甘露聚糖酶在黑曲霉中的优化表达及其酶学性质研究

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作者 张会 李柱 +4 位作者 马佳欣 樊俊博 邵志伟 姜毓君 李杰 《食品工业科技》 北大核心 2025年第15期218-227,共10页

为获得更高表达量和优良酶学性质的甘露聚糖酶,本研究采用同源重组定点整合技术构建甘露聚糖酶黑曲霉重组菌株,并对其表达特性及酶学性质进行分析。本研究成功获得了在glaA位点发生同源重组的甘露聚糖酶黑曲霉纯合转化子MG,以及同时在a... 为获得更高表达量和优良酶学性质的甘露聚糖酶,本研究采用同源重组定点整合技术构建甘露聚糖酶黑曲霉重组菌株,并对其表达特性及酶学性质进行分析。本研究成功获得了在glaA位点发生同源重组的甘露聚糖酶黑曲霉纯合转化子MG,以及同时在asAA位点过表达内质网辅助分子伴侣DnaJ1基因的甘露聚糖酶黑曲霉纯合转化子MD。菌株MG和MD在约37 kDa处均显现出明显的甘露聚糖酶Man蛋白条带,其最高酶活力分别为6909.861 U·mL^(−1)和7890.083 U·mL^(−1),其菌落大小略小于野生型菌株TH-2(ΔasAA::pyrG)。菌株MG和MD添加1%CPPs后的最高甘露聚糖酶酶活力分别提高了1.07倍和1.14倍,并且菌落大小明显增加。菌株MD中的甘露聚糖酶man基因转录水平是MG的1.01倍。此外,MD中内质网UPR指示基因hacA和bipA的转录水平均高于MG。重组甘露聚糖酶Man的最适温度为70℃、最适pH为4.5,且对金属离子及化学试剂表现出较高耐受性。通过过表达DnaJ1基因及添加1%CPPs可以有效提高甘露聚糖酶Man的表达量。本研究对开发和筛选酶学性质更优、产量更高的甘露聚糖酶具有重要意义。 展开更多

关键词 甘露聚糖酶 黑曲霉 DnaJ1 CPPS 酶学性质

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黑曲霉酸性脂肪酶Tgl的酶学性质及其酯化能力研究 被引量：1

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作者 李文瑶 陈非凡 +4 位作者 郑佳 刘怡宁 杜丽平 卢彦坪 马立娟 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期237-243,共7页

脂肪酶是一种具有水解、酯化、酯交换等多种功能的生物催化剂,为研究脂肪酶的酯化能力,该文克隆表达了来源于黑曲霉的脂肪酶Tgl编码基因,对其进行生物信息学分析,研究该酶的酶学性质及其催化合成脂肪酸乙酯的能力。结果表明,脂肪酶Tgl... 脂肪酶是一种具有水解、酯化、酯交换等多种功能的生物催化剂,为研究脂肪酶的酯化能力,该文克隆表达了来源于黑曲霉的脂肪酶Tgl编码基因,对其进行生物信息学分析,研究该酶的酶学性质及其催化合成脂肪酸乙酯的能力。结果表明,脂肪酶Tgl的最适反应温度为50℃,在50℃下孵育12 h后残余酶活力仍能达到70%左右;最适反应pH值为5.0,在pH 5.0条件下孵育12 h后,其相对酶活力为70%。有机试剂对脂肪酶Tgl均表现出不同程度的抑制作用,其中,乙醇对脂肪酶的抑制作用最为明显,但是在40%的乙醇体系下,Tgl的残余酶活力仍接近80%。20%的乙醇体系中,Tgl催化合成乙酸乙酯的产量最高,为41.62 mg/L,而在60%乙醇体系中催化合成己酸乙酯的产量最高,可达171.08 mg/L。由此可见,黑曲霉酸性脂肪酶Tgl具有较高的催化脂肪酸乙酯合成的能力,在酿造工业中具有很大的应用潜力。 展开更多

关键词 黑曲霉 脂肪酶 生物信息学分析 酶学性质 酯化能力

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基因表达盒多拷贝对木聚糖酶在黑曲霉中表达的影响

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作者 张会 马佳欣 +3 位作者 李柱 邵志伟 樊俊博 李杰 《东北农业大学学报》 北大核心 2025年第2期63-71,共9页

