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槲皮素对低浓度过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞副凋亡的影响
1
作者 耿文静 张国伟 +1 位作者 季敏 管怀进 《眼科新进展》 北大核心 2025年第11期846-851,共6页
目的 探讨槲皮素对低浓度过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人晶状体上皮细胞(LECs)副凋亡的影响。方法 体外培养人LECs细胞株SRA01/04,并随机分为对照组、H_(2)O_(2)组(50μmol·L^(-1) H_(2)O_(2))、H_(2)O_(2)+槲皮素组(50μmol·L... 目的 探讨槲皮素对低浓度过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人晶状体上皮细胞(LECs)副凋亡的影响。方法 体外培养人LECs细胞株SRA01/04,并随机分为对照组、H_(2)O_(2)组(50μmol·L^(-1) H_(2)O_(2))、H_(2)O_(2)+槲皮素组(50μmol·L^(-1) H _(2)O _(2)和20μmol·L^(-1)槲皮素)。通过透射电子显微镜和超分辨激光共聚焦显微镜观察细胞内质网空泡面积和数量;DCFH-DA荧光探针检测细胞中活性氧(ROS)水平;Western blot检测各组细胞中胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)、磷酸化IGF1R(p-IGF1R)、ALG-2相互作用蛋白X(ALIX)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、P38、磷酸化P38(p-P38)蛋白相对表达水平。另选8周龄Sprague-Dawley大鼠行晶状体离体培养,分为正常组、H_(2)O_(2)处理组(50μmol·L^(-1) H_(2)O_(2))、联合处理组(50μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)和20μmol·L^(-1)槲皮素)。通过体式显微镜观察大鼠晶状体混浊程度并对晶状体混浊面积进行定量;通过透射电子显微镜观察大鼠LECs中内质网超微结构;Western blot检测大鼠LECs中以上各种蛋白相对表达水平。结果 与对照组相比,H_(2)O_(2)组细胞中内质网空泡面积和数量、ROS水平均显著增加,p-IGF1R、p-ERK、p-P38和GRP78蛋白相对表达水平均升高,ALIX蛋白相对表达水平降低(均为P<0.001)。与H_(2)O_(2)组相比,H_(2)O_(2)+槲皮素组细胞中内质网空泡面积和数量、ROS水平均显著减少,p-IGF1R、p-ERK、p-P38和GRP78蛋白相对表达水平均降低,ALIX蛋白相对表达水平升高(均为P<0.01)。在大鼠晶状体离体培养模型中,与正常组相比,H_(2)O_(2)处理组大鼠晶状体混浊面积显著增加,LECs中内质网面积显著增加,p-IGF1R、p-ERK、p-P38和GRP78蛋白相对表达水平均升高,ALIX蛋白相对表达水平降低(均为P<0.0001)。与H_(2)O_(2)处理组相比,联合处理组大鼠晶状体混浊面积显著减少,LECs中内质网面积显著减少,p-IGF1R、p-ERK、p-P38和GRP78蛋白相对表达水平均降低,ALIX蛋白相对表达水平升高(均为P<0.01)。结论 槲皮素可抑制IGF1R/MAPK信号通路活化,缓解内质网应激,从而有效减轻LECs的副凋亡。为早期年龄相关性白内障的防治提供新策略。 展开更多
关键词 槲皮素 早期年龄相关性白内障 晶状体上皮细胞 副凋亡 氧化损伤
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HMGB1在过氧化氢诱导的晶状体上皮细胞DNA损伤和衰老中的作用
2
作者 吴苗苗 李鹏飞 +3 位作者 徐林慧 康丽华 季敏 管怀进 《眼科新进展》 北大核心 2025年第4期257-262,共6页
目的探究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的晶状体上皮细胞(LECs)氧化损伤环境下DNA损伤和衰老的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测年龄相关性白内障(ARC)患者(ARC组)和黄斑前膜疾病患者(... 目的探究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的晶状体上皮细胞(LECs)氧化损伤环境下DNA损伤和衰老的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测年龄相关性白内障(ARC)患者(ARC组)和黄斑前膜疾病患者(对照组)前囊膜组织中HMGB1的mRNA相对表达水平。Western blot检测LECs细胞株SRA01/04细胞中不同浓度(0、100、200、400μmol·L^(-1))H_(2)O_(2)处理后HMGB1蛋白表达变化,并筛选出最佳作用浓度用于后续构建细胞氧化损伤模型。将培养的SRA01/04细胞分为Control组(未经任何处理)、HA组(转染对照质粒HA)和OE-HMGB1组(转染质粒HMGB1),并通过RT-PCR和Western blot检测HMGB1的mRNA和蛋白相对表达水平。将培养的SRA01/04细胞分为H_(2)O_(2)组(400μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)处理)、H_(2)O_(2)+HA组(转染对照质粒HA,同时400μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)处理)和H_(2)O_(2)+OE-HMGB1组(转染质粒HMGB1,同时400μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)处理),运用免疫荧光法检测各组细胞DNA氧化损伤,Western blot检测各组细胞中磷酸化的组蛋白H2A(γH2A)、肿瘤蛋白53(P53)、细胞周期依赖性激酶抑制因子1A(P21)、细胞周期依赖性激酶抑制因子2A(P16)蛋白相对表达水平,β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色检测各组细胞衰老变化。