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肿瘤坏死因子α在抗鼠衣原体生殖道感染过程中的作用
被引量:
6
1
作者
陈曦
刘璐瑶
+4 位作者
张旭
陆春雪
陈利
全淑芬
陈丽丽
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期388-393,共6页
目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)在抗衣原体感染免疫以及介导衣原体生殖道病理损伤过程中的作用。方法以5~6周龄雌性C57BL/6J野生型小鼠及TNF-αR基因敲除小鼠为研究对象,野生型和TNF-αR基因敲除两组各15只小鼠,经生殖道感染1×10~...
目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)在抗衣原体感染免疫以及介导衣原体生殖道病理损伤过程中的作用。方法以5~6周龄雌性C57BL/6J野生型小鼠及TNF-αR基因敲除小鼠为研究对象,野生型和TNF-αR基因敲除两组各15只小鼠,经生殖道感染1×10~4包涵体形成单位的鼠衣原体,初次感染后第56天,每组8只小鼠再次感染同等剂量的鼠衣原体。每隔3~4 d取小鼠生殖道分泌物用于衣原体包涵体数目的检测。于初次感染后第80天处死小鼠,收集小鼠腹腔巨噬细胞,并分离生殖道和脾脏。观察输卵管和子宫角病理损伤程度,并采用盲法对管腔扩张以及炎性细胞浸润程度进行半定量分析;测定小鼠巨噬细胞培养上清中的IL-6、IL-8、IL-1α、IL-1β和TNF-α等前炎症因子水平;制备脾细胞悬液,体外经衣原体EB刺激后检测其产生的IL-4、IL-5、IL-17和IFN-γ等细胞因子水平。结果 TNF-αR基因敲除组生殖道衣原体清除速度与野生型组基本一致,与初次感染或再次感染无关;两组小鼠子宫角和输卵管的炎症程度差异没有统计学意义(P>0.05),但TNF-αR基因敲除组输卵管水肿程度明显低于野生型组(P<0.05)。腹腔巨噬细胞细胞因子检测结果显示,TNF-αR基因敲除小鼠的TNF-α水平高于野生型小鼠(P<0.05);脾细胞细胞因子水平显示,两组小鼠脾细胞均产生较高水平的IFN-γ,TNF-αR基因敲除小鼠产生的IL-17细胞因子水平低于野生型小鼠(P<0.05)。结论 TNF-α对小鼠生殖道清除鼠衣原体感染无影响,但可促进鼠衣原体引起的生殖道炎症病理损伤。
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关键词
鼠衣原体
肿瘤坏死因子Α
泌尿生殖道感染
基因敲除
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职称材料
口服鼠李糖乳杆菌GG减轻鼠衣原体感染引起的上生殖道病变
2
作者
周曾梓
孙信
+3 位作者
张琪
曾飞
尹嘉欣
王陆颖
《中南大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第11期1187-1194,共8页
目的:沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)泌尿生殖道感染引起输卵管积水和纤维化的机制尚不完全清楚。肠道微生物群除引起肠道疾病外,还与心脑血管疾病、肝硬化、呼吸道感染、多囊卵巢综合征、子宫内膜异位和细菌性阴道炎等肠外疾病...
目的:沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)泌尿生殖道感染引起输卵管积水和纤维化的机制尚不完全清楚。肠道微生物群除引起肠道疾病外,还与心脑血管疾病、肝硬化、呼吸道感染、多囊卵巢综合征、子宫内膜异位和细菌性阴道炎等肠外疾病的发生、发展密切相关。鼠李糖乳杆菌GG(Lactobacillus rhamnosus GG,LGG)是一种被广泛研究和应用的肠道益生菌,其益处包括治疗胃肠道疾病和调节机体免疫,它还可以缓解过敏反应和腹泻,并抑制各种呼吸道疾病和泌尿生殖系统病原体所致的疾病。本研究以致病性和Ct高度相似的鼠衣原体(Chlamydia muridarium,Cm)感染小鼠作为动物模型,初步探讨LGG对小鼠Cm上生殖道感染的调节作用及机制,为了解Ct泌尿生殖道感染的致病机制提供实验依据,并为Ct感染的治疗提供新的思路。方法:将6周龄C57BL/6J雌性小鼠分为实验组和对照组,其中实验组小鼠口服5×10^(8)菌落形成单位的LGG 19 d,对照组小鼠口服PBS。在两组小鼠口服LGG或PBS的第9天皮下注射2.5 mg孕酮,第14天经阴道感染1×10^(5)包涵体形成单位的Cm。