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玉米穗腐病样品中黄色镰孢的分离鉴定及rDNA-ITS序列分析
被引量：
10
1
作者
郭成
魏宏玉
+3 位作者
郭满库
何苏琴
郭建国
王晓鸣
《草业学报》
CSCD
北大核心
2013年第2期171-177,共7页
为了明确甘肃玉米穗腐病的病原菌,于2009年9月在甘肃省四大生态区采集玉米穗腐病样品,以组织分离法进行病原物的分离培养,对分离得到的镰孢菌菌落进行纯化和单孢分离后,以形态学为基础,参照Leisle分类系统进行鉴定。结果表明,分离到271...
为了明确甘肃玉米穗腐病的病原菌,于2009年9月在甘肃省四大生态区采集玉米穗腐病样品,以组织分离法进行病原物的分离培养,对分离得到的镰孢菌菌落进行纯化和单孢分离后,以形态学为基础,参照Leisle分类系统进行鉴定。结果表明,分离到271株镰孢菌菌株中有105株经形态学鉴定为黄色镰孢,占分离镰孢菌的38.7%。分析发现黄色镰孢种群数量随采样区而异,陇东和陇南地区采集的样品中分离频率分别为52.0%,55.4%,本研究充分证明了黄色镰孢是甘肃省陇东和陇南地区玉米穗腐病的优势病原菌。按照柯赫氏法则用混合菌株接种法对沈单16和金穗96832进行致病性测定,证实了黄色镰孢对玉米果穗的致病性。随机选取3株黄色镰孢菌株进行rDNA-ITS基因序列分析,将PCR产物回收测序后在GenBank上比对,菌株3-1-1与GenBank中登记的黄色镰孢菌株K1004和K216、6-4-1和21-2-1与黄色镰孢菌株CBS122.73亲缘关系最近,同源性达99%。利用DNAStar软件绘制其系统发育树状图,结果表明,菌株3-1-1与K1004和K216、菌株6-4-1和21-2-1与CBS122.73位于系统发育树的同一分支,聚为一类,与形态学的鉴定结果一致。
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关键词
玉米穗腐病
黄色镰孢
RDNA-ITS
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职称材料
双色实时荧光聚合酶链式反应法检测产玉米赤霉烯酮毒素的黄色镰孢菌
2
作者
李鑫
杨爱馥
+4 位作者
陈亮
蒋斌
郝风涛
董伟峰
郑秋月
《食品安全质量检测学报》
CAS
北大核心
2022年第5期1488-1494,共7页
目的建立双色实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法同时检测黄色镰孢菌(Fusarium culmorum)及其所产玉米赤霉烯酮毒素合成基因的方法。方法依据EF1α基因和PKS基因,优化建立双色实时荧光PCR反应体系和扩增条件;建...
目的建立双色实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法同时检测黄色镰孢菌(Fusarium culmorum)及其所产玉米赤霉烯酮毒素合成基因的方法。方法依据EF1α基因和PKS基因,优化建立双色实时荧光PCR反应体系和扩增条件;建立粮食霉变模型,检测霉变粮食中产毒真菌,验证方法的特异性、灵敏度和重复性。结果应用本研究设计的引物和探针,仅产玉米赤霉烯酮毒素的黄色镰孢菌EF1α和PKS基因出现特异性扩增,其余真菌扩增结果均为阴性;检出限达3.5×10^(2)CFU/mL,重复性良好;且采用此方法对粮食霉变模型中选取的样品进行检测,可检出产玉米赤霉烯酮的黄色镰孢菌。结论该方法可准确鉴定霉变粮食中的产玉米赤霉烯酮毒素的黄色镰孢菌,实现在真菌毒素未产生前或者产生早期,对粮食受真菌及真菌毒素污染的情况进行早期监控。
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关键词
黄色镰孢
菌
玉米赤霉烯酮毒素
EF1α基因
PKS基因
双色实时荧光聚合酶链式反应法
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职称材料
题名
玉米穗腐病样品中黄色镰孢的分离鉴定及rDNA-ITS序列分析
被引量：
10
1
作者
郭成
魏宏玉
郭满库
何苏琴
郭建国
王晓鸣
机构
甘肃省农业科学院植物保护研究所
中国农业科学院作物科学研究所
国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程