结果RT-PCR检测结果显示,与对照组相比,ARC组患者前囊膜组织中HMGB1的mRNA相对表达水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.001)。此外,在H_(2)O_(2)诱导的氧化损伤模型中,HMGB1蛋白相对表达水平随H_(2)O_(2)浓度上升呈下降趋势。RT-PCR与Western blot检测结果显示,与HA组相比,OE-HMGB1组细胞中HMGB1 mRNA和蛋白相对表达水平均显著升高,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。免疫荧光染色结果显示,与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+HA组相比,H_(2)O_(2)+OE-HMGB1组细胞中γH2A蛋白相对表达水平和荧光强度均显著下降,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。与H_(2)O_(2)组及H_(2)O_(2)+HA组相比,H_(2)O_(2)+OE-HMGB1组细胞中P53、P21和P16蛋白相对表达水平均明显下降,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。SA-β-gal染色结果显示,与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+HA组相比,H_(2)O_(2)+OE-HMGB1组SA-β-gal染色阳性细胞明显减少,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。Western blot检测结果显示,与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+HA组相比,H_(2)O_(2)+OE-HMGB1组细胞衰老相关蛋白P53、P21和P16相对表达水平均明显下降,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。结论HMGB1通过增强DNA损伤修复能力来抑制LECs的损伤性DNA的积累和衰老。 展开更多
关键词 年龄相关性白内障 晶状体上皮细胞 DNA损伤 高迁移率族蛋白B1
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DCLRE1A调控线粒体生物发生在年龄相关性白内障发生发展中的作用
3
作者 孙诚浩 吴苗苗 +2 位作者 李鹏飞 季敏 管怀进 《眼科新进展》 北大核心 2025年第9期679-683,共5页
目的探究DNA交联修复1A(DCLRE1A)对晶状体上皮细胞(LECs)中线粒体功能的影响。方法选择30例30眼年龄相关性白内障(ARC)患者,分为ARC皮质型(ARCC组)、ARC核型(ARNC组)、ARC后囊下型(ARPC组),每组各10例。同时选择同期我院就诊的10例10眼... 目的探究DNA交联修复1A(DCLRE1A)对晶状体上皮细胞(LECs)中线粒体功能的影响。方法选择30例30眼年龄相关性白内障(ARC)患者,分为ARC皮质型(ARCC组)、ARC核型(ARNC组)、ARC后囊下型(ARPC组),每组各10例。同时选择同期我院就诊的10例10眼年龄匹配的诊断为黄斑前膜的透明晶状体患者为对照组。Western blot检测各组患者前囊膜组织中以及体外经过氧化氢(H_(2)O_(2))处理的晶状体上皮细胞株(SRA01/04)氧化损伤模型和过表达DCLRE1A模型(OE-DCLRE1A组)中DCLRE1A蛋白表达水平,检测过表达DCLRE1A对线粒体转录因子(TFAM)和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α(PGC1α)蛋白表达水平的影响。将正常培养的SRA01/04细胞随机分为Control组(未经任何处理)、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+HA组(转染对照质粒HA)、H_(2)O_(2)+OE-DCLRE1A组(转染质粒DCLRE1A),RT-PCR测定各组细胞mtDNA表达,免疫荧光染色法检测各组细胞线粒体膜电位(MMP)和线粒体活性氧(ROS)的变化。结果Western blot检测结果显示,与对照组相比,ARCC组、ARNC组、ARPC组患者晶状体前囊膜组织中DCLRE1A蛋白相对表达水平均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。体外诱导的H_(2)O_(2)细胞氧化损伤模型中,与Control组相比,H_(2)O_(2)组细胞中DCLRE1A蛋白相对表达水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.001)。DCLRE1A过表达效率结果显示,与Control组相比,OE-DCLRE1A组细胞中DCLRE1A蛋白相对表达水平显著增加,差异有统计学意义(P<0.001)。RT-PCR检测结果显示,与H_(2)O_(2)+HA组相比,H_(2)O_(2)+OE-DCLRE1A组细胞中mtDNA表达水平明显上升,差异有统计学意义(P<0.001)。Western blot检测结果显示,与H_(2)O_(2)+HA组相比,H_(2)O_(2)+OE-DCLRE1A组细胞中TFAM和PGC1α蛋白相对表达水平均明显上升,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。免疫荧光染色结果显示,与H_(2)O_(2)+HA组相比,H_(2)O_(2)+OE-DCLRE1A组细胞中MMP水平明显恢复,线粒体ROS累积减少,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。结论在H_(2)O_(2)诱导的氧化应激条件下,DCLRE1A通过调控线粒体生物发生促进LECs内损伤性mtDNA的修复,从而减少LECs凋亡,参与ARC的发生发展。 展开更多
关键词 年龄相关性白内障 晶状体上皮细胞 线粒体DNA损伤修复 DNA交联修复基因
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山奈酚在H_(2)O_(2)诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤及凋亡中的作用与机制研究
