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赤狐黑色素皮质激素受体-1基因结构特征预测及分子进化分析 被引量:4
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作者 宋兴超 杨福合 +4 位作者 巴恒星 徐超 鲍坤 邢秀梅 魏海军 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第1期9-13,共5页
为进一步分析黑色素皮质激素受体-1(melanocortin-1 receptor,MC1R)基因的分子特性,利用生物信息学方法对Gen-Bank中已报道的赤狐MC1R基因完整编码区序列的碱基组成特点及其编码蛋白的结构特征进行了预测及分析,构建了12个物种MC1R蛋白... 为进一步分析黑色素皮质激素受体-1(melanocortin-1 receptor,MC1R)基因的分子特性,利用生物信息学方法对Gen-Bank中已报道的赤狐MC1R基因完整编码区序列的碱基组成特点及其编码蛋白的结构特征进行了预测及分析,构建了12个物种MC1R蛋白的系统进化树。结果表明,赤狐MC1R基因编码区序列长度为954bp,共编码317个氨基酸,为单一外显子,G+C含量高于A+T,编码的蛋白质是一种分子质量为34.8694ku,等电点为9.13的亲水性稳定碱性蛋白;存在7个强跨膜区、7个广泛磷酸化位点和1个潜在的蛋白激酶C磷酸化位点(第157位的苏氨酸),α-螺旋为其主要二级结构元件;属于G蛋白偶联受体家族一员,包括多个潜在重要功能基序;同源性分析与分子进化树结果均表明,赤狐与北极狐、狗和貉的亲缘关系最近。 展开更多
关键词 赤狐 黑色素皮质激素受体-1基因 结构特征 生物信息学
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人黑色素浓集激素1型受体真核表达载体的构建及稳定转染CHO细胞系的建立
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作者 袁成福 杨俊霞 +5 位作者 魏丽丽 石华 陈济 易发平 马永平 宋方洲 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期5-8,共4页
目的构建人黑色素浓集激素1型受体(MCHR1)真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染的CHO细胞系。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR1基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),... 目的构建人黑色素浓集激素1型受体(MCHR1)真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染的CHO细胞系。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR1基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染CHO细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的CHO细胞系,用RT-PCR、Westernblot及免疫荧光法检测MCHR1的表达。结果成功构建了pcDNA3.1(+)/MCHR1真核表达载体,并建立了稳定转染的CHO细胞系,成功地表达了目的基因。结论真核表达载体的构建和稳定转染CHO细胞系的建立为进一步研究MCHR1功能奠定了良好的实验基础。 展开更多
关键词 受体 黑色素浓集激素 1 真核表达载体 CHO细胞 基因表达 转染
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动物毛色与黑色素皮质素受体1(MC1R)基因 被引量:20
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作者 王乐 张斌 +2 位作者 郑文新 吕雪峰 高维明 《草食家畜》 2009年第2期10-12,共3页
动物的毛色的表型主要受黑色素皮质激素受体1(Melanocortin Receptor 1,MC1R)基因位点的不同等位基因调节。本文对黑色素皮质激素受体1基因的定位、突变、多态性检测及对毛色的作用机理等进行了综述,并对MC1R基因的研究方向提出了建议。
关键词 动物 毛色 黑色素皮质激素受体1
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黑色素聚集激素与抑郁症关系的研究进展 被引量:1
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作者 努尔乎玛尔·库尔班 崔素颖 张永鹤 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期12-16,共5页