小鼠感染Cm后,每周取阴道拭子和直肠拭子,将拭子系列稀释后接种HeLa细胞,24 h后进行间接免疫荧光染色,在显微镜下计数衣原体包涵体。于Cm感染后第14天和第63天分别处死小鼠,分离上、下生殖道,将组织匀浆接种HeLa细胞培养24 h后,计数两组小鼠双侧子宫角、输卵管卵巢及宫颈阴道组织中的Cm载量;用流式细胞术检测Cm感染后第14天小鼠脾T淋巴细胞胞内IFN-γ、IL-5和IL-17的分泌;观察感染后第63天小鼠双侧子宫角和输卵管的病理损伤,并将生殖道各部分进行病理切片和HE染色,评价输卵管管腔扩张和炎性细胞浸润程度;采用间接ELISA检测Cm感染后第14天和第63天小鼠血清特异性IgM和IgG水平。结果:Cm经阴道感染小鼠后,两组小鼠衣原体在生殖道的清除速度、感染后第14天双侧子宫角和输卵管的上行感染量、Cm从生殖道向肠道转移和定植量差异均无统计学意义(均P>0.05);Cm感染后第14天,实验组小鼠脾T淋巴细胞内IL-17的分泌水平较对照组小鼠显著降低(t=2.486,P<0.05),但两组小鼠脾分泌IFN-γ和IL-5的CD4+T淋巴细胞比例及血清Cm特异性IgM和IgG水平差异均无统计学意义(均P>0.05);Cm感染后第63天,实验组小鼠双侧子宫角和输卵管的炎症程度与对照组差异无统计学意义(P>0.05),但输卵管水肿程度显著低于对照组(P<0.05)。结论:口服LGG不影响Cm阴道感染小鼠病原体生殖道的上行感染、清除及其向肠道的转移和定植,亦未显著影响小鼠血清特异性IgM和IgG水平;口服LGG可减少Cm感染后小鼠脾Th17细胞应答水平,能减轻小鼠Ct感染引起的输卵管纤维化和输卵管积水。
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关键词
鼠
李糖乳杆菌GG
鼠衣原体
输卵管积水
白细胞介素-17
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职称材料
题名
肿瘤坏死因子α在抗鼠衣原体生殖道感染过程中的作用
被引量:
6
1
作者
陈曦
刘璐瑶
张旭
陆春雪
陈利
全淑芬
陈丽丽
机构
南华大学公共卫生学院
衡阳市健康危害因子检验检疫新技术研究重点实验室
南华大学医学院
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期388-393,共6页
基金
湖南省教育厅一般项目(18C0457)
湖南省大学生创新创业训练计划项目(2335)
衡阳市重点实验室项目(2018KJ110)。
文摘
目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)在抗衣原体感染免疫以及介导衣原体生殖道病理损伤过程中的作用。方法以5~6周龄雌性C57BL/6J野生型小鼠及TNF-αR基因敲除小鼠为研究对象,野生型和TNF-αR基因敲除两组各15只小鼠,经生殖道感染1×10~4包涵体形成单位的鼠衣原体,初次感染后第56天,每组8只小鼠再次感染同等剂量的鼠衣原体。每隔3~4 d取小鼠生殖道分泌物用于衣原体包涵体数目的检测。于初次感染后第80天处死小鼠,收集小鼠腹腔巨噬细胞,并分离生殖道和脾脏。观察输卵管和子宫角病理损伤程度,并采用盲法对管腔扩张以及炎性细胞浸润程度进行半定量分析;测定小鼠巨噬细胞培养上清中的IL-6、IL-8、IL-1α、IL-1β和TNF-α等前炎症因子水平;制备脾细胞悬液,体外经衣原体EB刺激后检测其产生的IL-4、IL-5、IL-17和IFN-γ等细胞因子水平。结果 TNF-αR基因敲除组生殖道衣原体清除速度与野生型组基本一致,与初次感染或再次感染无关;两组小鼠子宫角和输卵管的炎症程度差异没有统计学意义(P>0.05),但TNF-αR基因敲除组输卵管水肿程度明显低于野生型组(P<0.05)。腹腔巨噬细胞细胞因子检测结果显示,TNF-αR基因敲除小鼠的TNF-α水平高于野生型小鼠(P<0.05);脾细胞细胞因子水平显示,两组小鼠脾细胞均产生较高水平的IFN-γ,TNF-αR基因敲除小鼠产生的IL-17细胞因子水平低于野生型小鼠(P<0.05)。结论 TNF-α对小鼠生殖道清除鼠衣原体感染无影响,但可促进鼠衣原体引起的生殖道炎症病理损伤。
关键词
鼠衣原体
肿瘤坏死因子Α
泌尿生殖道感染
基因敲除
Keywords
Chlamydia muridarum
tumor necrosis factor-α
urogenital tract infection
gene knockout
分类号
R691.3 [医药卫生—泌尿科学]