4
作者 李亚楠 孙朝晖 +3 位作者 王海燕 左建霞 赵娴 刘明琦 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2025年第1期22-26,共5页
目的探究山奈酚在过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人晶状上皮细胞氧化损伤、凋亡中的作用,以及对Janus蛋白酪氨酸激酶2/信号转导与激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路的调控作用。方法体外培养人晶状上皮细胞HLE-B3并分为:空白组(不做干预处理)... 目的探究山奈酚在过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人晶状上皮细胞氧化损伤、凋亡中的作用,以及对Janus蛋白酪氨酸激酶2/信号转导与激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路的调控作用。方法体外培养人晶状上皮细胞HLE-B3并分为:空白组(不做干预处理)、模型组(400μmol·L^(-1) H_(2)O_(2))、山奈酚组(400μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)+40μmol·L^(-1)山奈酚)、AG490组(400μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)+50μmol·L^(-1) JAK2/STAT3信号通路抑制剂AG490)、抑制剂组(400μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)+40μmol·L^(-1)山奈酚+50μmol·L^(-1) AG490)和激活剂组(400μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)+40μmol·L^(-1)山奈酚+0.5μmol·L^(-1) JAK2/STAT3信号通路激活剂C-A1)。干预24 h后,采用Hoechst 33258染色法测定细胞凋亡率;丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒检测MDA、SOD水平;Western blot测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、JAK2、STAT3、磷酸化JAK2(p-JAK2)和磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达水平。结果与空白组相比,模型组细胞凋亡率、MDA、Caspase-3及p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平均升高(均为P<0.05),SOD和Bcl-2蛋白表达水平均降低(均为P<0.05)。与模型组相比,山奈酚组和AG490组细胞凋亡率、MDA、Caspase-3及p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平均降低(均为P<0.05),SOD和Bcl-2蛋白表达水平均升高(均为P<0.05)。与山奈酚组相比,抑制剂组细胞凋亡率、MDA、Caspase-3及p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平均降低,SOD和Bcl-2蛋白表达水平均升高(均为P<0.05);激活剂组细胞凋亡率、MDA、Caspase-3及p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平均升高,SOD和Bcl-2蛋白表达水平均降低(均为P<0.05)。结论山奈酚能够通过抑制JAK2/STAT3信号通路发挥减轻H_(2)O_(2)诱导的HLE-B3细胞氧化损伤的作用,并抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 白内障 晶状体上皮细胞 山奈酚 过氧化氢 JAK2/STAT3通路 氧化损伤 凋亡
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高度近视白内障患者晶状体前囊膜中circRNAs的差异性表达
5
作者 韩圆圆 孙凤 +5 位作者 刘艳 徐梦月 许澈 李娜 李娟 王剑锋 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第9期1997-2005,共9页
目的分析高度近视白内障(HMC)患者晶状体前囊膜组织中circRNAs的差异性表达及其生物学功能,探讨circRNA在高度近视白内障中的作用。方法通过白内障手术术中获取36例年龄相关性白内障(ARC)和36例HMC患者晶状体前囊膜标本,两组中各选取18... 目的分析高度近视白内障(HMC)患者晶状体前囊膜组织中circRNAs的差异性表达及其生物学功能,探讨circRNA在高度近视白内障中的作用。方法通过白内障手术术中获取36例年龄相关性白内障(ARC)和36例HMC患者晶状体前囊膜标本,两组中各选取18例进行全转录组测序和生物学分析。余下36例采用RT-qPCR对circPDGFRA、circFOXJ3、hsa_circ_0004767、hsa_circ_0007528、ciCRIM1、circMAN1A2、circSLC5A3、circPTK2进行临床验证。随后选择hsa_circ_0007528进行细胞实验,检测hsa_circ_0007528对晶状体上皮细胞(LECs)增殖、迁移和凋亡的影响。结果两组患者标本中共检测出16192个circRNAs,其中62个circRNAs差异性表达(29个上调、33个下调)。GO和KEGG分析检测,差异性表达的circRNAs多集中在细胞质、核质和内质网中,参与Gap junction、PI3K-Akt signaling pathway、NF-kappa B signaling pathway、Jak-STAT signaling pathway、HIF-1 signaling pathway、MAPK signaling pathway等信号通路(P<0.05)。ceRNA网络预测多个靶基因。RT-qPCR验证与测序结果一致(P<0.01)。CCK-8、Transwell结果显示,hsa_circ_0007528上调抑制了细胞增殖(P<0.001)和迁移(P<0.01)。流式细胞术显示hsa_circ_0007528上调促进了细胞的凋亡(P<0.0001)。结论HMC患者晶状体前囊膜中circRNAs的表达谱与ARC存在差异。hsa_circ_0007528上调抑制LECs的增殖、迁移、促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 高度近视白内障 circRNA谱 全转录组测序 hsa_circ_0007528 晶状体上皮细胞