黑色素聚集激素(melanin concentrating hormone,MCH)是一种参与调节摄食、睡眠-觉醒和情绪行为等多种神经生理功能的神经肽。近年来,MCH与抑郁症相关性研究引起了高度关注,已成为新型抗抑郁药研究热点。该文将重点对MCH能系统与抑郁症... 黑色素聚集激素(melanin concentrating hormone,MCH)是一种参与调节摄食、睡眠-觉醒和情绪行为等多种神经生理功能的神经肽。近年来,MCH与抑郁症相关性研究引起了高度关注,已成为新型抗抑郁药研究热点。该文将重点对MCH能系统与抑郁症的研究进展进行综述,并对其未来的研究提出展望。 展开更多
关键词 抑郁症 黑色素聚集激素 黑色素聚集激素受体 神经肽 快速眼动睡眠 抑郁样行为
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GHRHR-SV1抗体的制备及其蛋白在黑色素瘤细胞中的表达 被引量:2
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作者 郭晓兰 谭茵 +2 位作者 陈文生 林玉茵 戴建威 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1237-1242,共6页
目的:制备生长激素释放激素受体剪接变异体1(GHRHR-SV1)抗体,并检测GHRHR-SV1蛋白在黑色素瘤细胞中的表达情况,为后续的肿瘤机制研究奠定基础。方法:设计GHRHR-SV1基因序列,将其插入质粒pET-32a(+)中,构建pET-GHRHR-SV1重组载体,经PCR... 目的:制备生长激素释放激素受体剪接变异体1(GHRHR-SV1)抗体,并检测GHRHR-SV1蛋白在黑色素瘤细胞中的表达情况,为后续的肿瘤机制研究奠定基础。方法:设计GHRHR-SV1基因序列,将其插入质粒pET-32a(+)中,构建pET-GHRHR-SV1重组载体,经PCR及测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3)中,分别加入0、0.5、1.0、1.5和2.0mmol·L^(-1)异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG);诱导1、2、4和6h,并在37℃、30℃和25℃不同温度下进行诱导;观察目的蛋白表达的最佳IPTG浓度、时间和温度。亲和层析纯化重组蛋白,将纯化后的蛋白免疫家兔,制备兔多克隆抗体,ELISA法检测该抗体效价,Western blotting法检测GHRHR-SV1蛋白在黑色素瘤细胞系B16-F10中的表达情况。结果:重组载体pET-GHRHR-SV1构建成功。在IPTG浓度为2.0mmol·L^(-1)时目的蛋白的表达量最高;IPTG诱导蛋白表达2h时,蛋白表达量最大;当温度为25℃时,蛋白的表达量最大。诱导表达的蛋白相对分子质量约为24 000,纯化后纯度为80%,GHRHR-SV1抗体效价为1∶1 600 000,B16-F10细胞中有GHRHR-SV1蛋白表达。结论:成功制备pETGHRHR-SV1重组载体。GHRHR-SV1蛋白在IPTG浓度为2.0mmol·L^(-1)、诱导时间为2h和温度为25℃的条件下表达最佳。成功制备了高效价的GHRHR-SV1抗体。黑色素瘤细胞系中有GHRHR-SV1蛋白表达。 展开更多
关键词 生长激素释放激素受体剪接变异体1 重组载体 重组蛋白 抗体 黑色素
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黑色素及其相关基因的研究进展 被引量:18
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作者 刘甲斐 仇雪梅 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第4期55-58,共4页
黑色素对动物体色的形成起重要的作用。对黑色素的本质、功能以及生成机理做了全面的总结,并归纳了一些影响动物皮肤颜色和毛色的主要基因及其研究现状。
关键词 黑色素 酪氨酸酶 黑色素皮质激素受体1基因 肥大/干细胞生长因子受体基因
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背根神经节MCHR1在小鼠神经病理性疼痛中的表达变化 被引量:1
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作者 李夏 李珍珍 +4 位作者 刘万能 窦志伟 刘可欣 罗层 尤浩军 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第6期681-687,共7页
目的:探讨背根神经节(DRG)中黑色素浓集激素受体1(MCHR1)在小鼠神经病理性疼痛中的变化情况。方法:利用免疫荧光染色观察小鼠(C57BL/6)DRG中MCHR1的表达分布情况。采用坐骨神经分支损伤手术(SNI)建立神经病理性疼痛模型。将雄性小鼠随... 目的:探讨背根神经节(DRG)中黑色素浓集激素受体1(MCHR1)在小鼠神经病理性疼痛中的变化情况。方法:利用免疫荧光染色观察小鼠(C57BL/6)DRG中MCHR1的表达分布情况。采用坐骨神经分支损伤手术(SNI)建立神经病理性疼痛模型。将雄性小鼠随机分为2组:假手术组(Sham组)和实验组(SNI组),通过von Frey纤维丝和热辐射刺激方法观察小鼠的机械缩足阈值(PWT)和热缩足反应潜伏期(PWL)。采用real time RT-PCR和Western Blot方法分别检测小鼠DRG中MCHR1的mRNA和蛋白水平变化。结果:MCHR1在小鼠DRG中广泛分布,其与中小型神经元标志物降钙素基因相关肽(CGRP)和植物凝集素B4(IB4),以及大直径神经元标志物NF200均有共标。在小鼠SNI术后7 d,小鼠同侧足底出现了显著的机械痛阈值和热缩足潜伏期降低。通过real time RT-PCR和Western Blot实验发现,与Sham组相比,SNI组小鼠DRG中mRNA和蛋白表达水平均出现显著上调。结论:MCHR1广泛分布于DRG的大、中、小型神经元中。在SNI模型小鼠出现稳定的痛觉敏化现象后,DRG中MCHR1的转录和蛋白表达水平均显著升高。以上结果提示,DRG中MCHR1可能参与神经病理性疼痛的发生发展过程。 展开更多