为提高木聚糖酶在黑曲霉中的分泌表达,采用同源重组定点整合技术将含有1或2个AnxynB基因表达盒的重组表达载体质粒pSZHG6R-AnxynB1R和pSZHG6R-AnxynB2R转入Aspergillus niger TH-2上高表达的glaA基因位点,获得纯合同源重组转化子X1R和X... 为提高木聚糖酶在黑曲霉中的分泌表达,采用同源重组定点整合技术将含有1或2个AnxynB基因表达盒的重组表达载体质粒pSZHG6R-AnxynB1R和pSZHG6R-AnxynB2R转入Aspergillus niger TH-2上高表达的glaA基因位点,获得纯合同源重组转化子X1R和X2R;重组菌株摇瓶发酵上清液,经SDS-PAGE、酶活性和实时荧光定量PCR检测。结果表明:通过多拷贝策略,木聚糖酶酶活性提高61.27%,AnxynB基因转录水平提高102.56%,同时增加基因剂量,触发UPR响应以缓解内质网应激。重组木聚糖酶最适反应温度为50℃,最适反应pH为5.5,在此条件下酶活性最高为7 596.43 U·mL^(-1)。 展开更多

关键词 木聚糖酶 黑曲霉 多拷贝 酶学性质

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高产单宁酶黑曲霉菌株的常温常压等离子体诱变选育及发酵工艺研究 被引量：1

4

作者 马东旭 李忠辉 +3 位作者 张子恒 王昕 龚大春 石小涛 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第12期115-122,共8页

单宁酶是水解单宁物质的生物催化剂,被广泛应用于食品、饮料、医药行业。黑曲霉作为生产单宁酶的重要微生物,需要通过菌种选育和发酵工艺优化进一步提升产酶量,以满足日益增长的应用需求。结果表明,初始菌株黑曲霉(Aspergillus niger)L... 单宁酶是水解单宁物质的生物催化剂,被广泛应用于食品、饮料、医药行业。黑曲霉作为生产单宁酶的重要微生物,需要通过菌种选育和发酵工艺优化进一步提升产酶量,以满足日益增长的应用需求。结果表明,初始菌株黑曲霉(Aspergillus niger)LH进行常温常压等离子体(atmospheric room temperature plasma,ARTP)诱变的最佳条件为孢子浓度3×10^(6) CFU/mL、诱变功率100 W、气量10 L/min、间距2 mm、诱变时间240 s。经平板显色初步筛选得到49株诱变菌,并通过摇瓶发酵复筛,得到产酶稳定的突变株LH2301,其单宁酶的酶活力达到2.292 U/mL,比出发菌株提高了2.27倍,具有良好的遗传稳定性。通过正交试验得到最优培养条件为5 g/L葡萄糖,21 g/L酵母浸粉,初始pH 4.0,接种量为3.5%,单宁酸质量浓度为20 g/L,酶活力水平可提升至6.105 U/mL。对诱变株所产单宁酶进行了初步表征,其分子质量为90 kDa,当温度处于40~50℃,pH值为3.0~5.0时,该酶展示出良好的催化活性;该酶的最适温度为50℃,最适pH值为4.0,金属离子Ca^(2+)、K^(+)、Al^(3+)对其酶活力有促进作用。该研究丰富了单宁酶的微生物菌种资源,为单宁酶的工业化应用研究提供了基础。 展开更多

关键词 黑曲霉 单宁酶 常温常压等离子体诱变 发酵 酶学性质

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黑曲霉变种RM48 α-半乳糖苷酶的分离纯化及其酶学性质研究 被引量：10

5

作者 许尧兴 李艳丽 +2 位作者 柳永 许少春 姚晓红 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期147-152,共6页