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高尿酸环境对晶状体透明度的影响及作用机制
6
作者 王盛 林宏亮 +2 位作者 陈艳蕾 覃泳杰 张洪洋 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2024年第11期852-856,共5页
目的通过构建大鼠晶状体离体培养模型探讨高尿酸环境对白内障形成的影响及机制。方法采用成年Sprague Dawley大鼠晶状体,在高尿酸培养环境下离体培养。将大鼠晶状体分为空白对照组(15眼)和尿酸干预组(15眼)。尿酸干预组采用含尿酸800μm... 目的通过构建大鼠晶状体离体培养模型探讨高尿酸环境对白内障形成的影响及机制。方法采用成年Sprague Dawley大鼠晶状体,在高尿酸培养环境下离体培养。将大鼠晶状体分为空白对照组(15眼)和尿酸干预组(15眼)。尿酸干预组采用含尿酸800μmol·L^(-1)的M-199培养液培养,空白对照组采用不含尿酸的M-199培养液培养,均培养7 d。通过光学显微镜观察两组大鼠晶状体混浊程度;Gomori六胺银法检测两组大鼠晶状体中尿酸盐沉积情况;SA-β-gal染色法检测两组大鼠晶状体细胞衰老情况;TUNEL染色法检测两组大鼠晶状体细胞凋亡情况。结果尿酸干预组大鼠晶状体于第5天时开始出现混浊,并于第7天时混浊分级显著升高,与空白对照组大鼠晶状体混浊分级相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。空白对照组大鼠晶状体上皮细胞排列整齐,周围未见尿酸盐沉积,仅有极少数蓝染的晶状体上皮细胞,且未发现明显的阳性细胞;尿酸干预组大鼠晶状体赤道部及前囊下晶状体上皮细胞排列紊乱,周围出现黑棕色的尿酸盐结晶,出现较多的蓝染晶状体上皮细胞,且出现了少量阳性细胞。高尿酸环境下,尿酸盐结晶在大鼠晶状体囊膜下沉积,周围晶状体上皮细胞衰老,少量晶状体上皮细胞凋亡。结论高尿酸环境在大鼠晶状体离体培养模型中能够稳定有效地诱导白内障的发生,其机制可能与尿酸诱导晶状体上皮细胞发生衰老和凋亡有关。 展开更多
关键词 白内障 晶状体上皮细胞 离体培养 尿酸 衰老 凋亡
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姜黄素对晶状体上皮细胞增殖的抑制作用 被引量：19
7
作者 胡艳红 祁明信 +3 位作者 黄秀榕 严京 吴正正 马兰 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期122-124,共3页
目的探讨姜黄素(Cur)对表皮生长因子(EGF)诱导的牛晶状体上皮细胞(LEC)增殖的抑制作用及其量效与时效关系。方法MTT测定不同浓度的Cur作用于牛LEC不同时间后细胞增殖的情况,流式细胞术(FCM)检测不同浓度的Cur作用于牛LEC不同时间后增殖... 目的探讨姜黄素(Cur)对表皮生长因子(EGF)诱导的牛晶状体上皮细胞(LEC)增殖的抑制作用及其量效与时效关系。方法MTT测定不同浓度的Cur作用于牛LEC不同时间后细胞增殖的情况,流式细胞术(FCM)检测不同浓度的Cur作用于牛LEC不同时间后增殖细胞核抗原(PCNA)的表达状况。结果(1)MTT法结果表明,高、中、低不同浓度的Cur作用24h后,其增殖抑制率分别为66.65%、22.43%、8.72%,呈明显的剂量-效应关系,20mg/L的Cur作用6、12、24、48、72h后,其增殖抑制率分别为9.97%、19.81%、22.43%、41.67%、81.59%,呈明显的时间-效应关系。(2)FCM检测表明,Cur对LEC内PCNA蛋白表达有明显的下调作用,也呈明显的时间-效应关系和剂量-效应关系。结论Cur能有效抑制EGF诱导的LEC增殖,可望成为防治后发性白内障的理想药物。 展开更多
关键词 姜黄素 晶状体上皮细胞 抗增殖 后发性白内障
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透明晶状体和老年性白内障晶状体上皮细胞水通道蛋白1的表达 被引量：8
8
作者 张虹 彭洁 +2 位作者 胡维琨 谢二娟 李贵刚 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期360-362,共3页
目的　探讨透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞水通道蛋白 1(aquaporin 1,AQP1)的表达水平。方法　收集 5例透明晶状体和 4 0例老年性白内障患者的前囊膜。应用免疫组织化学方法和计算机图像分析技术对前囊膜下晶状体上皮细胞A... 目的　探讨透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞水通道蛋白 1(aquaporin 1,AQP1)的表达水平。方法　收集 5例透明晶状体和 4 0例老年性白内障患者的前囊膜。应用免疫组织化学方法和计算机图像分析技术对前囊膜下晶状体上皮细胞AQP1进行检测。结果　AQP1阳性表达在透明晶状体和老年性白内障患者前囊膜下晶状体上皮细胞的细胞膜。图像分析透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。老年性白内障患者晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值低于透明晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值。结论　透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞的细胞膜表达AQP1,AQP1可能在老年性白内障发生发展中起一定作用。 展开更多
