选择性激动黑皮质素4型受体(MC4R)通过HMGB1/TLR4/NF-κB信号途径对抗大鼠脓毒症致急性肝损伤 被引量：21

1

作者 李徽徽 仇大鹏 +2 位作者 高琴 汪华学 孙美群 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1055-1059,1064,共6页

目的观察选择性激动黑皮质素4型受体(MC4R)对脓毒症致急性肝损伤大鼠的影响。方法 64只雄性SD大鼠随机分假手术组(假手术后用PBS处理)、盲肠结扎穿孔(CLP)组(采用CLP建立脓毒症模型)、Ro27-3225处理组(CLP后用Ro27-3225处理)和Ro27-322... 目的观察选择性激动黑皮质素4型受体(MC4R)对脓毒症致急性肝损伤大鼠的影响。方法 64只雄性SD大鼠随机分假手术组(假手术后用PBS处理)、盲肠结扎穿孔(CLP)组(采用CLP建立脓毒症模型)、Ro27-3225处理组(CLP后用Ro27-3225处理)和Ro27-3225假手术对照组(假手术后用Ro27-3225处理),每组16只(10只大鼠观察术后一般状态和72 h生存率,另外6只大鼠于术后24 h采集血液及肝组织标本)。各组分别于术后30 min腹腔注射PBS或Ro27-3225(180μg/kg),术后24 h测定大鼠心率(HR)及平均动脉压(MAP)、大鼠血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平。动物处死后,HE染色观察肝组织病变,反转录PCR检测肝组织中Toll样受体4(TLR4)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)和caspase-3 mRNA水平,免疫组织化学染色检测肝细胞中核因子κB(NF-κB)p65的表达,并分析NF-κB p65核阳性率。结果与假手术组相比,CLP组大鼠72 h生存率和MAP降低,血清中AST和ALT水平明显升高,肝索排列紊乱,肝细胞水肿,有明显炎性细胞浸润,肝组织中TLR4、HMGB1和caspase-3 mRNA水平明显升高,肝细胞中NF-κB p65核阳性率明显升高。与CLP组相比,Ro27-3225处理组大鼠72 h生存率和MAP明显升高,血清中AST和ALT水平明显降低,肝组织结构损伤明显减轻,肝组织中TLR4、HMGB1和caspase-3 mRNA水平降低,肝细胞中NF-κB p65核阳性率明显降低。结论脓毒症能引起肝损伤,选择性激动MC4R可能通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号途径,减轻炎症反应,降低脓毒症引起的肝损伤。 展开更多

关键词 脓毒症 急性肝损伤 Toll样受体4 高迁移率族蛋白1 核因子ΚB 黑皮质素4型受体

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黑皮质素受体-4:生物学特征、作用机理和影响因素 被引量：6

2

作者 张鑫 李方方 +2 位作者 朱宇旌 郑丽莉 张勇 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期683-690,共8页

黑皮质素受体4(MC4R)是G-蛋白耦联受体(GPCR),是下丘脑分泌的一种肽类物质,在调控动物采食量中起着重要的作用。MC4R与阿黑皮质素原(POMC)分泌的α-促黑素(α-MSH)结合,激活下丘脑MC4R神经元的表达,从而抑制采食量。本文综述了MC4R的生... 黑皮质素受体4(MC4R)是G-蛋白耦联受体(GPCR),是下丘脑分泌的一种肽类物质,在调控动物采食量中起着重要的作用。MC4R与阿黑皮质素原(POMC)分泌的α-促黑素(α-MSH)结合,激活下丘脑MC4R神经元的表达,从而抑制采食量。本文综述了MC4R的生物学特征及其在动物采食量调控中的作用机理,并阐述了影响MC4R活性的因素。 展开更多

关键词 黑皮质素受体-4 生物学特征 采食量调控 作用机理

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激动黑皮质素4型受体对抗脓毒症诱导的肾脏损伤 被引量：2

3

作者 汪华学 李徽徽 +2 位作者 柴继侠 于影 高琴 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2013年第5期500-505,共6页

