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氨溴索对α-突触核蛋白寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5损伤的预防作用观察
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作者 郑淑荣 杨巍巍 +1 位作者 高华 杜婷婷 《山东医药》 CAS 2023年第21期1-4,共4页
目的观察氨溴索(AMB)对α-突触核蛋白(α-syn)寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5(帕金森病模型细胞)损伤的预防作用。方法将MES23.5细胞分为A、B、C、D组4组,A组细胞加入二甲基亚砜,B组细胞加入终浓度为5μmol/L的α-syn寡聚体,... 目的观察氨溴索(AMB)对α-突触核蛋白(α-syn)寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5(帕金森病模型细胞)损伤的预防作用。方法将MES23.5细胞分为A、B、C、D组4组,A组细胞加入二甲基亚砜,B组细胞加入终浓度为5μmol/L的α-syn寡聚体,C组细胞加入终浓度为100μmol/L的AMB,D组细胞先加入终浓度为100μmol/L的AMB预处理12 h后再加入终浓度为5μmol/L的α-syn寡聚体。各组继续培养24 h后,采用ELISA法测算细胞β-葡萄糖脑苷脂酶(GCase)活性和α-syn寡聚体水平,采用MTT法检测细胞增殖能力(以OD_(450)值表示),使用JC-1探针检测线粒体膜电位,采用Western Blotting法检测酪氨酸羟化酶(TH)磷酸化水平。结果B组细胞GCase活性均低于其余三组(P均<0.05),C组细胞GCase活性均高于其余三组(P均<0.05)。B组细胞中α-syn寡聚体水平均高于其余三组(P均<0.05),C组细胞中α-syn寡聚体水平均低于其余三组(P均<0.05)。与A组相比,B组细胞培养24、48、72 h的OD_(450)值均降低(P均<0.05),D组细胞培养72 h的OD_(450)值降低(P<0.05);与B组相比,C、D组细胞培养24、48、72 h的OD_(450)值均升高(P均<0.05);与C组相比,D组细胞培养24、72 h的OD_(450)值均降低(P均<0.05)。B组细胞线粒体膜电位均低于其余三组(P均<0.05),D组细胞线粒体膜电位均低于A、C组(P均<0.05)。B组细胞TH磷酸化水平均低于其余三组(P均<0.05),C组细胞TH磷酸化水平均高于其余三组(P均<0.05)。结论AMB可通过升高GCase活性、降低α-syn寡聚体水平,恢复MES23.5细胞增殖能力、线粒体膜电位、TH磷酸化水平,对α-syn寡聚体诱导的细胞损伤起预防作用。 展开更多
关键词 帕金森病 氨溴索 β-葡萄糖脑苷脂酶 α-突触核蛋白寡聚体 鼠多巴胺能神经元细胞株
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表皮生长因子加强胶质细胞系源性神经营养因子对PD模型大鼠黑质多巴胺能神经元的保护作用 被引量:5
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作者 刘洪梅 丁艳霞 +1 位作者 王炎强 高殿帅 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期573-575,622,共4页
目的:研究表皮生长因子(EGF)能否加强胶质细胞系源性神经营养因子(GDNF)保护帕金森病(PD)模型大鼠黑质内多巴胺(DA)能神经元。方法:大鼠右侧纹状体内注射6羟多巴胺(6-OHDA)并行为学分析筛选PD动物模型。将动物模型随机分... 目的:研究表皮生长因子(EGF)能否加强胶质细胞系源性神经营养因子(GDNF)保护帕金森病(PD)模型大鼠黑质内多巴胺(DA)能神经元。方法:大鼠右侧纹状体内注射6羟多巴胺(6-OHDA)并行为学分析筛选PD动物模型。将动物模型随机分为EGF+GDNF组(右侧黑质内注射EGF+GDNF)和GDNF组(右侧黑质内注射GDNF)。动物继续存活至第21天,取一部分动物中脑黑质节段,用免疫组织化学显色方法,以抗钙结合蛋白D28K(CB)和胶质源纤维酸性蛋白(GFAP)抗体免疫反应阳性分别检测右侧黑质含CB的神经元及激活的星形胶质细胞,光镜下观察并进行细胞计数;另一部分动物被快速断头取脑,分离右侧黑质,用免疫印迹法分析黑质CB及GFAP蛋白的表达,蛋白条带用图像处理仪扫描,结果用LabWorks软件分析处理。结果:免疫组织化学显色显示,EGF+GDNF组大鼠黑质内CB及GFAP反应阳性细胞数量均高于GDNF组;免疫印迹法检测表明EGF+GDNF组大鼠黑质内CB及GFAP蛋白表达量高于GDNF组。结论:EGF可能通过促进PD模型大鼠黑质内神经元表达CB和激活星形胶质细胞,从而加强GDNF对黑质内DA能神经元的保护作用。 展开更多