关键词 老年性白内障 透明晶状体 晶状体上皮细胞 患者 AQP 水通道蛋白1 前囊膜 细胞膜 表达水平 显著性
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榄香烯对晶状体上皮细胞增殖的抑制作用 被引量：9
9
作者 黄秀榕 祁明信 +3 位作者 胡艳红 严京 吴正正 马兰 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2006年第9期1048-1051,共4页
目的:研究榄香烯(Ele)对重组人表皮生长因子(rhEGF)诱导的晶状体上皮细胞(LEC)增殖的抑制作用及剂量-效应和时间-效应关系,探寻防治后发性白内障的有效方法。方法:四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定不同浓度Ele对增殖状态的牛LEC活性的抑制作用... 目的:研究榄香烯(Ele)对重组人表皮生长因子(rhEGF)诱导的晶状体上皮细胞(LEC)增殖的抑制作用及剂量-效应和时间-效应关系,探寻防治后发性白内障的有效方法。方法:四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定不同浓度Ele对增殖状态的牛LEC活性的抑制作用,同时观察时间-效应关系;流式细胞术(FCM)检测不同浓度的Ele对增殖状态的牛LEC增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的抑制作用,同时观察时间-效应关系。结果:低、中、高不同浓度的Ele作用24 h后,其增殖抑制率随浓度增加而增高,呈明显的剂量-效应关系;中浓度的Ele作用6、12、24、48、72 h后,其增殖抑制率随作用时间延长而增高,呈明显的时间-效应关系。Ele对LEC内PCNA蛋白表达有明显的下调作用,低、中、高不同浓度的Ele作用24 h后,其PCNA表达率随浓度增加而降低,呈明显的剂量-效应关系;中浓度的Ele作用6、12、24、48、72 h后,其PCNA表达率随作用时间延长而降低,呈明显的时间-效应关系。结论:Ele能有效抑制rhEGF诱导的LEC增殖,对防治后发性白内障具有广阔的前景。 展开更多
关键词 榄香烯 晶状体上皮细胞 增殖 后发性白内障
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不同类型年龄相关性白内障晶状体上皮细胞衰老标记蛋白30的表达及与细胞凋亡的关系 被引量：10
10
作者 刘兰 蔡小军 +4 位作者 余爱华 宋寅伟 王海涛 刘洋 焦峰 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期529-533,共5页
背景随着人口的老龄化，白内障的发病率逐年上升，研究表明，衰老标记蛋白30（SMP-30）与白内障的发生发展关系密切。目的了解不同类型白内障晶状体上皮细胞（LECs）中SMP-30的表达及LECs的凋亡情况，探讨不同类型年龄相关性白内障的发... 背景随着人口的老龄化，白内障的发病率逐年上升，研究表明，衰老标记蛋白30（SMP-30）与白内障的发生发展关系密切。目的了解不同类型白内障晶状体上皮细胞（LECs）中SMP-30的表达及LECs的凋亡情况，探讨不同类型年龄相关性白内障的发病机制。方法收集2010年3—10月在武汉大学中南医院眼科行白内障超声乳化摘出术的年龄相关性皮质性白内障59例80眼和核性白内障53例70眼，2个组患者年龄匹配（P〉0．05）。白内障手术中环形撕取晶状体前囊膜，应用免疫组织化学法和实时荧光定量聚合酶链反应（real-time PCR）技术分别定性、定量检测SMP-30蛋白及其mRNA在2个组白内障LECs中的表达。用TUNEL标记法观察LECs的凋亡情况，对比分析两种类型白内障晶状体前囊膜中SMP-30的表达及细胞凋亡的差异。结果免疫组织化学法检测表明，SMP-30主要表达于晶状体囊膜的细胞质中，在晶状体囊膜中央部表达较弱，越近周边表达越强，差异均有统计学意义（核性：45．21±2．79vs76．42±11．21，P=0．042；皮质性：108．32±4．32vs206．34±15．67，P=0．037）。核性白内障LECs中SMP-30 mRNA的表达少于皮质性，差异有统计学意义（60．02±9．08vs157．33±13．01，P=0．034）。TUNEL染色显示，2个组白内障LECs凋亡百分率中央部明显高于周边部，差异均有统计学意义（核性：19．34％±0．11％vs8．32％±0．57％，P=0．025；皮质性：42．07％±0．86％vs13．55％±0．64％，P=0．010），细胞凋亡百分率低于皮质性，差异有统计学意义（14．05％±0．22％vs27．70％±0．81％，P=0．007）。结论两种类型年龄相关性白内障的发生均与LECs凋亡有关，SMP-30的表达与其密切相关。 展开更多
关键词 衰老标记蛋白30 白内障 晶状体上皮细胞 凋亡
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紫外线对人晶状体上皮细胞凋亡的诱导及Bcl-2,Bax基因的影响 被引量：11
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作者 贾松柏 石晶明 +1 位作者 陈翾 唐罗生 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期730-736,共7页
目的:研究紫外线照射体外培养人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cell,HLEC)对凋亡的诱导、凋亡调控基因(Bax,Bcl-2)表达的变化,探讨紫外线诱导HLEC凋亡的机制。方法:以实验室培养的HLEC细胞株为研究模型,采用同一紫外线光源对HLE... 目的:研究紫外线照射体外培养人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cell,HLEC)对凋亡的诱导、凋亡调控基因(Bax,Bcl-2)表达的变化,探讨紫外线诱导HLEC凋亡的机制。方法:以实验室培养的HLEC细胞株为研究模型,采用同一紫外线光源对HLEC进行照射。按紫外线照射时间将HLEC分为0,5,10,15及30 min组。采用Annexin V+PI双染流式细胞计数对HLEC凋亡进行检测,用原位杂交的方法检测各组Bax,Bcl-2 mRNA的表达。结果:随紫外线照射时间的延长HLEC凋亡率增加,Bcl-2阳性细胞率逐渐降低;而Bax阳性细胞率逐渐增加。HLEC凋亡率与Bcl-2和Bax的比率呈负相关(r=-0.874,P<0.05)。结论:紫外线照射可诱导HLEC凋亡,Bax和Bcl-2可能参与了紫外线诱导的HLEC凋亡的基因调控过程。 展开更多
