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IL-3基因转染的黑色素瘤细胞株的建立及其体外生长性质的观察 被引量:2
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作者 章卫平 曹雪涛 叶天星 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1994年第1期85-89,共5页
IL-3作为一种重要的造血调控因子,不仅作用于未成熟的造血前体细胞,还可作用于成熟的免疫细胞。为研究IL-3的免疫调节功能及其潜在的抗肿瘤作用,我们用基因转染技术建立了自分泌IL-3的肿瘤细胞。首先,我们构建了IL-3的表达载体BMGNeo-mI... IL-3作为一种重要的造血调控因子,不仅作用于未成熟的造血前体细胞,还可作用于成熟的免疫细胞。为研究IL-3的免疫调节功能及其潜在的抗肿瘤作用,我们用基因转染技术建立了自分泌IL-3的肿瘤细胞。首先,我们构建了IL-3的表达载体BMGNeo-mIL-3,然后转染B16小鼠黑色素瘤细胞,通过G418抗性筛选和有限稀释获得高表达IL-3的克隆株(806U/ml),并经Northern杂交证实IL-3在细胞内的表达。对此克隆株的体外生长特性的研究发现,虽然野生型B16细胞和转染对照质粒BMGNeo的B16-Neo细胞均不表达IL-3,导入基因后表达IL-3的B16细胞的体外生长能力并无明显改变。这为进一步研究IL-3的免疫调节功能和体内的抗肿瘤作用打下了基础。 展开更多
关键词 IL-3 基因转染 黑色素瘤细胞株 体外生长 造血调控因子 肿瘤细胞
全文增补中
多酚氧化酶抑制剂高良姜素抗黑色素瘤机制研究 被引量:2
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作者 杨镓宁 邓菲 潘宁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1000-1004,共5页
目的:研究高良姜素对多酚氧化酶(PPO)的抑制作用机制,并探讨了高良姜素与多酚氧化酶的结合机制,以期获得高良姜素抗人恶性黑色素瘤细胞株A375机理。方法:分光光度法检测高良姜素对PPO的抑制作用和抑制作用类型;荧光光谱法和分子对接法... 目的:研究高良姜素对多酚氧化酶(PPO)的抑制作用机制,并探讨了高良姜素与多酚氧化酶的结合机制,以期获得高良姜素抗人恶性黑色素瘤细胞株A375机理。方法:分光光度法检测高良姜素对PPO的抑制作用和抑制作用类型;荧光光谱法和分子对接法检测高良姜素与PPO酶的结合方式;MTT法测定高良姜素人恶性黑色素瘤细胞株A375增殖的抑制作用,Transwell法检测高良姜素对A375细胞侵袭的抑制作用。结果:高良姜素是一种竞争型的PPO抑制剂,对PPO氧化酶的半抑制率IC_(50)为(47.86±3.33)μmol/L,抑制常数Ki为(24.83±1.45)μmol/L;高良姜素能够有效猝灭PPO的荧光,高良姜素与PPO的结合常数Ka为(4.67±0.43)×10~4L/mol;高良姜素能够与PPO的活性中心铜离子发生结合作用,并与催化基团His259形成氢键;高良姜素能够明显的抑制A375细胞的增殖和转移,且细胞中的PPO活性和黑色素的合成量降低。结论:高良姜素是一个竞争性的PPO酶抑制剂,对调节黑色素水平起到重要作用,为临床抗皮肤癌提供了理论基础。 展开更多
关键词 高良姜素 多酚氧化酶 抑制作用 荧光光谱 螯合金属铜离子 人恶性黑色素瘤细胞株A375 凋亡
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重组卡介苗及猪苓多糖对荷瘤小鼠巨噬细胞NO释放量的影响 被引量:8
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作者 梅玉屏 曾星 +1 位作者 黄羽 黄建华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期292-295,共4页
目的 观察重组卡介苗 (rBCG)和中药猪苓多糖(PPS) ,对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞释放NO的影响。方法将黑色素瘤细胞株B16接种于小鼠左大腿外侧皮下 ,建立荷瘤小鼠模型 ,分别用rBCG IL 2、rBCG IL 2 +PPS和PPS进行局部治疗。于给药后第 1、2... 目的 观察重组卡介苗 (rBCG)和中药猪苓多糖(PPS) ,对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞释放NO的影响。方法将黑色素瘤细胞株B16接种于小鼠左大腿外侧皮下 ,建立荷瘤小鼠模型 ,分别用rBCG IL 2、rBCG IL 2 +PPS和PPS进行局部治疗。于给药后第 1、2、3和 5wk处死小鼠 ,用NO酶法测定小鼠腹腔巨噬细胞释放NO的水平 ,并观察不同实验组瘤体的变化。结果 rBCG IL 2组小鼠腹腔巨噬细胞释放NO的水平最高。与对照组相比较 ,PPS组小鼠腹腔巨噬细胞释放NO的水平在第 1wk与第 2wk增高 ,第 3wk起与对照组释放的NO水平没有差异。rBCG IL 2组小鼠随给药时间的延长 ,皮下瘤体逐渐缩小。PPS组小鼠瘤体在给药后第 1wk和第 2wk生长缓慢 ,第 3wk起瘤体生长速度明显增加。结论 rBCG IL 2与PPS能提高小鼠腹腔巨噬细胞释放NO的水平 ,rBCG IL 展开更多
关键词 重组卡介苗 猪苓多糖 巨噬细胞 黑色素瘤细胞株 一氧化氮
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人血型B抗原模拟多肽P1/Fas-Mip3β双表达重组质粒的构建及鉴定
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作者 罗敏 李许峰 +2 位作者 岑东芝 邹建军 张积仁 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1939-1942,共4页
目的构建并鉴定人血型B抗原模拟多肽、巨噬细胞炎症蛋白3β(Mip3β)双表达重组质粒。方法抗血型B抗体筛选噬菌体随机12肽库,筛选阳性噬菌体克隆P1,设计特异性引物扩增P1噬菌体DNA,同样设计特异性引物扩增PBluscript-Fas基因的跨膜区及... 目的构建并鉴定人血型B抗原模拟多肽、巨噬细胞炎症蛋白3β(Mip3β)双表达重组质粒。方法抗血型B抗体筛选噬菌体随机12肽库,筛选阳性噬菌体克隆P1,设计特异性引物扩增P1噬菌体DNA,同样设计特异性引物扩增PBluscript-Fas基因的跨膜区及胞内段,与P1酶切连接,最后与质粒PORF5-mMip3βv21扩增巨噬细胞炎症蛋白3β基因酶切连接,获得血型B抗原模拟多肽、Mip3β双表达重组质粒并进行鉴定,并在人黑色素瘤细胞株B16中转染与表达。结果和结论成功制备了血型B抗原模拟多肽、Mip3β双表达重组质粒,并在黑色素瘤细胞株B16中成功表达。 展开更多
关键词 人血型B抗原 摸拟多肽 巨噬细胞炎症蛋白3β 重组质粒 黑色素瘤细胞株B16 FAS基因
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