关键词 帕金森病 黑质 多巴能神经元 表皮生长因子 胶质细胞系源性神经营养因子
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6-OHDA制备的帕金森病大鼠黑质多巴胺能神经元的形态观察 被引量:5
3
作者 吕娥 付文玉 +2 位作者 赵春艳 李锋杰 张圣明 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期103-105,共3页
关键词 黑质多巴能神经元 6-OHDA 帕金森病 形态观察 PARKINSON 6-羟基多巴 黑质纹状体
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脑震荡对大鼠多巴胺能神经元及神经纤维的影响 被引量:4
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作者 吴春云 于建云 +4 位作者 林海英 郭泽云 许冰莹 李坪 赵旭东 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期72-75,共4页
目的:探讨脑震荡(BC)鼠多巴胺能神经元和神经纤维内酪氨酸羟化酶(TH)含量的变化。方法:用金属单摆打击装置复制 BC 模型。动物随机分为对照组和伤后1~24 d 损伤组;用免疫组织化学结合图像分析方法研究 BC 后中脑黑质致密区(SNC)和... 目的:探讨脑震荡(BC)鼠多巴胺能神经元和神经纤维内酪氨酸羟化酶(TH)含量的变化。方法:用金属单摆打击装置复制 BC 模型。动物随机分为对照组和伤后1~24 d 损伤组;用免疫组织化学结合图像分析方法研究 BC 后中脑黑质致密区(SNC)和腹侧被盖区(VTA)多巴胺能神经元及基底节尾壳核多巴胺能神经纤维 TH 含量的变化。结果:在 SNC 和 VTA 及基底节,BC 后1、4、8及16 d 组的 TH 免疫反应阳性明显高于对照组,其中以4d 组反应最强,24 d 组在 SNC 和基底节与对照组比较无显著性差异,但在 VTA,TH 免疫反应阳性仍高于对照组。结论:BC 后 TH 早期增高可能是脑损伤神经元过度兴奋的反应,随后持续增高一段时间可能是多巴胺能神经元上调其合成能力的一种代偿反应。 展开更多
关键词 脑震荡 多巴 神经元 神经纤维
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银杏内酯B体外诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化 被引量:6
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作者 谭雪锋 孙冰晶 +4 位作者 朱倩 周海燕 王梦佳 徐梓威 金国华 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期10-13,共4页
目的:探讨银杏内酯B(GKB)对大鼠中脑神经干细胞(NSCs)体外诱导分化为多巴胺能神经元的作用。方法:采用无血清培养技术从大鼠胚胎中脑组织中分离培养出神经干细胞克隆球,然后分为2组诱导分化,对照组分化培养液中仅含10%FBS,银杏... 目的:探讨银杏内酯B(GKB)对大鼠中脑神经干细胞(NSCs)体外诱导分化为多巴胺能神经元的作用。方法:采用无血清培养技术从大鼠胚胎中脑组织中分离培养出神经干细胞克隆球,然后分为2组诱导分化,对照组分化培养液中仅含10%FBS,银杏内酯B组在对照组分化培养液的基础上加入终浓度为40μg/ml的银杏内酯B。2周后免疫印迹检测分化的细胞中多巴胺能神经元发育和分化调节因子Nurr1蛋白的表达情况;免疫荧光检测分化神经元中酪氨酸羟化酶(TH)标记的多巴胺能神经元数量和分化情况。结果:对照组Nurr1蛋白相对表达量很低,仅有极少量的神经干细胞分化为不成熟的多巴胺能神经元;银杏内酯B组Nurr1表达显著升高,分化的多巴胺能神经元较多,且细胞形态较成熟,突起较丰富。 结论:银杏内酯B具有诱导中脑NSCs向多巴胺能神经元分化的作用,其作用机制可能与上调Nurr1表达有关。 展开更多
关键词 银杏内酯B 神经细胞 多巴能神经元 酪氨酸羟化酶
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大鼠黑质损毁后多巴胺能神经元形态及纹状体c-fos表达的变化