经硫酸铵沉淀、疏水柱层析和分子筛层析,从黑曲霉变种RM48(Aspergillus niger v.Tiegh RM48)固体发酵后的浸提液中分离纯化了α-半乳糖苷酶.SDS-PAGE分析表明,此酶蛋白的分子量约为108kDa.酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度是60℃,... 经硫酸铵沉淀、疏水柱层析和分子筛层析,从黑曲霉变种RM48(Aspergillus niger v.Tiegh RM48)固体发酵后的浸提液中分离纯化了α-半乳糖苷酶.SDS-PAGE分析表明,此酶蛋白的分子量约为108kDa.酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度是60℃,耐热温度为40℃;最适反应pH为4.5,在pH3.0～6.0之间保持90%以上的酶活性;在实验的金属离子范围内,所有金属离子对黑曲霉变种RM48α-半乳糖苷酶均有抑制作用,其中Cu2+和Fe2+抑制作用最为显著,Li2+、Zn2+、Mn2+、K+、Na+、Ca2+、Mg2+和Co2+对酶活性有轻微的抑制作用.在pH4.0和60℃反应条件下此酶的Km为7.37mmol·L-1,Vmax为5618IU·mg-1·min-1.成熟酶蛋白N端序列为DEKAYSPCYY,与已报道的α-半乳糖苷酶蛋白无同源性. 展开更多

关键词 黑曲霉变种RM48 Α-半乳糖苷酶 分离纯化 酶学性质

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黑曲霉HU53菌株产酸性蛋白酶的条件和酶学性质 被引量：29

6

作者 袁康培 郑春丽 冯明光 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第8期46-49,共4页

本文报道了黑曲霉(Aspergillus niger)HU53菌株产酸性蛋白酶的固体发酵条件优化和酶学特性的研究结果。适合该菌株的最佳固体发酵培养基为麦麸38.8%,豆粕9.7%,NH4NO3 1.5%和水50.0%,最佳起始pH5.5。在28℃下发酵50h后酸性蛋白酶的比活... 本文报道了黑曲霉(Aspergillus niger)HU53菌株产酸性蛋白酶的固体发酵条件优化和酶学特性的研究结果。适合该菌株的最佳固体发酵培养基为麦麸38.8%,豆粕9.7%,NH4NO3 1.5%和水50.0%,最佳起始pH5.5。在28℃下发酵50h后酸性蛋白酶的比活力达到93.8 U/g,且在52h发酵期内基本不产孢子。该酸性蛋白酶的最佳反应酸碱度为pH3.0,最佳反应温度为50℃,对酪蛋白的Km为2.8016 mg/ml,在40℃下保温180min后相对酶活力为93.50%。2.0 mmol/L的Cu2+和Mn2+对该酸性蛋白酶具有极其显著的激活作用,相对酶活力分别为对照的171.9%和121.1%;而相同浓度的Fe3+和Ca2+则对其表现出强烈的抑制作用,相对酶活力分别仅为对照的62.5%和44.6%。 展开更多

关键词 黑曲霉HU53菌株 产酶条件 酸性蛋白酶 酶学性质 固体发酵

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黑曲霉木聚糖酶(xynZF-2)基因克隆、表达及酶学性质分析 被引量：9

7

作者 付冠华 刘振华 +1 位作者 王丹丹 周晨妍 《中国酿造》 CAS 2012年第11期78-82,共5页

利用RT-PCR技术从黑曲霉(Aspergillus niger)XZ-3S中成功克隆出木聚糖酶基因(xynZF-2)的cDNA序列(Genbank登录号为:JQ700382)。该基因核苷酸序列阅读框全长678bp,编码225个氨基酸,其中成熟肽为107个氨基酸。以重组质粒pUCm-T-xynZF-2为... 利用RT-PCR技术从黑曲霉(Aspergillus niger)XZ-3S中成功克隆出木聚糖酶基因(xynZF-2)的cDNA序列(Genbank登录号为:JQ700382)。该基因核苷酸序列阅读框全长678bp,编码225个氨基酸,其中成熟肽为107个氨基酸。以重组质粒pUCm-T-xynZF-2为模板,扩增得到编码xynZF-2成熟肽的cDNA片段(624bp)。将其与表达载体pET-28a连接,构建重组表达载体pET-28a-xynZF-2,并转化大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21(DE3),获得重组工程菌BL21/xynZF-2。经IPTG诱导表达,木聚糖酶的的比酶活最高可达42.33U/mg。重组表达的木聚糖酶最适反应温度为40℃,最适反应pH为5.0,在碱性条件下具有良好的稳定性。Fe3+对酶的激活作用最为明显。 展开更多

关键词 黑曲霉 木聚糖酶 克隆 表达 酶学性质

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黑曲霉B0201生料发酵产单宁酶的提取及酶学性质研究 被引量：5