关键词 紫外线 人晶状体上皮细胞 白内障 凋亡 BAX BCL-2
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水通道蛋白-1在高糖培养人晶状体上皮细胞中的表达 被引量：7
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作者 林雯 谢茂松 +2 位作者 徐国兴 何青 郑卫东 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期734-738,共5页
目的研究水通道蛋白-1(AQP-1)在糖尿病性白内障发病机制中的作用。方法从健康的供体眼中分离出人晶状体囊膜,用组织块培养法将人晶状体囊膜分别置于1g/L葡萄糖+体积分数15%胎牛血清的DMEM培养液中(对照组)或4.5g/L葡萄糖+15%胎牛血清的D... 目的研究水通道蛋白-1(AQP-1)在糖尿病性白内障发病机制中的作用。方法从健康的供体眼中分离出人晶状体囊膜,用组织块培养法将人晶状体囊膜分别置于1g/L葡萄糖+体积分数15%胎牛血清的DMEM培养液中(对照组)或4.5g/L葡萄糖+15%胎牛血清的DMEM培养液中进行培养(高糖组)。培养3d、28d后观察2组人晶状体上皮细胞(LECs)的生长状态。采用免疫荧光技术和流式细胞术检测AQP-1在人LECs中表达的平均荧光强度,应用流式细胞术检测2组人LECs的凋亡和坏死情况,并进行比较。结果培养第3天2组LECs的生长形态近似,但培养28d高糖组坏死细胞增加。培养3d后高糖组人LECs的AQP-1免疫荧光表达较对照组明显增强,2组间平均荧光强度的差异有统计学意义(t=3.934,P=0.004),但2组间LECs的凋亡率和坏死率差异均无统计学意义(t=1.681,P=0.131;t=1.064,P=0.318)。培养28d后高糖组人LECs的AQP-1免疫荧光表达较对照组弱,差异有统计学意义(t=3.069,P=0.015),LECs凋亡率、坏死率较对照组升高,差异均有统计学意义(t=11.213,P<0.01;t=15.778,P<0.01)。结论 AQP-1的异常表达在糖尿病性白内障的发生发展中起重要作用。 展开更多
关键词 水通道蛋白-1 糖尿病性白内障 晶状体上皮细胞
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榄香烯诱导晶状体上皮细胞凋亡及其细胞和分子机制 被引量：9
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作者 黄秀榕 祁明信 康可人 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期970-974,共5页
目的探讨天然药物单体榄香烯(Ele)诱导晶状体上皮细胞(LEC)凋亡及其细胞和分子机制。方法通过透射电子显微镜观察Ele对体外培养的牛LEC超微结构的影响;采用流式细胞术观察Ele对LEC的DNA含量及线粒体跨膜电位(ΔΨm)的影响。结果透射电... 目的探讨天然药物单体榄香烯(Ele)诱导晶状体上皮细胞(LEC)凋亡及其细胞和分子机制。方法通过透射电子显微镜观察Ele对体外培养的牛LEC超微结构的影响;采用流式细胞术观察Ele对LEC的DNA含量及线粒体跨膜电位(ΔΨm)的影响。结果透射电镜下可观察到Ele组LEC呈现核染色质凝集、固缩、边集、核碎裂等典型的细胞凋亡形态学改变。Ele组LEC细胞核的DNA含量显著低于空白对照组,随药物作用时间延长而更低(P<0.01);Ele组细胞质线粒体ΔΨm低于空白对照组,且在药物作用早期即已明显低于空白对照组(P<0.01)。结论①Ele能显著诱导晶状体上皮细胞凋亡。②Ele通过使LEC细胞核DNA含量下降,诱导细胞凋亡。③Ele使细胞质内线粒体ΔΨm下降,使细胞进入不可逆性凋亡的过程。线粒体ΔΨm下降是Ele诱导LEC凋亡的早期事件。④Ele诱导LEC凋亡是通过细胞核和细胞质两种途径。⑤Ele诱导LEC凋亡的作用可能是其减轻晶状体后囊混浊发生和发展、防治后发性白内障的细胞和分子生物学机制。 展开更多
关键词 榄香烯 白内障 晶体 上皮细胞 细胞凋亡
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老年性白内障的不同类型与晶状体上皮细胞密度的改变 被引量：8
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作者 柳夏林 刘奕志 +1 位作者 刘欣华 郑湖玲 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第1期50-52,共3页
【目的】探讨晶状体上皮细胞密度的改变与不同类型老年性白内障的关系。【方法】选取超声乳化白内障摘除手术病人的晶状体前囊膜标本 ,其中白内障的类型被分为皮质型 (成熟期 )、核硬化型 (≥NⅢ 级 )、后囊下型和混合型。健康成年人透... 【目的】探讨晶状体上皮细胞密度的改变与不同类型老年性白内障的关系。【方法】选取超声乳化白内障摘除手术病人的晶状体前囊膜标本 ,其中白内障的类型被分为皮质型 (成熟期 )、核硬化型 (≥NⅢ 级 )、后囊下型和混合型。健康成年人透明晶状体的前囊膜标本来源于眼库的供体眼球。所有前囊膜标本经铺片、固定染色后 ,细胞计数测定前囊膜中央区晶状体上皮细胞密度 (LECD)。【结果】健康成年男性透明晶状体LECD为 (4 15 2± 75 0 )个 /mm2 ,女性为 (4 874± 5 5 0 )个 /mm2 (P<0 0 1) ;核硬化型白内障 (≥NⅢ 级 )的LECD为 (5 12 0± 45 0 )个 /mm2 ,核硬化型白内障 (≥NⅢ 级 )晶状体上皮细胞密度高于其他各组及正常对照 (P <0 0 1) ,其中男性与女性的LECD分别为 (5 15 0± 35 0 )个 /mm2 和 (5 0 0 5± 480 )个 /mm2 (P >0 0 1)。【结论】健康成年女性的透明晶状体上皮细胞密度高于男性 ;核硬化型白内障 (≥NⅢ 级 )中男女晶状体上皮细胞密度无显著差异 ;以上结果结合当前流行病学的研究资料提示晶状体上皮细胞密度高可能是核硬化型白内障发生的易感因素 。 展开更多