6
作者 冯定庆 陈晓蓉 +2 位作者 王慧珠 齐威琴 沈韶辉 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期168-171,共4页
目的:观察毁损黑质后,多巴胺(DA)能神经元形态学变化和纹状体内相关神经元c-fos表达情况,探讨c-fos表达与毁损程度的关系。方法:利用6羟多巴胺(6OHDA)特异毁损大鼠黑质DA能神经元,采用阿朴吗啡(APO)诱导旋转实验观察术后1、7、14和21d... 目的:观察毁损黑质后,多巴胺(DA)能神经元形态学变化和纹状体内相关神经元c-fos表达情况,探讨c-fos表达与毁损程度的关系。方法:利用6羟多巴胺(6OHDA)特异毁损大鼠黑质DA能神经元,采用阿朴吗啡(APO)诱导旋转实验观察术后1、7、14和21d行为学变化;利用HE染色、Nissl染色、免疫组织化学方法和电镜,观察各时间点黑质DA能神经元形态学变化和纹状体c-fos表达。结果:毁损侧DA能神经元逐渐减少,超微结构损伤逐渐加重;DA神经元丢失比例≥80%时,纹状体毁损侧c-fos表达上调,APO诱导的旋转实验>7r/min。结论:黑质DA能神经元丢失是毁损大鼠行为改变的病理学基础;cfos的表达与DA能神经元的毁损程度、行为改变有一定的关系。 展开更多
关键词 C-FOS表达 多巴能神经元 纹状体 黑质 DA能神经元 免疫组织化学方法 多巴(DA) Nissl染色 形态学变化 神经元丢失 损毁 6-羟多巴 旋转实验 行为改变 病理学基础 表达情况 观察术后 阿朴吗啡 HE染色 结构损伤
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左旋多巴对大鼠中脑5羟色胺能神经元的影响
7
作者 岂春晓 石葛明 +4 位作者 康云霄 张国梁 郭巍巍 李双成 崔慧先 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期479-481,526,共4页
目的:观察左旋多巴对大鼠脑内5羟色胺(5-HT)能神经元的影响。方法:左旋多巴大鼠灌胃,以免疫细胞化学和流式细胞术显示5-HT及色氨酸羟化酶(TPH)免疫反应物质或含量的变化。结果:免疫细胞化学显示左旋多巴组大鼠中缝背核5-HT能神... 目的:观察左旋多巴对大鼠脑内5羟色胺(5-HT)能神经元的影响。方法:左旋多巴大鼠灌胃,以免疫细胞化学和流式细胞术显示5-HT及色氨酸羟化酶(TPH)免疫反应物质或含量的变化。结果:免疫细胞化学显示左旋多巴组大鼠中缝背核5-HT能神经元细胞直径明显小于对照组;中缝背核5-HT和TPH免疫反应物质灰度值比对照组分别增高了7.72%和16.57%。流式细胞术显示左旋多巴组5-HT的表达量比对照组减少了18.45%,TPH表达量比对照组减少了19.90%。结论:左旋多巴降低脑内5-HT能神经元5-HT和TPH的表达。 展开更多
关键词 左旋多巴 5羟色 色氨酸羟化酶 神经元
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香丹注射液体外诱导大鼠MSCs分化为多巴胺能神经元效果观察
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作者 王福兰 李福玲 +1 位作者 王桂荣 刘素娟 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第31期34-35,共2页
目的探讨香丹注射液体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)定向分化为多巴胺(DA)能神经元的效果。方法体外分离、扩增和鉴定大鼠骨髓MSCs。碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)预诱导24 h后香丹注射液诱导3 h,采用免疫细胞化学法检测神经元特异... 目的探讨香丹注射液体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)定向分化为多巴胺(DA)能神经元的效果。方法体外分离、扩增和鉴定大鼠骨髓MSCs。碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)预诱导24 h后香丹注射液诱导3 h,采用免疫细胞化学法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白2(MAP2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、酪氨酸羟化酶(TH)、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2表达。结果诱导后MSCs分化为具有典型神经元形态的细胞,NSE、MAP2和TH呈高表达,PCNA表达明显减弱。结论香丹注射液诱导大鼠MSCs分化为DA能神经元效果较好。 展开更多