出处
《草业学报》
CSCD
北大核心
2013年第2期171-177,共7页
基金
农业部作物种质资源保护项目(NB09-2130135-1-15-15)资助
文摘
为了明确甘肃玉米穗腐病的病原菌,于2009年9月在甘肃省四大生态区采集玉米穗腐病样品,以组织分离法进行病原物的分离培养,对分离得到的镰孢菌菌落进行纯化和单孢分离后,以形态学为基础,参照Leisle分类系统进行鉴定。结果表明,分离到271株镰孢菌菌株中有105株经形态学鉴定为黄色镰孢,占分离镰孢菌的38.7%。分析发现黄色镰孢种群数量随采样区而异,陇东和陇南地区采集的样品中分离频率分别为52.0%,55.4%,本研究充分证明了黄色镰孢是甘肃省陇东和陇南地区玉米穗腐病的优势病原菌。按照柯赫氏法则用混合菌株接种法对沈单16和金穗96832进行致病性测定,证实了黄色镰孢对玉米果穗的致病性。随机选取3株黄色镰孢菌株进行rDNA-ITS基因序列分析,将PCR产物回收测序后在GenBank上比对,菌株3-1-1与GenBank中登记的黄色镰孢菌株K1004和K216、6-4-1和21-2-1与黄色镰孢菌株CBS122.73亲缘关系最近,同源性达99%。利用DNAStar软件绘制其系统发育树状图,结果表明,菌株3-1-1与K1004和K216、菌株6-4-1和21-2-1与CBS122.73位于系统发育树的同一分支,聚为一类,与形态学的鉴定结果一致。
关键词
玉米穗腐病
黄色镰孢
RDNA-ITS
Keywords
maize ear rot
Fusarium culmorum
rDNA-ITS
分类号
S435.13 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
双色实时荧光聚合酶链式反应法检测产玉米赤霉烯酮毒素的黄色镰孢菌
2
作者
李鑫
杨爱馥
陈亮
蒋斌
郝风涛
董伟峰
郑秋月
机构
大连海关技术中心
河南工业大学生物工程学院
大连友谊粮食储备库有限公司
大连民族大学生命科学学院
出处
《食品安全质量检测学报》
CAS
北大核心
2022年第5期1488-1494,共7页
基金
科技部“十三五”国家重点研发计划项目(2017YFC1600803-3)
海关总署科研项目(2021HK189)
大连海关科研项目(2021DK10)。
文摘
目的建立双色实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法同时检测黄色镰孢菌(Fusarium culmorum)及其所产玉米赤霉烯酮毒素合成基因的方法。方法依据EF1α基因和PKS基因,优化建立双色实时荧光PCR反应体系和扩增条件;建立粮食霉变模型,检测霉变粮食中产毒真菌,验证方法的特异性、灵敏度和重复性。结果应用本研究设计的引物和探针,仅产玉米赤霉烯酮毒素的黄色镰孢菌EF1α和PKS基因出现特异性扩增,其余真菌扩增结果均为阴性;检出限达3.5×10^(2)CFU/mL,重复性良好;且采用此方法对粮食霉变模型中选取的样品进行检测,可检出产玉米赤霉烯酮的黄色镰孢菌。结论该方法可准确鉴定霉变粮食中的产玉米赤霉烯酮毒素的黄色镰孢菌,实现在真菌毒素未产生前或者产生早期,对粮食受真菌及真菌毒素污染的情况进行早期监控。
关键词
黄色镰孢
菌
玉米赤霉烯酮毒素
EF1α基因
PKS基因
双色实时荧光聚合酶链式反应法
Keywords
Fusarium culmorum
zearalenone toxin
EF1αgene
PKS gene
dual-color real-time fluorescence polymerase chain reaction
分类号
TS210.7 [轻工技术与工程—粮食、油脂及植物蛋白工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
玉米穗腐病样品中黄色镰孢的分离鉴定及rDNA-ITS序列分析
郭成
魏宏玉
郭满库
何苏琴
郭建国
王晓鸣
《草业学报》
CSCD
北大核心
2013
10
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
双色实时荧光聚合酶链式反应法检测产玉米赤霉烯酮毒素的黄色镰孢菌
李鑫
杨爱馥
陈亮
蒋斌
郝风涛
董伟峰
郑秋月
《食品安全质量检测学报》
CAS
北大核心
2022
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