关键词 神经病理性疼痛 坐骨神经分支损伤 黑色素浓集激素受体1 背根神经节 小鼠
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高脂膳食诱导肥胖并影响脂肪组织MCHR1和OB-Rb的表达 被引量:8
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作者 李金容 闫剑群 +3 位作者 陈坷 王倩 赵小林 张嫄 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期823-829,共7页
目的:比较不同方式高脂饮食对大鼠脂肪组织黑色素聚集激素受体1(melanin concentrating hor-mone receptor 1,MCHR1)和瘦素受体(OB-Rb)表达的影响。方法:断乳大鼠分成3组:正常膳食组(NC组,13%热卡来自脂肪),与正常膳食组等热量的高脂膳... 目的:比较不同方式高脂饮食对大鼠脂肪组织黑色素聚集激素受体1(melanin concentrating hor-mone receptor 1,MCHR1)和瘦素受体(OB-Rb)表达的影响。方法:断乳大鼠分成3组:正常膳食组(NC组,13%热卡来自脂肪),与正常膳食组等热量的高脂膳食组(PHF组,47%热卡来自脂肪)及自由摄入高脂膳食组(HF组,47%热卡来自脂肪)。喂养8周后,称量大鼠体质量,检测血清中的黑色素聚集激素(melanin con-centrating hormone,MCH)和瘦素(leptin)浓度。运用实时定量PCR检测脂肪组织的MCHR1和OB-Rb mRNA水平。结果:HF组和PHF组体质量显著高于NC组(P<0.01),血清中MCH和leptin浓度较NC组有明显增高(MCH,P<0.01;leptin,P<0.05)。同对照组相比,HF组和PHF组脂肪组织中的MCHR1 mRNA水平显著升高(P<0.05),而OB-Rb mRNA却显著降低(HF组,P<0.01;PHF组,P<0.05)。HF组和PHF组的体质量、血清学指标及实时定量PCR结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论:等热量和高热量高脂膳食都能诱导大鼠肥胖和代谢异常;高脂膳食所诱导的机体肥胖及代谢紊乱与脂肪组织中MCHR1 mRNA上调和OB-RbmRNA下调有关。 展开更多
关键词 高脂膳食 黑色素聚集激素受体1 瘦素受体 实时定量PCR 黑色素聚集激素 瘦素
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不同浓度α-促黑素细胞激素对绵羊黑素细胞增殖和黑素生成的影响 被引量:6
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作者 郝晓娟 任玉红 +3 位作者 范瑞文 张秋月 曾庆宝 武良琦 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期578-586,共9页
α-促黑素细胞激素(α-melanocyte-stimulating hormone,α-MSH)与黑皮质素1受体(melanocortin 1 receptor,MC1R)结合,通过c AMP信号通路影响黑色素的生成。然而,不同浓度α-MSH对绵羊黑色素生成的具体影响,还没有定论。本文旨在探讨不... α-促黑素细胞激素(α-melanocyte-stimulating hormone,α-MSH)与黑皮质素1受体(melanocortin 1 receptor,MC1R)结合,通过c AMP信号通路影响黑色素的生成。然而,不同浓度α-MSH对绵羊黑色素生成的具体影响,还没有定论。本文旨在探讨不同浓度α-MSH对绵羊皮肤黑素细胞增殖和黑素合成的影响。实验组α-MSH(0、0.1、1、10、100、1 000 nmol/L)和空白对照组相比,荧光定量PCR和Western印迹检测出MC1R、小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)和酪氨酸酶(tyrosinase,TYR),在添加10 nmol/Lα-MSH时,基因mRNA水平和蛋白水平的表达量最高,之后则降低;ELISA方法检测出c AMP含量总体增加,c GMP含量总体降低,添加10 nmol/Lα-MSH时,c AMP的产量增加最多,c GMP的产量降低最多;酶标法检测出10 nmol/Lα-MSH时,黑色素生成最多,之后则降低。上述结果证明,不同浓度α-MSH通过调控黑色素形成的c AMP路径,影响MC1R、MITF和TYR的基因和蛋白表达,从而影响黑色素的合成,以添加10 nmol/Lα-MSH时,对黑色素细胞表型和黑色素含量影响最为显著。 展开更多