关键词 间充质干细胞 骨髓 多巴能神经元 细胞周期相关蛋白
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体外MPP^+诱导胚胎大鼠中脑多巴胺能神经元模型的建立 被引量:1
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作者 龚超超 郎娟 熊中奎 《山东医药》 CAS 2012年第43期17-19,共3页
目的建立一种体外1-甲基-4-苯基-l,2,3,6-四氢吡啶离子(MPP+)诱导的胚胎大鼠中脑多巴胺(DA)能神经元模型,为帕金森病(PD)发病机制和药物干预研究奠定基础。方法体外培养胚胎SD大鼠(孕14~15 d)中脑DA神经元7 d后随机分为实验组和对照组... 目的建立一种体外1-甲基-4-苯基-l,2,3,6-四氢吡啶离子(MPP+)诱导的胚胎大鼠中脑多巴胺(DA)能神经元模型,为帕金森病(PD)发病机制和药物干预研究奠定基础。方法体外培养胚胎SD大鼠(孕14~15 d)中脑DA神经元7 d后随机分为实验组和对照组,均以含1%B27的无血清DMEM/F12培养基培养,在此基础上前者加入MPP+使终浓度达到10μmol/L,均继续培养48 h。采用免疫组化染色法检测酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元数量和突起长度。结果在放大倍数(×100)视野下,实验组和对照组中脑TH阳性神经元数量分别为(351.5±32.7)、(538.0±58.7)个,P<0.01;在放大倍数(×200)视野下,实验组和对照组中脑TH阳性神经元突起长度分别为(121.6±6.1)、(246.9±11.3)μm(P<0.001)。结论 MPP+体外诱导可成功建立胚胎大鼠中脑DA能神经元模型,此为PD发病机制和药物干预研究奠定了基础。 展开更多
关键词 多巴神经元 中脑 细胞模型 1-甲基-4-苯基-l 2 3 6-四氢吡啶离子
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丘脑室旁核内多巴胺D2受体阳性神经元对大鼠焦虑样行为的调节作用 被引量:2
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作者 高莎莎 宋苗苗 +2 位作者 冯洁 王会生 王勇 《山西医科大学学报》 CAS 2023年第1期69-74,共6页
目的探讨丘脑室旁核(PVT)内多巴胺D2受体阳性神经元在大鼠焦虑样行为调节中的作用。方法采用腹腔注射脂多糖(0.2 mg/kg LPS)的方法构建炎性相关焦虑行为大鼠模型。对照组(control)接受等量盐水注射。通过比较LPS组(n=6)和control组(n=6... 目的探讨丘脑室旁核(PVT)内多巴胺D2受体阳性神经元在大鼠焦虑样行为调节中的作用。方法采用腹腔注射脂多糖(0.2 mg/kg LPS)的方法构建炎性相关焦虑行为大鼠模型。对照组(control)接受等量盐水注射。通过比较LPS组(n=6)和control组(n=6)动物在旷场中央区和高架十字开放臂停留时间的差异,评价LPS组动物焦虑水平的变化。将LPS注射建立的焦虑模型大鼠,分为普拉克索组(n=6)和生理盐水组(n=6),观察PVT内微量注射D2受体激动剂普拉克索(6μg/μl)对动物焦虑样行为的影响。将D2特异性环化重组酶大鼠分为光敏感通道蛋白组(ChR2,n=6)和红色荧光蛋白组(mCherry,n=6)。采用470 nm光选择性刺激两组大鼠的PVT,观察两组动物焦虑水平的差异。结果与control组相比,LPS组大鼠出现焦虑样行为,在中央区停留时间缩短(P=0.002),开放臂停留时间减少(P=0.004)。与生理盐水组比较,普拉克索组大鼠的焦虑样行为减轻,在中央区停留时间增长(P=0.008),开放臂停留时间增加(P=0.041)。与mCherry组比较,ChR2组大鼠出现焦虑样行为,在中央区停留时间缩短(P=0.013),开放臂停留时间减少(P=0.018)。结论PVT内多巴胺D2受体阳性神经元的过度激活促进大鼠焦虑样行为的产生。 展开更多
关键词 焦虑样行为 多巴D2受体 丘脑室旁核 神经元 脂多糖 多巴受体激动剂
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NCAM介导BDNF对多巴胺能神经元的保护和存活的实验研究 被引量:1
