS5和MMP13蛋白水平下降。过表达circ_0032131后结果相反。此外,与IL-1β+OE-NC组相比,OE-circ_0032131组p-IKBα和p-NF-κB p65平均荧光强度升高,而circ_0032131敲低削弱了NF-κB信号的活性。结论circ_0032131在IL-1β诱导的人软骨细胞中高表达,敲低circ_0032131通过靶向调控NF-кB通路减轻IL-1β诱导的软骨细胞凋亡、ECM降解和炎症。
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关键词
环状RNA
0032131
NF-ΚB
骨关节炎
软骨变性
诊断标志物
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职称材料
题名
环状RNA 0032131调控NF-κB通路对骨关节炎软骨变性的影响
1
作者
周巧
刘健
万磊
汪元
王桂珍
齐亚军
胡月迪
朱艳
机构
安徽中医药大学第二附属医院
安徽中医药大学第一附属医院
安徽中医药大学
出处
《中国骨质疏松杂志》
北大核心
2025年第3期388-396,共9页
基金
国家自然基金面上项目(82274310)
安徽省名中医刘健工作室建设项目(中医药发展秘[2018]11号)
+4 种基金
安徽省第12批“115”创新团队[(皖人才办)[2019]1号]
高水平中医药重点学科建设项目-中医痹病学[zdxk20220129]
安徽省高校自然科学重大项目(2023AH040112)
安徽省高等学校科学研究项目(自然科学类)重点项目(2022AH050449)
2024年中央财政医疗服务与保障能力提升项目国家优势科室(优势专科)-老年病科(皖财社[2024]453号,2024lnbkzk08)。
文摘
目的旨在探讨hsa_circRNA_0032131对白细胞介素(IL)-1β诱导的骨关节炎(OA)软骨变性的作用。方法IL-1β处理的软骨细胞(CHON-001)用作OA的体外模型。细胞转染建立小干扰(si-RNA)和过表达质粒(OE)模型,分为IL-1β、IL-1β+OE-NC、IL-1β+OE-circ_0032131、IL-1β+si-NC和IL-1β+si-circ_0032131共5组。定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ_0032131、ADAMTS5、MMP13、SOX9、COL2A1和NF-κB p65 mRNA的表达。CCK-8和流式细胞术评估细胞活力。蛋白免疫印迹法(WB)测定ADAMTS5、MMP13、SOX9、COL2A1蛋白水平。免疫荧光检测p-NF-κB p65和p-IKBα的平均荧光强度。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-1β和IL-4的表达。相关性分析circ_0032131与炎症因子、ECM产物和NF-κB的关系。ROC曲线计算circ_0032131曲线下面积。结果与未处理细胞相比,IL-1β诱导的CHON-001细胞中的circ_0032131上调,IL-4水平下降,ADAMTS5、MMP13和NF-κB p65 mRNA水平升高,SOX9和COL2A1 mRNA水平下降。ROC曲线结果,circ_0032131曲线下的面积为0.9156(0.8136~0.9271),与SOX9、COL2A1和IL-4呈负相关,与MMP13、IL-1β和NF-κB p65呈正相关。circ_0032131敲低减轻IL-1β诱导软骨细胞损伤,与IL-1β+si-NC相比,IL-1β+si-circ_0032131组细胞活力升高,细胞凋亡下降,SOX9和COL2A1蛋白水平升高,ADAMTS5和MMP13蛋白水平下降。过表达circ_0032131后结果相反。此外,与IL-1β+OE-NC组相比,OE-circ_0032131组p-IKBα和p-NF-κB p65平均荧光强度升高,而circ_0032131敲低削弱了NF-κB信号的活性。结论circ_0032131在IL-1β诱导的人软骨细胞中高表达,敲低circ_0032131通过靶向调控NF-кB通路减轻IL-1β诱导的软骨细胞凋亡、ECM降解和炎症。
关键词
环状RNA
0032131
NF-ΚB
骨关节炎
软骨变性
诊断标志物
Keywords
circRNA_
0032131
NF-kB
osteoarthritis cartilage degeneration
diagnostic marker
分类号
R684.3 [医药卫生—骨科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
环状RNA 0032131调控NF-κB通路对骨关节炎软骨变性的影响
周巧
刘健
万磊
汪元
王桂珍
齐亚军
胡月迪
朱艳
《中国骨质疏松杂志》
北大核心
2025
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