关键词 晶状体 白内障 细胞计数 上皮细胞 细胞密度 老年人
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年龄相关性白内障晶状体上皮细胞的Smac、caspase-3表达及死亡方式 被引量：13
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作者 郑广瑛 梁圆圆 王倩 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期351-355,共5页
目的探讨年龄相关性白内障晶状体上皮细胞(LECs)中Smac、caspase-3的表达和LECs超微结构变化及死亡方式。方法收集皮质性(30例)、核性(24例)、后囊下性(28例)年龄相关性白内障患者晶状体前囊片,以12例高度近视摘出的透明晶状体的晶状体... 目的探讨年龄相关性白内障晶状体上皮细胞(LECs)中Smac、caspase-3的表达和LECs超微结构变化及死亡方式。方法收集皮质性(30例)、核性(24例)、后囊下性(28例)年龄相关性白内障患者晶状体前囊片,以12例高度近视摘出的透明晶状体的晶状体前囊片为对照,应用免疫组织化学链酶菌抗生素蛋白-过氧化物酶法检测Smac、caspase-3蛋白在LECs中的表达,并采用透射电镜观察LECs超微结构的改变及死亡方式。结果Smac、caspase-3蛋白在年龄相关性白内障组LECs中的阳性表达率分别为81.71%、78.05%,与透明晶状体组比较染色阳性率及染色强度差异均有统计学意义(P<0.05)。3种类型年龄相关性白内障透射电镜下均可见LECs多表现为肿胀,线粒体嵴缺失、空泡变、髓样化,粗面内质网扩张、颗粒融合和脱颗粒现象,仅1例核性白内障中可见到核膜皱缩向外呈锐角凸起,部分双层核膜融合,模糊不清,细胞核内染色质浓缩,未见凋亡小体。结论Smac、caspase-3蛋白可能参与了年龄相关性白内障的形成。年龄相关性白内障LECs存在凋亡、胀亡等多种细胞死亡方式,细胞凋亡与细胞胀亡的发生可能存在部分分子机制的重叠。LECs超微结构的改变表明线粒体形态改变和功能异常在年龄相关性白内障发生中起重要作用。 展开更多
关键词 年龄相关性白内障 晶状体上皮细胞 SMAC CASPASE-3 凋亡 胀亡
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牛磺酸对低剂量链脲佐菌素—糖尿病性白内障抑制作用的研究 被引量：10
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作者 陈翠真 董冰 +3 位作者 宋旭东 陈凤华 张伟 李根林 《眼科研究》 CSCD 2000年第1期38-40,共3页
目的　研究牛磺酸是否能抑制STZ诱发的糖尿病性白内障方法　将30只Wistar大鼠平均分为3组,定期用裂隙灯照相显微镜和微量快速血糖仪检测各组动物,实验结束(12周)用TUNEL法检测各组晶状体上皮细胞凋亡。结果　STZ组产生了持续和长时间的... 目的　研究牛磺酸是否能抑制STZ诱发的糖尿病性白内障方法　将30只Wistar大鼠平均分为3组,定期用裂隙灯照相显微镜和微量快速血糖仪检测各组动物,实验结束(12周)用TUNEL法检测各组晶状体上皮细胞凋亡。结果　STZ组产生了持续和长时间的高血糖,8～12周有80%晶状体发生白内障,几乎所有细胞呈现凋亡。相反,4%牛磺酸组则迅速阻断了高血糖形成,如同对照组一样,晶状体一直保持透明,仅有极少细胞凋亡。结论　4%牛磺酸能完全抑制糖性白内障发生,其主要作用可能与其抗氧化功能和抑制高血糖有关。 展开更多
关键词 牛磺酸 糖尿病 白内障 晶状体上皮细胞
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去整合素抑制兔晶状体上皮细胞增殖的实验研究 被引量：8
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作者 姬翔 梁皓 +4 位作者 李霞 陈金卯 黄敏丽 何剑峰 谭少健 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2010年第4期304-307,共4页
目的探讨去整合素（Kistrin）对兔眼后发性白内障发生过程中晶状体上皮细胞（lens epithelial cells,LEC）增殖的抑制作用。方法雄性新西兰大白兔36只,随机分为对照组：A组,实验组：B、C、D组,每组各9只兔9眼（右眼）。4组均行透明晶状... 目的探讨去整合素（Kistrin）对兔眼后发性白内障发生过程中晶状体上皮细胞（lens epithelial cells,LEC）增殖的抑制作用。方法雄性新西兰大白兔36只,随机分为对照组：A组,实验组：B、C、D组,每组各9只兔9眼（右眼）。4组均行透明晶状体囊外摘出术,术毕A组兔眼前房注入林格液0.2mL,B、C、D组分别注入40μg.L-1、80μg.L-1和160μg.L-1Kistrin溶液0.2mL。术后第14天采用免疫组织化学法对4组兔后发性白内障发生过程中LEC增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclearantigen,PCNA）的表达进行检测,计算增殖指数（proliferative index,PI）值,PI=PCNA阳性细胞数/50×100%;通过HE染色及透射电镜观察角膜改变情况。结果（1）术后第14天PI值A组：0.320±0.020、B组：0.175±0.030、C组：0.065±0.020、D组：0.190±0.050,B、C、D组较A组PI值均明显降低（均为P〈0.01）;C组较B、D组PI值均明显降低（均为P〈0.01）,B组与D组PI值比较差异无统计学意义（P〉0.05）;（2）术后第14天赤道部PI值A组：0.390±0.060、B组：0.230±0.040、C组：0.110±0.030、D组：0.240±0.080;中央部PI值A组：0.250±0.050、B组：0.120±0.030、C组：0.060±0.020、D组：0.140±0.040,4组赤道部较中央部PCNA阳性表达均明显升高（均为P〈0.01）。（3）实验组C组与A组比较：角膜内皮细胞超微结构无明显改变。结论40~160μg.L-1的Kistrin灌注液可有效地抑制兔眼后发性白内障的发生;赤道部LEC增殖能力强于中央部;80μg.L-1可作为进一步研究Kistrin抑制后发性白内障形成的较适宜浓度。 展开更多
