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胰岛素样生长因子-1逆转录病毒表达载体的构建及其在大鼠胚胎神经干细胞中的表达
1
作者
王进
王红星
崔景彬
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2007年第6期1136-1140,共5页
目的:构建胰岛素样生长因子-1(IGF-1)逆转录病毒表达载体,并观察转IGF-1基因的鼠胚胎神经干细胞(NSC)体内外基因表达情况。方法:通过酶切和连接的方法将IGF-1基因克隆入逆转录病毒表达载体pLXSN中,感染包装细胞后收集病毒颗粒再感染从胎...
目的:构建胰岛素样生长因子-1(IGF-1)逆转录病毒表达载体,并观察转IGF-1基因的鼠胚胎神经干细胞(NSC)体内外基因表达情况。方法:通过酶切和连接的方法将IGF-1基因克隆入逆转录病毒表达载体pLXSN中,感染包装细胞后收集病毒颗粒再感染从胎龄14d的SD大鼠全脑组织中分离出的NSC,RT-PCR检测IGF-1的mRNA,免疫组织化学法检测IGF-1蛋白的表达,并用立体定向法将Brdu标记的转基因NSC移植到大鼠大脑中动脉梗死模型的纹状体缺血半暗区,免疫染色观察移植后1周转基因NSC在脑内的基因表达情况。结果:酶切及序列分析证实重组逆转录病毒载体pLX SN-IGF-1构建正确,RT-PCR能检测到转基因IGF-1的mRNA,免疫组织化学法能检测到IGF-1在转染了逆转录病毒的NSC及其子代细胞内表达,转基因NSC移植后1周在宿主脑内迁徙并表达IGF-1基因产物。结论:成功构建了携带IGF-1基因的逆转录病毒载体,转染了重组逆转录病毒载体的NSC可在体内外表达IGF-1。
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关键词
神经干细胞
胰岛素
样
生长因子-1
逆转录
病毒
转染
转
基因
大
鼠
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职称材料
小鼠植入前胚胎MuERV-L基因表达特征研究
被引量:
1
2
作者
邵根宝
高爱民
+3 位作者
徐银学
丁红梅
贾超
刘红林
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期87-91,共5页
利用实时定量RT-PCR技术,对体外培养的小鼠植入前胚胎发育过程中鼠内源逆转录病毒样基因(MuERV-L)的表达进行研究,并通过appd icolin(DNA复制抑制剂)、TSA(组蛋白去乙酰化酶特异性抑制剂)分别抑制1-细胞期DNA的复制和合子基因组...
利用实时定量RT-PCR技术,对体外培养的小鼠植入前胚胎发育过程中鼠内源逆转录病毒样基因(MuERV-L)的表达进行研究,并通过appd icolin(DNA复制抑制剂)、TSA(组蛋白去乙酰化酶特异性抑制剂)分别抑制1-细胞期DNA的复制和合子基因组激活(ZGA)过程中组蛋白去乙酰化,探索MuERV-L基因表达的变化。结果表明:MuERV-L基因的转录在受精后9-11 h快速启动,并在2-细胞阶段出现瞬时高表达。抑制试验显示:1-细胞期DNA的复制受抑制后,MuERV-L基因的转录也被显著抑制(P〈0.05);在TSA处理的4-细胞胚胎中,MuERV-L基因显著高表达(P〈0.01),且其水平达到正常2-细胞的转录水平。提示:该基因可能对小鼠胚胎ZGA过程起重要作用。
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关键词
小
鼠
胚胎
鼠
内源
逆转录
病毒
样
基因
(
muerv-l
)
实时定量RT-PCR
基因
表达
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职称材料
题名
胰岛素样生长因子-1逆转录病毒表达载体的构建及其在大鼠胚胎神经干细胞中的表达
1
作者
王进
王红星
崔景彬
机构
周口师范学院生命科学系
北京市神经外科研究所
出处
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2007年第6期1136-1140,共5页
文摘
目的:构建胰岛素样生长因子-1(IGF-1)逆转录病毒表达载体,并观察转IGF-1基因的鼠胚胎神经干细胞(NSC)体内外基因表达情况。方法:通过酶切和连接的方法将IGF-1基因克隆入逆转录病毒表达载体pLXSN中,感染包装细胞后收集病毒颗粒再感染从胎龄14d的SD大鼠全脑组织中分离出的NSC,RT-PCR检测IGF-1的mRNA,免疫组织化学法检测IGF-1蛋白的表达,并用立体定向法将Brdu标记的转基因NSC移植到大鼠大脑中动脉梗死模型的纹状体缺血半暗区,免疫染色观察移植后1周转基因NSC在脑内的基因表达情况。结果:酶切及序列分析证实重组逆转录病毒载体pLX SN-IGF-1构建正确,RT-PCR能检测到转基因IGF-1的mRNA,免疫组织化学法能检测到IGF-1在转染了逆转录病毒的NSC及其子代细胞内表达,转基因NSC移植后1周在宿主脑内迁徙并表达IGF-1基因产物。结论:成功构建了携带IGF-1基因的逆转录病毒载体,转染了重组逆转录病毒载体的NSC可在体内外表达IGF-1。
关键词
神经干细胞
胰岛素
样
生长因子-1
逆转录
病毒
转染
转
基因
大
鼠
Keywords
neural stem cell
insulin like growth factor-1
retrovirus
transfection
transgene
rat
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
小鼠植入前胚胎MuERV-L基因表达特征研究
被引量:
1
2
作者
邵根宝
高爱民
徐银学
丁红梅
贾超
刘红林
机构
南京农业大学动物科技学院
出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期87-91,共5页
基金
国家自然科学基金项目(30371034)
文摘
利用实时定量RT-PCR技术,对体外培养的小鼠植入前胚胎发育过程中鼠内源逆转录病毒样基因(MuERV-L)的表达进行研究,并通过appd icolin(DNA复制抑制剂)、TSA(组蛋白去乙酰化酶特异性抑制剂)分别抑制1-细胞期DNA的复制和合子基因组激活(ZGA)过程中组蛋白去乙酰化,探索MuERV-L基因表达的变化。结果表明:MuERV-L基因的转录在受精后9-11 h快速启动,并在2-细胞阶段出现瞬时高表达。抑制试验显示:1-细胞期DNA的复制受抑制后,MuERV-L基因的转录也被显著抑制(P〈0.05);在TSA处理的4-细胞胚胎中,MuERV-L基因显著高表达(P〈0.01),且其水平达到正常2-细胞的转录水平。提示:该基因可能对小鼠胚胎ZGA过程起重要作用。
关键词
小
鼠
胚胎
鼠
内源
逆转录
病毒
样
基因
(
muerv-l
)
实时定量RT-PCR
基因
表达
Keywords
mouse
embryo
murine endogenous retrovirus-like gene (
muerv-l
)
real-time RT-PCR
gene expression
分类号
S826.3 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
胰岛素样生长因子-1逆转录病毒表达载体的构建及其在大鼠胚胎神经干细胞中的表达
王进
王红星
崔景彬
《郑州大学学报(医学版)》
CAS
北大核心
2007
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
小鼠植入前胚胎MuERV-L基因表达特征研究
邵根宝
高爱民
徐银学
丁红梅
贾超
刘红林
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
1
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已选择
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参考文献
引证文献
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