目的:观察激动黑皮质素4型受体(MC4R)对抗脓毒症诱导的肾脏损伤作用,并探讨其机制。方法:雄性SD大鼠24只,随机分为:假手术组(Sham)、Sham+MC4R激动剂Ro27-3225组、盲肠结扎穿孔组(CLP)和CLP+Ro27-3225组,造模24h后测定血清尿素氮(BUN)... 目的:观察激动黑皮质素4型受体(MC4R)对抗脓毒症诱导的肾脏损伤作用,并探讨其机制。方法:雄性SD大鼠24只,随机分为:假手术组(Sham)、Sham+MC4R激动剂Ro27-3225组、盲肠结扎穿孔组(CLP)和CLP+Ro27-3225组,造模24h后测定血清尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)水平,HE染色观察肾脏形态学变化,免疫组化观察肾小管细胞NF-κB P65的表达,RT-PCR测定肾脏组织NF-κB mRNA表达情况。结果:与Sham组相比,CLP组血清BUN和CRE水平明显升高(P<0.01),组织切片显示CLP组大鼠肾小体中血管球淤血、皱缩、肾小囊腔扩大,伴肾小管上皮细胞肿胀和坏死。肾脏组织NF-κB P65表达呈强阳性,NF-κB mRNA表达增高(P<0.01)。与CLP组相比,CLP+Ro27-3225组BUN和CRE水平下降(P<0.01),肾小体、肾小管损伤减轻,肾脏组织NF-κB P65表达和NF-κB mRNA表达下降(P<0.01)。结论:脓毒症大鼠肾脏功能受损,激动MC4R可对抗脓毒症诱导的肾脏损伤,这可能与减少NF-κB的表达,降低炎症反应有关。 展开更多

关键词 脓毒症 肾损伤 黑皮质素4型受体 NF-ΚB 大鼠

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犬黑皮质素受体4真核表达载体的构建及表达 被引量：3

4

作者 王光川 巴彩凤 +4 位作者 苏荣健 张轶博 赵微 宋慧娟 武洁 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第31期13564-13567,共4页

[目的]构建带myc和His标签的犬黑皮质素受体4真核表达载体并在MDCK细胞中进行表达。[方法]以犬MC4R基因组DNA为模板PCR扩增目的基因编码区,将扩增产物进行T-A克隆;酶切、测序鉴定成功后将目的基因亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1-myc-His/... [目的]构建带myc和His标签的犬黑皮质素受体4真核表达载体并在MDCK细胞中进行表达。[方法]以犬MC4R基因组DNA为模板PCR扩增目的基因编码区,将扩增产物进行T-A克隆;酶切、测序鉴定成功后将目的基因亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1-myc-His/A。重组体pcDNA3.1-myc-His/A-cMC4R经酶切和测序鉴定;采用FuGENE HD介导转染技术将重组体导入MDCK细胞;转染后继续培养72 h,提取细胞内总RNA,RT-PCR鉴定目的基因的表达;提取细胞总蛋白,Western Blot检测蛋白表达。[结果]构建带标签的pcDNA3.1-myc-His/A-cMC4R重组真核表达载体,测序结果与GenBank公布的序列相似性为99%。RT-PCR和Western Blot检测到目的基因表达。[结论]成功构建犬真核表达载体pcDNA3.1-myc-His/A-MC4R,重组体能在MDCK细胞中表达。 展开更多

关键词 犬 黑皮质素受体4 真核表达载体 MDCK细胞

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犬黑皮质素受体4真核表达载体的构建及在COS-7细胞中的表达 被引量：2

5

作者 聂茹 巴彩凤 +3 位作者 李会 张轶博 佟伟 苏荣健 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第33期10608-10610,共3页

[目的]构建犬黑皮质素受体4真核表达载体并在COS-7细胞中进行瞬间表达。[方法]以犬MC4R线性DNA为模板,进行引物设计,PCR特异性扩增,扩增产物连接到pMD18-T载体上,酶切鉴定后测序。将该片段亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)。重组体pcD-N... [目的]构建犬黑皮质素受体4真核表达载体并在COS-7细胞中进行瞬间表达。[方法]以犬MC4R线性DNA为模板,进行引物设计,PCR特异性扩增,扩增产物连接到pMD18-T载体上,酶切鉴定后测序。将该片段亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)。重组体pcD-NA3.1(+)-MC4R经过酶切和测序鉴定。采用FuGENE HD介导转染技术将pcDNA3.1(+)-MC4R导入COS-7细胞,提取细胞内总RNA,RT-PCR扩增犬MC4R基因的全长cDNA编码序列。[结果]克隆犬MC4R基因的全长cDNA序列,并以pcDNA3.1(+)表达载体为骨架,构建真核表达载体,测序的扩增片段与GenBank公布的模板序列经Blast比对相似性为99%。采用G418筛选,获得带有pcDNA3.1(+)-MC4R的COS-7细胞。[结论]成功构建犬真核表达载体pcDNA3.1(+)-MC4R,重组体能在真核细胞中表达。 展开更多