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职称材料
题名
口服鼠李糖乳杆菌GG减轻鼠衣原体感染引起的上生殖道病变
2
作者
周曾梓
孙信
张琪
曾飞
尹嘉欣
王陆颖
机构
中南大学湘雅三医院妇产科
湖南省靖州人民医院妇产科
出处
《中南大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第11期1187-1194,共8页
基金
国家自然科学基金(31800774)。
文摘
目的:沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)泌尿生殖道感染引起输卵管积水和纤维化的机制尚不完全清楚。肠道微生物群除引起肠道疾病外,还与心脑血管疾病、肝硬化、呼吸道感染、多囊卵巢综合征、子宫内膜异位和细菌性阴道炎等肠外疾病的发生、发展密切相关。鼠李糖乳杆菌GG(Lactobacillus rhamnosus GG,LGG)是一种被广泛研究和应用的肠道益生菌,其益处包括治疗胃肠道疾病和调节机体免疫,它还可以缓解过敏反应和腹泻,并抑制各种呼吸道疾病和泌尿生殖系统病原体所致的疾病。本研究以致病性和Ct高度相似的鼠衣原体(Chlamydia muridarium,Cm)感染小鼠作为动物模型,初步探讨LGG对小鼠Cm上生殖道感染的调节作用及机制,为了解Ct泌尿生殖道感染的致病机制提供实验依据,并为Ct感染的治疗提供新的思路。方法:将6周龄C57BL/6J雌性小鼠分为实验组和对照组,其中实验组小鼠口服5×10^(8)菌落形成单位的LGG 19 d,对照组小鼠口服PBS。在两组小鼠口服LGG或PBS的第9天皮下注射2.5 mg孕酮,第14天经阴道感染1×10^(5)包涵体形成单位的Cm。小鼠感染Cm后,每周取阴道拭子和直肠拭子,将拭子系列稀释后接种HeLa细胞,24 h后进行间接免疫荧光染色,在显微镜下计数衣原体包涵体。于Cm感染后第14天和第63天分别处死小鼠,分离上、下生殖道,将组织匀浆接种HeLa细胞培养24 h后,计数两组小鼠双侧子宫角、输卵管卵巢及宫颈阴道组织中的Cm载量;用流式细胞术检测Cm感染后第14天小鼠脾T淋巴细胞胞内IFN-γ、IL-5和IL-17的分泌;观察感染后第63天小鼠双侧子宫角和输卵管的病理损伤,并将生殖道各部分进行病理切片和HE染色,评价输卵管管腔扩张和炎性细胞浸润程度;采用间接ELISA检测Cm感染后第14天和第63天小鼠血清特异性IgM和IgG水平。结果:Cm经阴道感染小鼠后,两组小鼠衣原体在生殖道的清除速度、感染后第14天双侧子宫角和输卵管的上行感染量、Cm从生殖道向肠道转移和定植量差异均无统计学意义(均P>0.05);Cm感染后第14天,实验组小鼠脾T淋巴细胞内IL-17的分泌水平较对照组小鼠显著降低(t=2.486,P<0.05),但两组小鼠脾分泌IFN-γ和IL-5的CD4+T淋巴细胞比例及血清Cm特异性IgM和IgG水平差异均无统计学意义(均P>0.05);Cm感染后第63天,实验组小鼠双侧子宫角和输卵管的炎症程度与对照组差异无统计学意义(P>0.05),但输卵管水肿程度显著低于对照组(P<0.05)。结论:口服LGG不影响Cm阴道感染小鼠病原体生殖道的上行感染、清除及其向肠道的转移和定植,亦未显著影响小鼠血清特异性IgM和IgG水平;口服LGG可减少Cm感染后小鼠脾Th17细胞应答水平,能减轻小鼠Ct感染引起的输卵管纤维化和输卵管积水。
关键词
鼠
李糖乳杆菌GG
鼠衣原体
输卵管积水
白细胞介素-17
Keywords
Lactobacillus rhamnosus GG
Chlamydial muridarium
hydrosalpinx
interleukin-17
分类号
R691.3 [医药卫生—泌尿科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肿瘤坏死因子α在抗鼠衣原体生殖道感染过程中的作用
陈曦
刘璐瑶
张旭
陆春雪
陈利
全淑芬
陈丽丽
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
6
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职称材料
2
口服鼠李糖乳杆菌GG减轻鼠衣原体感染引起的上生殖道病变
周曾梓
孙信
张琪
曾飞
尹嘉欣
王陆颖
《中南大学学报(医学版)》
CAS
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北大核心
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