8

作者 李秧针 邱树毅 +1 位作者 石瑞丽 吴鑫颖 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期99-101,104,共4页

对黑曲霉B0201利用五倍子为诱导物生料发酵产胞外单宁酶的提取及酶学性质进行了研究。结果表明:硫酸铵两步沉淀的饱和度为40%和90%;该酶的最适温度为40℃,最适pH为5·0,低于60℃时的热稳定性高,60℃以上迅速失活。Zn2+、Mg2+、吐温8... 对黑曲霉B0201利用五倍子为诱导物生料发酵产胞外单宁酶的提取及酶学性质进行了研究。结果表明:硫酸铵两步沉淀的饱和度为40%和90%;该酶的最适温度为40℃,最适pH为5·0,低于60℃时的热稳定性高,60℃以上迅速失活。Zn2+、Mg2+、吐温80、EDTA等对酶活力无明显影响,Fe3+、Cu2+、Fe2+、Ba2+、Mn2+、Ca2+、Al3+等对酶有抑制作用。以没食子酸丙酯(PG)为底物,单宁酶的米氏常数Km为0·514mmol/L,Vmax为71·8μmol/L·min。 展开更多

关键词 黑曲霉 单宁酶 酶学性质

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黑曲霉β-葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质研究 被引量：8

9

作者 郭金玲 陈程鹏 +4 位作者 周一郎 陈红吉 吕育财 任立伟 龚大春 《中国酿造》 CAS 北大核心 2021年第2期83-87,共5页

利用硫酸铵盐析、季氨乙基-琼脂糖凝胶FF(Q-Sepharose FF)离子交换层析、苯基-琼脂糖凝胶6 FF(Phenyl-Sepharose 6 FF)疏水层析和丁基-琼脂糖凝胶HP(Butyl-Sepharose HP)疏水层析对黑曲霉来源β-葡萄糖苷酶进行分离纯化,采用十二烷基硫... 利用硫酸铵盐析、季氨乙基-琼脂糖凝胶FF(Q-Sepharose FF)离子交换层析、苯基-琼脂糖凝胶6 FF(Phenyl-Sepharose 6 FF)疏水层析和丁基-琼脂糖凝胶HP(Butyl-Sepharose HP)疏水层析对黑曲霉来源β-葡萄糖苷酶进行分离纯化,采用十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定其分子质量,并对其酶学性质进行研究。结果表明,经分离纯化后得到分子质量约为116 k Da的β-葡萄糖苷酶,纯化倍数达到50.39倍,回收率为4.65%,比酶活为103.80 U/mg,该β-葡萄糖苷酶的最适反应温度为60℃,最适反应pH值为5.0,在温度30~50℃,pH 2.0~8.0之间具有较好的稳定性。 展开更多

关键词 黑曲霉 Β-葡萄糖苷酶 分离纯化 酶学性质

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黑曲霉M_1菌株木聚糖酶复合酶的固态发酵条件及其酶学性质研究 被引量：8

10

作者 陈红歌 郭夏丽 +1 位作者 窦会娟 贾新成 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期33-36,共4页

以玉米芯和麸皮 ( 7∶3 )为碳源 ,(NH4) 2 SO4( 2 % )为氮源 ,3 0℃培养 72h ,发酵曲用蒸馏水3 0℃浸提 1h ,得到 β 1,4 木聚糖酶活力高 ,β 木糖苷酶活力低的粗酶液。β 1,4 木聚糖酶和 β 木糖苷酶的最适作用温度分别为 5 0℃和 60... 以玉米芯和麸皮 ( 7∶3 )为碳源 ,(NH4) 2 SO4( 2 % )为氮源 ,3 0℃培养 72h ,发酵曲用蒸馏水3 0℃浸提 1h ,得到 β 1,4 木聚糖酶活力高 ,β 木糖苷酶活力低的粗酶液。β 1,4 木聚糖酶和 β 木糖苷酶的最适作用温度分别为 5 0℃和 60℃ ,最适作用pH分别为 4 8和 4 0 ,β 1,4 木聚糖酶在pH5 0～ 10 6范围内稳定 ,β 木糖苷酶在 pH 3 0～ 3 0范围内稳定。β 木糖苷酶的热稳定性比 β 1,4 展开更多