关键词 犬 黑皮质素受体4 pcDNA3.1(+)质粒 真核表达载体 COS-7细胞

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黑皮质素受体-4调节通路的研究进展 被引量：7

6

作者 聂茹 巴彩凤 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2008年第4期317-320,共4页

黑皮质素系统来自阿片-促黑素细胞皮质素原,在中枢摄食行为和能量平衡代谢中起到重要作用,此系统生理功能的发挥主要通过与下丘脑神经元细胞上特定膜受体(黑皮质素受体)结合完成。黑皮质素受体(MCR)有五种亚型(MC1R-MC5R),其中参与体重... 黑皮质素系统来自阿片-促黑素细胞皮质素原,在中枢摄食行为和能量平衡代谢中起到重要作用,此系统生理功能的发挥主要通过与下丘脑神经元细胞上特定膜受体(黑皮质素受体)结合完成。黑皮质素受体(MCR)有五种亚型(MC1R-MC5R),其中参与体重调节的受体主要是黑皮质素受体3(MC3R)和黑皮质素受体4(MC4R)。MC4R属于G蛋白耦联受体,具有七次跨膜结构。作为一种膜受体,MC4R发挥体重调节作用,一方面受外界激动剂或拮抗剂的调节;另一方面,此受体活化后会影响到细胞内的信号调节通路。研究MC4R的功能首先要了解受体的结构,本文对G蛋白耦联受体的结构进行了较详细的叙述,MC4R经信号调节通路,激活腺苷酸环化酶,增加cAMP的浓度,最终通过影响细胞内基因的转录和翻译,来调节体重和能量的消耗。 展开更多

关键词 黑皮质素受体-4 基因结构 蛋白结构 信号传导

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Western blot鉴定背肩胛棕色脂肪黑皮质素4型受体的研究 被引量：1

7

作者 范奎奎 李强 +3 位作者 杨文雅 潘登 李海军 杜晨光 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期841-846,共6页

旨在探究Western blot检测低丰度蛋白表达及试验过程对检测结果的影响。本试验以6~8周龄C57/BL6小鼠背肩甲棕色脂肪组织(Brown adipose tissue,BAT)为试验材料,以低丰度表达的黑皮质素4型受体(Melanocortin-4-receptor,MC4R)为检测蛋白... 旨在探究Western blot检测低丰度蛋白表达及试验过程对检测结果的影响。本试验以6~8周龄C57/BL6小鼠背肩甲棕色脂肪组织(Brown adipose tissue,BAT)为试验材料,以低丰度表达的黑皮质素4型受体(Melanocortin-4-receptor,MC4R)为检测蛋白,不同蛋白处理方法及电转膜液的组分、pH为试验对照条件,探究蛋白提取方法、电转液的组分与pH对转膜效率的影响。结果显示,转膜初始电压及功率与转膜液中十二烷基磺酸钠(SDS)含量及pH极显著相关,恒流转膜时,转膜液中SDS含量与转膜电压及功率呈反比,pH为8.0时的转膜电压及功率极显著高于pH 7.6(P<0.01)和8.6的转膜电压及功率(P<0.001);MC4R及相关蛋白在醇类物混合裂解液(20%Methanol+1%Triton+1%SDS+RIPA)的蛋白处理组的表达显著优于单独RIPA的蛋白处理组(P<0.05),极显著优于Trizol的蛋白处理组(P<0.01)。综上,于MC4R蛋白而言,在裂解液的基础上添加增强剂(Triton和SDS),可促进蛋白提取的效率,提高抗体检测的灵敏性。上述结果有助于相关操作人员对主要细节的认识,提高试验的灵敏及重复性。 展开更多