关键词 去整合素 后发性白内障 增殖细胞核抗原 晶状体上皮细胞 兔
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晶状体上皮细胞凋亡与过氧化氢诱导白内障形成研究 被引量：6
18
作者 丁建光 李含玉 +2 位作者 曾令柏 王家翠 杨策尧 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2001年第3期202-204,共3页
目的探讨晶状体上皮细胞凋亡与皮质性白内障形成的关系。方法用２００μｍｏｌ／Ｌ过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）诱导离休兔晶状体白内障形成，ＴＵＮＥＬ法检测 Ｈ２Ｏ２作用 １，６，１８，２４，４８ ｈ的晶状体上皮凋亡细胞，同时测定晶状... 目的探讨晶状体上皮细胞凋亡与皮质性白内障形成的关系。方法用２００μｍｏｌ／Ｌ过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）诱导离休兔晶状体白内障形成，ＴＵＮＥＬ法检测 Ｈ２Ｏ２作用 １，６，１８，２４，４８ ｈ的晶状体上皮凋亡细胞，同时测定晶状体超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性。结果 Ｈ２Ｏ２作用 １ｈ，晶状体保持透明，未发现凋亡上皮细胞。随着作用时间的延长，凋亡上皮细胞数量逐渐增多，晶状体逐渐变混浊。 ＳＯＤ活性早期无变化，１８ ｈ后逐渐降低。结论晶状体上皮细胞凋亡是皮质性白内障形成的细胞学基础，其发生先于晶状体抗氧化机制的变化。 展开更多
关键词 细胞凋亡 白内障 晶状体上皮细胞 过氧化氢 超氧化物歧化酶
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榄香烯对人晶状体上皮细胞增生及细胞周期的影响 被引量：5
19
作者 胡艳红 黄秀榕 +4 位作者 祁明信 侯补元 陈胜 柯发杰 冯春燕 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2009年第11期969-972,共4页
目的探讨中药单体榄香烯(Ele)对人晶状体上皮细胞株(HLE-B3)增生及细胞周期的影响。方法利用重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)诱导HLE-B3增生,将80mg/L的Ele作用在处于增生状态下的HLE-B324h后,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测Ele对HLE... 目的探讨中药单体榄香烯(Ele)对人晶状体上皮细胞株(HLE-B3)增生及细胞周期的影响。方法利用重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)诱导HLE-B3增生,将80mg/L的Ele作用在处于增生状态下的HLE-B324h后,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测Ele对HLE-B3增生的抑制作用;苏木精-伊红染色观察Ele作用后HLE-B3细胞形态的改变;流式细胞术(FCM)检测Ele对HLE-B3细胞周期的影响。结果MTT检测显示:rhbFGF组HLE-B3吸光度值(0.5990±0.0531)较正常组(0.4091±0.0422)显著升高,Ele组HLE-B3吸光度值(0.4500±0.0614)较rhbFGF组显著降低,抑制率达24.90%(P<0.01)。苏木精-伊红染色后光学显微镜下观察到rhbFGF组较正常组细胞数量增多,细胞形态清晰,胞浆丰富,胞核清晰,交织呈网状结构;Ele组细胞数量明显减少,胞浆减少,轮廓不清,交织的网状结构减少,甚至有的细胞变圆,细胞核凝集,见核固缩现象,胞浆嗜酸性染色。FCM检测细胞周期变化时发现:G1期的细胞在rhbFGF组(42.062%±1.270%)较正常组(46.422%±3.765%)减少(P<0.05),Ele组(60.665%±2.069%)较rhbFGF组明显增加(P<0.01);S期的细胞在rhbFGF组(51.647%±1.123%)较正常组(31.842%±2.798%)明显增加(P<0.01),Ele组(30.222%±3.429%)较rhbFGF组明显减少(P<0.01);G2期的细胞在rhbFGF组(6.288%±0.966%)较正常组(21.735%±3.806%)明显减少(P<0.01),Ele组(9.112%±1.659%)较rhbFGF组明显增加(P<0.01)。结论Ele能通过改变HLE-B3细胞形态及细胞周期的进程而有效抑制rhbFGF诱导的HLE-B3增生,有望成为防治后发性白内障的理想药物。 展开更多
关键词 榄香烯 晶状体上皮细胞 后发性白内障 细胞增生 细胞周期
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5-氟尿嘧啶抑制兔晶状体上皮细胞增殖及眼内毒性的研究 被引量：10
20
作者 孙岩秀 李筱荣 +2 位作者 张晓红 孙慧敏 袁佳琴 《眼科研究》 CSCD 2000年第3期224-226,共3页
目的　研究 5 氟尿嘧啶 ( 5 Fu)对兔晶状体上皮细胞 (LECs)增殖的影响及眼内毒性。方法　传代兔LECs添加不同质量浓度的 5 Fu ,作用一定时间后 ,MTT法测定OD值。选取对LECs增殖有明显抑制效果的质量浓度 ,进行兔眼前房注射 ,4天后进... 目的　研究 5 氟尿嘧啶 ( 5 Fu)对兔晶状体上皮细胞 (LECs)增殖的影响及眼内毒性。方法　传代兔LECs添加不同质量浓度的 5 Fu ,作用一定时间后 ,MTT法测定OD值。选取对LECs增殖有明显抑制效果的质量浓度 ,进行兔眼前房注射 ,4天后进行角膜内皮分析和眼内炎性细胞分析。结果　体外实验质量浓度为 0 2 5 μg/ml有显著的抑制效果(P <0 0 5 ) ;前房注射的 5 Fu达 5mg/ml时 ,表现出角膜内皮形态改变及前节炎性反应 ,随质量浓度升高 ,程度加重。结论　 5 Fu对兔LECs增殖的体外抑制呈时间依赖性和质量浓度依赖性 ,前房注射 5 Fu产生的眼毒性与其质量浓度正相关。 展开更多
关键词 5-氟尿嘧啶 晶状体上皮细胞 眼内毒性
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