关键词 黑曲霉M1菌株 木聚糖酶复合酶 固态发酵 酶学性质 β-1 4-木聚糖酶 酶活力 Β-木糖苷酶

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黑曲霉产β-呋喃果糖苷酶酶学性质研究 被引量：11

11

作者 马歌丽 张学军 靳丽 《中国酿造》 CAS 北大核心 2009年第6期22-24,共3页

对来源于黑曲霉的β-D-呋喃果糖苷酶的酶学特性进行了研究。结果表明,β-D-呋喃果糖苷酶的最适pH值为5.0,最适温度为50℃。在40℃～60℃、pH值5.0～7.0其具有较好的稳定性。金属离子对β-呋喃果糖苷酶活性有影响。Mn2+和Ca2+能明显增强... 对来源于黑曲霉的β-D-呋喃果糖苷酶的酶学特性进行了研究。结果表明,β-D-呋喃果糖苷酶的最适pH值为5.0,最适温度为50℃。在40℃～60℃、pH值5.0～7.0其具有较好的稳定性。金属离子对β-呋喃果糖苷酶活性有影响。Mn2+和Ca2+能明显增强酶活,而Cu2+和Ag+能抑制酶活。 展开更多

关键词 黑曲霉 Β-呋喃果糖苷酶 酶学性质

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黑曲霉496-1菌株植酸酶的分离纯化及酶学性质 被引量：6

12

作者 杨平平 王燕 +2 位作者 史宝军 邵蔚蓝 陶文沂 《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》 CSCD 北大核心 2003年第5期34-37,52,共5页

黑曲霉(A.niger)496 1菌株所产胞外植酸酶,经透析浓缩、DEAE cellulose离子交换层析及SephadexG 75,Sephacryl100凝胶过滤,获得了2个植酸酶,其相对分子质量分别为64200及41100.该2个植酸酶的最适pH分别为6.0和3.0,最适温度分别为55℃和4... 黑曲霉(A.niger)496 1菌株所产胞外植酸酶,经透析浓缩、DEAE cellulose离子交换层析及SephadexG 75,Sephacryl100凝胶过滤,获得了2个植酸酶,其相对分子质量分别为64200及41100.该2个植酸酶的最适pH分别为6.0和3.0,最适温度分别为55℃和40℃.初步确定一个是中性植酸酶,另一个为酸性植酸酶. 展开更多

关键词 黑曲霉496-1菌株 植酸酶 分离 纯化 酶学性质

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黑曲霉N25植酸酶的分离纯化及酶学性质研究 被引量：10

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作者 陈惠 王红宁 谢晶 《四川农业大学学报》 CSCD 2001年第1期77-79,共3页

黑曲霉N2 5 (AspergillusNiger)菌株所产胞外植酸酶 ,经硫酸铵分级沉淀 ,纯化测得此植酸酶分子量为 6 9 15KD ;最适 pH 4 6 ;最适温度为 6 0℃。聚乙二醇 10 0 0 0、Fe2 +、低磷对酶有激活作用 ,而Ca2 +,Mg2 +,Mn2 +。

关键词 植酸酶 纯化 分离 饲料添加剂 酶学性质 黑曲霉N25菌株

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木聚糖酶高产黑曲霉的选育及其酶学性质研究 被引量：9

14

作者 王聪 张光杰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期227-230,250,共5页

木聚糖酶是一种可以将木聚糖水解为木二糖和木二糖以上的低聚木糖,以及少量木糖和阿拉伯糖的组酶,在饲料、食品和造纸等行业具有广阔的应用前景。研究了紫外选育得到的一株木聚糖酶活力比较高的黑曲霉突变菌株Aspergil-lus niger N86的... 木聚糖酶是一种可以将木聚糖水解为木二糖和木二糖以上的低聚木糖,以及少量木糖和阿拉伯糖的组酶,在饲料、食品和造纸等行业具有广阔的应用前景。研究了紫外选育得到的一株木聚糖酶活力比较高的黑曲霉突变菌株Aspergil-lus niger N86的最佳产酶条件及其酶学性质。 展开更多

关键词 黑曲霉 木聚糖酶 紫外诱变 发酵条件 酶学性质

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同步辐射对黑曲霉β-葡萄糖苷酶产生条件及酶学性质的影响 被引量：3