关键词 蛋白印迹 背肩胛骨棕色脂肪组织 转膜液 黑皮质素-4型受体

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金华猪促黑激素皮质素受体4基因多态性分析 被引量：7

8

作者 赵晓枫 聂光军 徐宁迎 《养猪》 2004年第5期22-24,共3页

应用PCR-RFLP方法对金华猪Ⅰ系(154头)、金华猪Ⅱ系(41头)和金华猪Ⅲ系(53头)的MC4R基因的1269～1494bp区段进行扩增,并用TaqI酶进行酶切,比较了MC4R酶切后基因型频率分布情况。结果表明,AA基因型频率在金华猪上较高达到0.9194,在Ⅱ系... 应用PCR-RFLP方法对金华猪Ⅰ系(154头)、金华猪Ⅱ系(41头)和金华猪Ⅲ系(53头)的MC4R基因的1269～1494bp区段进行扩增,并用TaqI酶进行酶切,比较了MC4R酶切后基因型频率分布情况。结果表明,AA基因型频率在金华猪上较高达到0.9194,在Ⅱ系中最高达到0.9512,Ⅲ系次之达到0.9434,Ⅰ系最低达到0.9026,而金华猪的AB基因型和BB基因型频率都较低分别为0.0565和0.0242。 展开更多

关键词 金华猪 促黑激素皮质素受体4 基因 多态性 PCR-RFLP

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α-黑素细胞刺激素及黑皮质素受体-4在能量平衡和繁殖中的功能研究 被引量：2

9

作者 温海深 张莹 +3 位作者 冯启超 侯志帅 齐鑫 李昀 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2020年第3期176-183,共8页

阿片黑素促皮质激素原(POMC)是黑皮质激素的前体物质,在机体中广泛分布。近年来,POMC及其衍生物黑素细胞刺激素(MSH)和黑皮质素受体-4(MC4R)在能量稳态和繁殖活动中的作用备受关注。研究发现,POMC神经元及其加工后的产物对摄食和体重的... 阿片黑素促皮质激素原(POMC)是黑皮质激素的前体物质,在机体中广泛分布。近年来,POMC及其衍生物黑素细胞刺激素(MSH)和黑皮质素受体-4(MC4R)在能量稳态和繁殖活动中的作用备受关注。研究发现,POMC神经元及其加工后的产物对摄食和体重的调节具有重要作用。此外,POMC神经元在下丘脑中与GnRH神经元紧密接触,由其产生的神经递质和神经肽可能对GnRH神经元具有重要的输入作用,从而直接或间接地调控下丘脑–垂体–性腺轴(HPG)中繁殖相关激素的合成并影响生殖活动。本文综述了黑皮质素系统对能量稳态和繁殖活动的调控作用以及目前MC4R在硬骨鱼类中的药理学研究,以期其能够在动物的生长发育和繁殖中具有应用前景。 展开更多

关键词 阿片黑素促皮质激素原 Α-黑素细胞刺激素 黑皮质素受体-4 能量稳态 繁殖

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黑皮质素受体4基因rs17782313位点基因多态性与减重手术治疗肥胖症患者的减重效果的关系

10

作者 刘冰阳 王勇 +1 位作者 刘聪 李玲 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1643-1646,共4页

目的:研究我国北方汉族肥胖症患者黑皮质素受体4(melanocortin-4 receptor,MC4R)基因的rs17782313位点基因多态性对腹腔镜Roux-en-Y胃旁路术(1aparoscopic Roux-en-Y gastric bypass,LRYGB)减重效果的影响。方法:回顾性分析中国医科大... 目的:研究我国北方汉族肥胖症患者黑皮质素受体4(melanocortin-4 receptor,MC4R)基因的rs17782313位点基因多态性对腹腔镜Roux-en-Y胃旁路术(1aparoscopic Roux-en-Y gastric bypass,LRYGB)减重效果的影响。方法:回顾性分析中国医科大学附属盛京医院2011年1月至2013年12月收治的81例病态性肥胖接受LRYGB治疗的患者临床资料,提取患者外周血DNA,PCR扩增目的基因后应用直接测序法,对rs17782313位点基因型进行检测。根据基因型分组:风险基因携带组和非携带组,比较分析2组代谢指标、体质指数(body mass index,BMI),多余体质量减少率(excess weight loss,EWL)等术后变化,评价该基因对减重效果的影响。结果:(1)rs17782313位点的3种基因型TT、TC、CC,基因频率分别为50.62%(41例)、35.80%(29例)、13.58%(11例)。(2)不同基因型的各组间,体质量、BMI、血脂、空腹血糖、糖化血红蛋白等指标无明显差异。(3)风险基因携带者术后BMI、EWL下降少于非携带者,但未达到统计学差异(女性患者BMI术后6个月P=0.296,12个月P=0.179;EWL P=0.139,0.094。男性患者BMI术后6个月P=0.295,12个月P=0.072;EWL P=0.106,0.077)。结论:MC4R基因rs17792313位点C等位基因(风险基因)携带者与非携带者的减重效果相似。 展开更多

