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题名黑木耳菌棒中长枝木霉LAMP可视化检测技术研究
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作者
朱姝蕊
张传清
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机构
浙江越骆生物科技有限公司
浙江农林大学现代农学院
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出处
《食药用菌》
2025年第4期280-284,共5页
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基金
丽水市公益性技术研究项目(2020GYX10)。
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文摘
长枝木霉(Trichoderma harzianum)是黑木耳生产中菌棒灭菌不彻底的标志性污染菌之一。为提高长枝木霉在黑木耳菌棒中早期诊断的效率,本研究提出一种基于环介导等温扩增(LAMP)技术的可视化快速检测方法。研究首先选取长枝木霉的tubulin基因作为靶基因,设计特异性引物,初步构建LAMP反应体系。通过在LAMP反应中加入羟基萘酚蓝作为显色剂,实现了对反应产物的颜色判别,从而实现可视化检测。最后,通过优化反应温度(55~66℃,共12个梯度)和反应时间(15~120 min,共8个梯度),提升检测体系的灵敏度。研究结果表明,该体系采取反应温度60℃,反应时间60 min,灵敏度达到10 pg/μL,比传统的PCR方法高出100倍。该方法简便、快速、准确,无需昂贵仪器即可实施,适用于普通实验室和田间的大规模检测,为黑木耳菌棒中长枝木霉的早期诊断与防控提供了有力的技术支持。
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关键词
长枝木霉
LAMP技术
可视化检测
黑木耳菌棒
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Keywords
Trichoderma harzianum
LAMP detection technology
visual detection
Auricularia heimuer cultivation sticks
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分类号
S646
[农业科学—蔬菜学]
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