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作者 潘利华 罗建平 罗水忠 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期245-249,共5页

本实验对出发菌黑曲霉M85和经软X射线Nk同步辐射所得突变株(产β-葡萄糖苷酶)的营养条件、培养条件和产酶动力学进行了比较,并研究了两菌株β-葡萄糖苷酶的酶学性质。实验结果表明,与出发菌相比,突变株在营养需求、培养条件、产酶动力... 本实验对出发菌黑曲霉M85和经软X射线Nk同步辐射所得突变株(产β-葡萄糖苷酶)的营养条件、培养条件和产酶动力学进行了比较,并研究了两菌株β-葡萄糖苷酶的酶学性质。实验结果表明,与出发菌相比,突变株在营养需求、培养条件、产酶动力学和产物的酶学性质都有所改变。突变株的氮源谱更宽,对KH2PO4的需求从0.2%降为0.1%;培养条件实验表明突变株需氧量增加;突变株发酵周期缩短了16h,产酶能力提高了约80%;突变株β-葡萄糖苷酶的最适反应温度从60℃降为50℃,最适反应pH由4升为5。 展开更多

关键词 黑曲霉 Β-葡萄糖苷酶 软X射线 酶学性质

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黑曲霉酸性蛋白酶酶学性质的研究 被引量：4

16

作者 赵彩艳 程茂基 +2 位作者 蔡克周 陈丽娟 汤海鸥 《饲料博览》 2006年第3期5-8,共4页

对黑曲霉菌株ANS1产酸性蛋白酶基本酶学性质的研究表明:酸性蛋白酶适宜pH在2.5～4.0之间,在pH为3.5时,相对酶活最高;适宜温度在40～50℃之间,在45℃时,相对酶活最高;酸性蛋白酶有着较好的热稳定性,曲酶粉在80℃保温至5min保留有51.4%的... 对黑曲霉菌株ANS1产酸性蛋白酶基本酶学性质的研究表明:酸性蛋白酶适宜pH在2.5～4.0之间,在pH为3.5时,相对酶活最高;适宜温度在40～50℃之间,在45℃时,相对酶活最高;酸性蛋白酶有着较好的热稳定性,曲酶粉在80℃保温至5min保留有51.4%的酶活,液态酶在80℃恒温水浴中保温1min保留有54.6%的酶活力,曲酶粉较液态酶有着更好的抗热性;金属离子对酸性蛋白酶活力有一定的影响,在2.0mmol·L-1的浓度下,Mn2+和Cu2+酸性蛋白酶有较强的激活作用,Fe3+对该酶表现出明显的抑制作用。研究结果表明,黑曲霉菌株ANS1产酸性蛋白酶可以作为生物饲料添加剂。 展开更多

关键词 黑曲霉 酸性蛋白酶 酶学性质 酶活力 抗热性

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黑曲霉产菊粉酶的条件及其酶学性质的研究 被引量：2

17

作者 冷云伟 赵玉斌 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2008年第6期29-31,50,共4页

对黑曲霉SL-09在摇瓶条件下产菊粉酶的条件及其酶学性质进行了研究。结果发现,接种量和装瓶量对产酶影响不大,而pH值影响较为显著,最佳产酶pH值为6.0;在对催化条件的研究中发现最佳反应温度、底物浓度和pH值分别为60℃、60 g/L和6.0;锰... 对黑曲霉SL-09在摇瓶条件下产菊粉酶的条件及其酶学性质进行了研究。结果发现,接种量和装瓶量对产酶影响不大,而pH值影响较为显著,最佳产酶pH值为6.0;在对催化条件的研究中发现最佳反应温度、底物浓度和pH值分别为60℃、60 g/L和6.0;锰离子对酶活有较强的激活作用,最适浓度为1.5×10-3mol/L;同时发现该酶存在着严重的产物抑制现象,当果糖浓度大于1%时,菊粉酶活力将大幅度下降。 展开更多

关键词 黑曲霉 菊粉酶 酶学性质

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黄曲霉和黑曲霉发酵麻疯树废弃饼粕产蛋白酶的酶学性质初探 被引量：1