关键词 黑皮质素受体4 基因多态性 肥胖 减重效果

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黑皮质素受体-4在癫痫模型大鼠脑组织中的表达及相关机制 被引量：2

11

作者 陈雅岚 李杰 +2 位作者 徐馨 米秀娟 王学峰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第24期2445-2450,共6页

目的探讨黑皮质素受体-4(melanocortin-4 receptor,MC4R)在癫痫模型大鼠脑组织中的表达及可能的相关机制。方法将52只雄性SD大鼠分为对照组,6、24、72 h、7、14、30、60 d 8个实验组,实验组建立氯化锂-匹罗卡品模型,采用Western blot、... 目的探讨黑皮质素受体-4(melanocortin-4 receptor,MC4R)在癫痫模型大鼠脑组织中的表达及可能的相关机制。方法将52只雄性SD大鼠分为对照组,6、24、72 h、7、14、30、60 d 8个实验组,实验组建立氯化锂-匹罗卡品模型,采用Western blot、免疫组织化学、免疫组织荧光法检测MC4R在模型大鼠脑组织中的表达及分布。另外40只雄性SD大鼠,分成正常对照组、戊四氮组(pentylenetetrazol,PTZ)、PTZ+0.9%Na Cl组和PTZ+HS014组(HS014为MC4R特异性抑制剂),建立PTZ慢性点燃模型,记录各组发作情况。建模28 d后将各组大鼠处死,Western blot检测各组大鼠PhspoGluR1(Ser 845)的表达情况。结果与对照组相比,MC4R在氯化锂-匹罗卡品模型大鼠脑组织中呈动态升高趋势,并于第14天达峰值(P<0.01)。在PTZ慢性点燃过程中,与对照相比,经HS014干预大鼠的平均发作评分明显降低(P<0.05),全身强直阵挛发作(generalized tonic-clonicseizure,GTCS)的潜伏期明显延长(P<0.05)。29 d后Western blot检测结果显示HS014处理组大鼠脑组织中的Phspo-GluR1(ser845)表达量较PTZ组明显下降(P<0.05)。结论 MCR4可能通过调节GluR1的ser 845位点的磷酸化水平参与到了癫痫的发生、发展中。 展开更多

关键词 癫痫 黑皮质素受体-4 氯化锂-匹罗卡品 戊四氮 GLUR1

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犬黑皮质素受体-4突变体D298N真核表达载体的构建及其在MDCK细胞中的表达

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作者 宋立先 刘春红 +2 位作者 王占青 高蓉 徐学振 《安徽农业科学》 CAS 2022年第20期76-80,共5页

[目的]引进犬MC4R突变点,构建突变体D298N表达载体并在MDCK细胞中获得表达。[方法]设计带突变点D298N引物,以犬MC4R基因组DNA为模板,采用普通PCR和Overlap-PCR扩增编码区,将产物克隆、酶切、测序鉴定。将测序正确的基因连接到pcDNA3.1-m... [目的]引进犬MC4R突变点,构建突变体D298N表达载体并在MDCK细胞中获得表达。[方法]设计带突变点D298N引物,以犬MC4R基因组DNA为模板,采用普通PCR和Overlap-PCR扩增编码区,将产物克隆、酶切、测序鉴定。将测序正确的基因连接到pcDNA3.1-myc-His/A载体上,将重组体pcDNA3.1-myc-His/A-cMC4R-D298N酶切、鉴定,将测序正确的重组体转染到MDCK细胞中,继续培养3 d,提取细胞总RNA,并采用RT-PCR方法检测基因表达。提取细胞总蛋白,Western Blot鉴定蛋白表达。[结果]构建带D298N突变点的真核表达载体,提取质粒后有2处碱基不同,分别是777位碱基T→C,892位碱基G→A(引入的突变位点)。转染到MDCK后,RT-PCR和Western Blot均检测到重组体在基因水平和蛋白水平的表达。[结论]成功构建犬的重组体真核表达载体并在MDCK细胞中表达。 展开更多