11
作者 刘兵 《解剖学杂志》 CAS 2021年第S01期106-107,共2页
研究神经细胞黏附分子(NCAM)在脑源性神经生长因子(BDNF)对帕金森(PD)模型大鼠受损多巴胺(DA)能神经元中的保护和存活作用。在SD大鼠右侧纹状体内立体定位注射6-羟多巴胺(6-OHDA)制备早期PD模型,随后分为4组:NCAM组(同侧黑质内仅注射ant... 研究神经细胞黏附分子(NCAM)在脑源性神经生长因子(BDNF)对帕金森(PD)模型大鼠受损多巴胺(DA)能神经元中的保护和存活作用。在SD大鼠右侧纹状体内立体定位注射6-羟多巴胺(6-OHDA)制备早期PD模型,随后分为4组:NCAM组(同侧黑质内仅注射anti-NCAM抗体),BDNF组(同侧黑质内注射BDNF),CAM阻断组(同侧黑质内注射anti-NCAM抗体1小时后注射BDNF),对照组(同侧黑质内注射PBS),采用免疫组织化学染色技术和免疫印迹技术,观察各组酪氨酸羟化酶(TH)的表达变化。 展开更多
关键词 多巴能神经元 模型大 NCAM 定位注射 免疫印迹技术 BDNF 纹状体 表达变化
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慢性砷中毒对大鼠行为能力及中脑黑质多巴胺含量与结构的影响
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作者 朱俊德 王玉林 +3 位作者 余资江 余彦 孙宝飞 龚明 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期644-648,705,共6页
目的:观察慢性砷中毒对大鼠行为能力及中脑黑质多巴胺含量与其形态结构的影响。方法:砷中毒组采用三氧化三砷灌胃,连续染毒3个月后观察大鼠行为能力;高效液相色谱测定中脑黑质多巴胺含量;酪氨酸羟化酶(TH)、胶质纤维酸性蛋白(G... 目的:观察慢性砷中毒对大鼠行为能力及中脑黑质多巴胺含量与其形态结构的影响。方法:砷中毒组采用三氧化三砷灌胃,连续染毒3个月后观察大鼠行为能力;高效液相色谱测定中脑黑质多巴胺含量;酪氨酸羟化酶(TH)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组织化学显色;免疫印迹法检测大鼠中脑黑质TH与iNOS蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,砷中毒组大鼠中脑黑质多巴胺含量降低。光镜下,TH、GFAP和NSE阳性神经元主要位于黑质致密部。砷中毒组部分神经元胞体变小呈圆形或卵圆形,胞核固缩,胞质中的尼氏体减少或消失。与正常对照组相比,砷中毒组TH与NSE阳性神经元减少,而GFAP阳性神经元增多。电镜下,对照组黑质神经元形态规则,胞膜清晰,细胞器丰富,结构完整;砷中毒组神经元胞体水肿,胞质电子密度降低,细胞器减少,线粒体肿胀空泡化。与正常对照组相比,砷中毒组TH蛋白表达降低,而iNOS蛋白的表达增高。结论:慢性砷中毒可致大鼠行为能力与黑质多巴胺含量下降,TH与NSE阳性神经元减少、反应性星形胶质细胞增多,这些变化可能是砷的神经毒性作用之一。 展开更多
关键词 砷中毒 黑质 多巴 神经元 星形胶质细胞
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免疫生物学
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《国外科技资料目录(医药卫生)》 CAS 1997年第7期20-21,共2页
9722999 粘膜免疫学:热点/Kagnoff MF//Immunol Today.-1995,17(2).-57~59 北医图9723000 体外培养的大鼠下丘脑神经元中多巴胺通过 D<sub>1</sub>受体介导刺激免疫反应性心房肽(ANF)释放及前?ANFmRNA 的表达/Lee D//E... 9722999 粘膜免疫学:热点/Kagnoff MF//Immunol Today.-1995,17(2).-57~59 北医图9723000 体外培养的大鼠下丘脑神经元中多巴胺通过 D<sub>1</sub>受体介导刺激免疫反应性心房肽(ANF)释放及前?ANFmRNA 的表达/Lee D//Endocrinol.-1995,136(2).-591~598 展开更多
关键词 免疫反应性 下丘脑神经元 粘膜免疫 受体介导 体外培养 多巴 免疫生物学 粘附分子 细胞因子
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