18

作者 乐意 吴远根 邱树毅 《山地农业生物学报》 2009年第6期513-517,共5页

通过对黄曲霉和黑曲霉发酵麻疯树废弃饼粕所产蛋白酶的酶学性质进行初步研究,确定黄曲霉所产蛋白酶最适催化温度为45℃;最适pH值为6.0;Vmax=3 333.33μg.min-1,Km=31.25 mg.mL-1;Fe3+能对其活力产生强烈的抑制作用;适量有机溶剂对蛋白... 通过对黄曲霉和黑曲霉发酵麻疯树废弃饼粕所产蛋白酶的酶学性质进行初步研究,确定黄曲霉所产蛋白酶最适催化温度为45℃;最适pH值为6.0;Vmax=3 333.33μg.min-1,Km=31.25 mg.mL-1;Fe3+能对其活力产生强烈的抑制作用;适量有机溶剂对蛋白酶活力有一定促进作用。黑曲霉所产蛋白酶最适催化温度为50℃;最适pH值为4.0;Vmax=18.05μg.min-1,Km=2.23 mg.mL-1;有机溶剂对蛋白酶活力有一定促进作用;Na+和Hg2+对蛋白酶活力则有十分强烈的抑制作用。 展开更多

关键词 黄曲霉 黑曲霉 麻疯树饼粕 蛋白酶 酶学性质

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黑曲霉5143脂肪酶离子注入诱变及酶学性质的研究

19

作者 王允绍 衣杰荣 +2 位作者 张兆斌 杜毅 李晓晖 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期158-161,共4页

以产脂肪酶菌株黑曲霉Aspergillus niger51-43为出发菌株,经氮离子注入技术对其进行诱变,筛选获得酶活力有较大提高且传代稳定的正突变菌株L7,其脂肪酶活力达29.17U/mL,较原初酶活力19.28U/mL提高了151.3%。在此基础上,对该酶的酶学性... 以产脂肪酶菌株黑曲霉Aspergillus niger51-43为出发菌株,经氮离子注入技术对其进行诱变,筛选获得酶活力有较大提高且传代稳定的正突变菌株L7,其脂肪酶活力达29.17U/mL,较原初酶活力19.28U/mL提高了151.3%。在此基础上,对该酶的酶学性质进行了研究。结果表明,高产突变株L7所产脂肪酶的最适作用温度为30℃,最适作用pH8.0,在50℃和pH6.0～9.0之间有很好的稳定性。Ca2+、Na+、Mg2+对该酶有一定的激活作用,而Cu2+、Mn2+、Fe2+、Co2+、Zn2+则抑制该酶的活性。 展开更多

关键词 脂肪酶 黑曲霉 氮离子注入 诱变 酶学性质

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黑曲霉脂肪酶Lip A的异源表达与酶学性质分析 被引量：4

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作者 王雅琪 凡林林 +4 位作者 李文瑶 李弘轩 杜丽平 王洪 马立娟 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期25-31,共7页

脂肪酶在油脂分解和脂质合成方面具有广泛应用,是一种很有前途的生物催化剂。该研究对来源于黑曲霉的脂肪酶Lip A进行了异源表达及催化特性研究。结果表明,该重组脂肪酶的最适温度为50℃,最适pH为8.0,并且在40~60℃和pH 5.0~8.0有较好... 脂肪酶在油脂分解和脂质合成方面具有广泛应用,是一种很有前途的生物催化剂。该研究对来源于黑曲霉的脂肪酶Lip A进行了异源表达及催化特性研究。结果表明,该重组脂肪酶的最适温度为50℃,最适pH为8.0,并且在40~60℃和pH 5.0~8.0有较好的稳定性。该酶对有机试剂有较好的耐受性,金属离子Ca^(2+)和Mg^(2+)对脂肪酶水解活性有促进作用,Fe^(3+)、Zn^(2+)和Cu^(2+)严重抑制该酶活性。反应动力学参数表明,对硝基苯酚乙酸酯是脂肪酶Lip A的最适底物,其反应Km为(0.228±0.05)mmol/L,催化常数Kcat为(0.023±0.001)s-1。生物信息学分析表明,脂肪酶Lip A是abH23同源家族Rhizomucor mihei脂肪酶中的一员。黑曲霉脂肪酶Lip A具有催化乳酸和乙醇生成乳酸乙酯特性,为其在酿造领域的应用奠定了基础。 展开更多

关键词 黑曲霉 脂肪酶 酶学性质 酯化特性

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