关键词 犬 黑皮质素受体-4 真核表达载体 定点诱变 D298N MDCK细胞

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二甲双胍通过激活下丘脑MC4R缓解高脂饮食大鼠胰岛素抵抗

13

作者 李燕 张好好 +3 位作者 任艳琦 冯李慧 王有琴 郑路 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第8期1467-1476,共10页

目的:探讨二甲双胍(metformin,Met)缓解高脂饮食(high-fat diet,HF)大鼠胰岛素抵抗的中枢机制。方法:将40只健康雄性SD大鼠随机分为普通饮食(normal chow,NC)组、HF组、HF+Met组和HF+Met+SHU9119[黑皮质素4受体(melanocortin 4 receptor... 目的:探讨二甲双胍(metformin,Met)缓解高脂饮食(high-fat diet,HF)大鼠胰岛素抵抗的中枢机制。方法:将40只健康雄性SD大鼠随机分为普通饮食(normal chow,NC)组、HF组、HF+Met组和HF+Met+SHU9119[黑皮质素4受体(melanocortin 4 receptor,MC4R)拮抗剂]组,每组10只,SHU9119连续注射10 d,Met连续干预12周。实验结束后,检测各组大鼠骨骼肌AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)及沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)表达和活性、线粒体氧化应激、线粒体功能及数量,利用高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验中第60~120 min平均葡萄糖输注率(average glucose infusion rate from 60 to 120 min,GIR60-120)和骨骼肌2-脱氧葡萄糖摄取(2-deoxyglucose uptake,DGU)评估系统及骨骼肌胰岛素敏感性。结果:与NC组相比,HF组大鼠骨骼肌AMPK/SIRT1表达及活性均显著降低(P<0.05),骨骼肌线粒体氧化应激指标活性氧(reactive oxy‑gen species,ROS)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平显著升高(P<0.05),同时抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPX)及锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,MnSOD)活性降低(P<0.05),线粒体氧化能力标志物柠檬酸合酶(citrate synthase,CS)活性和线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)拷贝数下降(P<0.05),且GIR60-120和DGU显著减低(P<0.05)。Met干预后,HF+Met组大鼠骨骼肌AMPK/SIRT1表达和活性较HF组显著增强(P<0.05),骨骼肌线粒体ROS和MDA水平显著下降(P<0.05),而GPX与MnSOD活性升高(P<0.05),线粒体CS活性和mtDNA拷贝数也显著增加(P<0.05),同时GIR60-120和DGU均显著提高(P<0.05)。侧脑室注射MC4R拮抗剂SHU9119后,Met对HF大鼠骨骼肌AMPK/SIRT1通路、线粒体功能及胰岛素敏感性的有益作用被阻断。结论:Met能够上调HF大鼠骨骼肌AMPK/SIRT1的表达和活性,逆转线粒体功能障碍,并改善骨骼肌及系统胰岛素抵抗,其机制可能与下丘脑MC4R的激活有关。 展开更多

关键词 二甲双胍 黑皮质素4受体 AMPK/SIRT1信号通路 胰岛素抵抗

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麦洼牦牛MC4R基因多态性及与生长性状的相关分析 被引量：3

14

作者 柴志欣 王永 +1 位作者 钟金城 罗晓林 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1-6,共6页

