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脂质体介导的鼠内皮细胞抑制素基因治疗人肝癌的研究 被引量:2
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作者 汤宇澄 居中华 +1 位作者 钱关祥 陈诗书 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第3期187-190,共4页
目的 :利用内皮细胞抑制素进行肿瘤抗血管基因治疗的尝试。方法 :用RT PCR从鼠肝脏扩增出内皮细胞抑制素cDNA ,经测序证实后 ,装入分泌表达载体pSEC hygromycin ,用DEAE 葡聚糖将其转染COS 7细胞 ,从mRNA水平及蛋白水平检测内皮细胞抑... 目的 :利用内皮细胞抑制素进行肿瘤抗血管基因治疗的尝试。方法 :用RT PCR从鼠肝脏扩增出内皮细胞抑制素cDNA ,经测序证实后 ,装入分泌表达载体pSEC hygromycin ,用DEAE 葡聚糖将其转染COS 7细胞 ,从mRNA水平及蛋白水平检测内皮细胞抑制素的表达 ,并观察分泌上清是否具有特异性抑制bFGF刺激的内皮细胞增殖作用 ,并通过TDT介导的dUTP缺口末端标记法和琼脂糖电泳来探讨其作用机制。在体外利用阳离子脂质体介导分泌表达载体pSEC endo进行抗肿瘤研究。结果 :测序结果表明 ,克隆的鼠内皮细胞抑制素cDNA与文献报道的完全一致 ,RT PCR显示转染后的COS 7细胞有内皮细胞抑制素mRNA表达 ,Western blot证实转染COS 7细胞上清及包浆内均有目的蛋白表达。其分泌上清能抑制bFGF刺激的内皮细胞增殖作用 ,且这种作用是通过诱导细胞凋亡实现的 ,动物模型显示所构建分泌表达的载体能在肿瘤内表达 ,有效抑制荷瘤裸鼠人肝癌细胞周围的微血管形成及肿瘤的生长。结论 展开更多
关键词 鼠内皮细胞抑制素 肝癌 基因治疗 脂质体
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