关键词 α-促黑素细胞激素(α-MSH) 黑色素细胞 黑素皮质素1受体(MC1R) 小眼畸形相关转录因子(MITF) 酪氨酸酶(TYR) cAMP路径
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中国羊驼种群MC1R基因的PCR-SSCP分析 被引量:3
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作者 姜俊兵 任杰 +1 位作者 于秀菊 董常生 《家畜生态学报》 2010年第3期15-18,共4页
探究黑素皮质素受体1(melanocortin 1-receptor,MC1R)基因型与羊驼毛色形成之间的关系,研究采用PCR-SSCP结合DNA测序方法,对60头羊驼个体(51头白色被毛,9头有色被毛)的MC1R基因的多态性进行检测,并分析了MC1R基因位点突变与羊驼不同毛... 探究黑素皮质素受体1(melanocortin 1-receptor,MC1R)基因型与羊驼毛色形成之间的关系,研究采用PCR-SSCP结合DNA测序方法,对60头羊驼个体(51头白色被毛,9头有色被毛)的MC1R基因的多态性进行检测,并分析了MC1R基因位点突变与羊驼不同毛色之间的相关性。结果表明,羊驼MC1R基因存在SSCP多态性,初步判定为AB和AA两种基因型,其中A基因的基因频率为55.0%,B基因的基因频率为45.0%,AB型的基因型频率为90.0%,AA型的基因型频率为10.0%,6个AA基因型均在有色被毛羊驼个体中检出;测序检测显示,AA型羊驼MC1R基因的第801号碱基发生突变,该碱基突变导致编码的氨基酸由异亮氨酸(I)突变为缬氨酸(V)。 展开更多
关键词 羊驼 黑色素皮质激素受体1 单链构象多态性
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人MCHR1真核表达载体构建及稳定转染HEK293细胞系的建立
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作者 袁成福 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期612-615,共4页
目的构建人MCHR1真核表达载体,转染HEK293细胞,建立稳定转染的HEK293细胞系。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR1基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后... 目的构建人MCHR1真核表达载体,转染HEK293细胞,建立稳定转染的HEK293细胞系。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR1基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染HEK293细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的HEK293细胞系,用RT-PCR、Western-blot检测MCHR1的表达。结果构建了pcDNA3.1(+)/MCHR1真核表达载体,建立了稳定转染的HEK293细胞系,并成功地表达了目的基因。结论真核表达载体成功构建和稳定转染HEK293细胞系的建立为进一步研究MCHR1的功能奠定了良好的实验基础。 展开更多
关键词 黑色素浓集激素受体(MCHR1) 真核表达载体 转染 HEK293细胞系 基因表达
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不同地理种群中缅树鼩MC1R基因的差异性研究 被引量:2
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作者 付家豪 何一帆 +2 位作者 朱万龙 高文荣 王政昆 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期52-55,59,共5页
黑色素皮质激素受体1基因(Melanocortin receptor 1,Mc1r)作为控制动物毛色的主效候选基因,在动物的毛色中发挥了重要作用。以10个地理种群112只中缅树鼩为研究对象,采用PCR扩增测序共获得954 bp mc1r序列。结果显示:1)954 bp mc1r序列... 黑色素皮质激素受体1基因(Melanocortin receptor 1,Mc1r)作为控制动物毛色的主效候选基因,在动物的毛色中发挥了重要作用。以10个地理种群112只中缅树鼩为研究对象,采用PCR扩增测序共获得954 bp mc1r序列。结果显示:1)954 bp mc1r序列共编码317个氨基酸,蛋白质二级结构以α-螺旋为主,并含有7个跨膜结构域。2)mc1r构建的系统进化树结果显示,10个地理种群中缅树鼩聚为4支,海南种群一支、大新种群一支、片马种群一支、其他种群一支。结果说明,不同地理种群中缅树鼩生存环境的差异导致了毛色的差异。 展开更多
关键词 黑色素皮质激素受体1基因 中缅树鼩 地理种群
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