为探究黑皮质素4受体基因(MC4R)在麦洼牦牛群体中的遗传多态性,开展其与生长性状间的关联分析,采用PCR-SSCP技术和DNA测序技术对100头麦洼牦牛MC4R基因外显子区域进行多态性分析,并运用最小二乘方差分析法,对各基因型间体高、体质量、... 为探究黑皮质素4受体基因(MC4R)在麦洼牦牛群体中的遗传多态性,开展其与生长性状间的关联分析,采用PCR-SSCP技术和DNA测序技术对100头麦洼牦牛MC4R基因外显子区域进行多态性分析,并运用最小二乘方差分析法,对各基因型间体高、体质量、体斜长、胸围、管围等生长性状指标进行差异显著性检验。结果表明:MC4R基因引物P6上存在EE和EF 2种基因型,其中,粉嘴群只有EF基因型,存在严重偏态,EF型在2个群体中占绝对优势,E等位基因为优势基因;2个群体均处于中度多态(0.25<PIC<0.5),遗传变异较大;测序结果表明,在1 172bp处(与原序列相比)发生了C→T单碱基突变,并导致编码氨基酸由丝氨酸(S)变为苯丙氨酸(F)。该突变位点对体高、体斜长、胸围、管围、体质量等生长发育指标均无显著影响(P<0.05)。 展开更多

关键词 麦洼牦牛 黑皮质素4受体基因 单核苷酸多态性

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犬MC4R突变体D90N真核表达载体的构建及表达 被引量：2

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作者 魏嘉 王光川 +3 位作者 武洁 张轶博 宋慧娟 巴彩凤 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第12期6118-6121,6124,共5页

[目的]构建犬黑皮质素受体4(MC4R)突变体D90N真核表达载体,并在MDCK细胞中进行表达。[方法]以犬MC4R基因组DNA为模板,应用重叠PCR扩增MC4R突变体D90N目的基因,将扩增产物进行T-A克隆;酶切、测序鉴定成功后将目的基因亚克隆到真核表达载... [目的]构建犬黑皮质素受体4(MC4R)突变体D90N真核表达载体,并在MDCK细胞中进行表达。[方法]以犬MC4R基因组DNA为模板,应用重叠PCR扩增MC4R突变体D90N目的基因,将扩增产物进行T-A克隆;酶切、测序鉴定成功后将目的基因亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1-myc-His/A。重组体pcDNA3.1-myc-His/A-cMC4R-D90N经酶切和测序鉴定;采用FuGENEHD介导转染技术将重组体导入MDCK细胞;转染后继续培养72.0h,提取细胞内总RNA,用RT-PCR鉴定目的基因的表达;提取细胞总蛋白,用WesternBlot检测蛋白表达。[结果]构建带标签的pcDNA3.1-myc-His/A-cMC4R-D90N重组真核表达载体,测序结果显示含有D90N突变位点。RT-PCR和Western Blot检测到目的基因表达。[结论]成功构建犬真核表达载体pcDNA3.1-myc-His/A-cMC4R-D90N,重组体能在MD-CK细胞中表达。 展开更多

关键词 犬 黑皮质素受体4 真核表达载体 MDCK细胞 D90N

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ML00253764拯救MC4R缺陷型突变体的特性研究

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作者 王小花 曹小红 樊振川 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期255-259,共5页

旨在探究非肽类小分子ML00253764对致肥胖MC4R突变体拯救的特异性及经其拯救后受体的内化动力学特性,构建了黑皮质素受体及其突变体稳定表达的细胞模型。流式细胞术结果显示,ML00253764使MC4R缺陷型变受体N62S与P78L的膜表面表达分别提... 旨在探究非肽类小分子ML00253764对致肥胖MC4R突变体拯救的特异性及经其拯救后受体的内化动力学特性,构建了黑皮质素受体及其突变体稳定表达的细胞模型。流式细胞术结果显示,ML00253764使MC4R缺陷型变受体N62S与P78L的膜表面表达分别提高了43%与34%,但对其他黑皮质素受体及其突变体几乎无影响,说明ML00253764的拯救效果具有MC4R受体特异性及突变受体特异性特征。内化动力学研究结果证明经拯救的突变受体与野生型受体的内化特性相同,内化速率参数t1/2无显著性差异。内源性配体α-MSH及Ag RP对MC4R缺陷型受体膜表面表达无拯救性功效,进一步从侧面证明ML00253764的作用方式与二者不同,而突变受体被拯救是细胞膜渗透性药学伴侣分子特定作用的结果。 展开更多

关键词 黑皮质素-4型受体 药学伴侣分子 拯救

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