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黄海希瓦氏菌单抗介导间接ELISA快速检测技术的建立
被引量:
9
1
作者
景宏丽
李强
+1 位作者
吴秋仙
李华
《大连水产学院学报》
CSCD
北大核心
2010年第6期547-550,共4页
应用农业部海洋水产增养殖学重点实验室制备的特异性抗黄海希瓦氏菌Shewanella smarisflavi AP629单克隆抗体3D9作为一抗,以碱性磷酸酶(AP)标记的羊抗鼠Ig作为酶标二抗,建立了仿刺参Apostichopusjaponicus"化皮病"病原菌——...
应用农业部海洋水产增养殖学重点实验室制备的特异性抗黄海希瓦氏菌Shewanella smarisflavi AP629单克隆抗体3D9作为一抗,以碱性磷酸酶(AP)标记的羊抗鼠Ig作为酶标二抗,建立了仿刺参Apostichopusjaponicus"化皮病"病原菌——黄海希瓦氏菌AP629的间接ELISA快速检测方法,并进行了条件优化。结果表明:抗原的最佳包被浓度为107个/mL,一抗工作的最佳稀释度为1∶32,病原菌的检测灵敏度为5×105个/mL。该方法特异性强,与希瓦氏菌属其它种类、弧菌和气单胞菌等均无交叉反应。该方法的建立有助于快速准确地诊断由黄海希瓦氏菌AP629引起的仿刺参疾病。
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关键词
仿刺参
黄海希瓦氏菌
单克隆抗体
间接ELISA
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职称材料
黄海希瓦氏菌多克隆抗体部分特性的分析
被引量:
2
2
作者
李强
齐楠
+2 位作者
杨丽文
李华
王轶南
《大连海洋大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期376-380,共5页
采用免疫学方法,以仿刺参Apostichopus japonicus"化皮病"病原菌——黄海希瓦氏菌Shewanella marisflavi AP629福尔马林灭活疫苗作为免疫原,对新西兰大白兔进行免疫,制备了高效价的多克隆抗体。通过间接酶联免疫、间接免疫荧...
采用免疫学方法,以仿刺参Apostichopus japonicus"化皮病"病原菌——黄海希瓦氏菌Shewanella marisflavi AP629福尔马林灭活疫苗作为免疫原,对新西兰大白兔进行免疫,制备了高效价的多克隆抗体。通过间接酶联免疫、间接免疫荧光和免疫印迹等技术对多克隆抗体的部分特性进行了分析。结果表明:获得的多克隆抗体的效价为1∶32768;多抗与黄海希瓦氏菌标准菌株存在很强的阳性反应,与弧菌和气单胞菌、链球菌和大肠杆菌交叉反应很弱或不存在交叉反应;多抗不仅与菌体本身反应,与菌株表面的分泌物也发生特异性结合。免疫印迹结果显示,多克隆抗体与黄海希瓦氏菌AP629结合的抗原决定簇主要蛋白带有6条,相对分子质量分别为131 000、128 000、113 000、62 000、38 000和33 000,其中38 000和33 000蛋白条带的抗原性最强;与胞外产物结合的抗原决定簇清楚的蛋白条带主要有3条,相对分子质量分别为62 000、38 000和33 000,其中62 000蛋白条带的信号最强。
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关键词
仿刺参
黄海希瓦氏菌
多克隆抗体
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职称材料
黄海希瓦氏菌胞外产物特性研究
被引量:
3
3
作者
吴秋仙
刘学伟
《水产养殖》
CAS
2020年第5期33-37,共5页
为研究黄海希瓦氏菌(S.smarflavi)AP629胞外产物(ECPs)的致病性,用平板玻璃纸法提取胞外产物。结果显示,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)发现ECPs蛋白条带主要在114 kDa、66 kDa、39kDa、36 kDa、79 kDa;ECPs具有酪蛋白酶、淀粉酶、...
为研究黄海希瓦氏菌(S.smarflavi)AP629胞外产物(ECPs)的致病性,用平板玻璃纸法提取胞外产物。结果显示,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)发现ECPs蛋白条带主要在114 kDa、66 kDa、39kDa、36 kDa、79 kDa;ECPs具有酪蛋白酶、淀粉酶、卵磷脂蛋白酶和脂肪酶活性,无明胶酶活性;一些金属离子和化学试剂对菌株AP629ECPs的酶活有影响,EDTA、PMSF、SDS、MnCl2作用浓度分别为10、5、5、5 mM时,ECPs酶活受到不同程度抑制;Ca2+和Mg2+则提高ECPs的酶活,可分别提高3%~19%和12%~28%的酶的活性。菌株AP629的胞外产物人工感染小白鼠和仿刺参试验结果表明,黄海希瓦氏菌AP629的胞外产物不显示致病性。该文为揭示黄海希瓦氏菌AP629发病机理奠定了基础。
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关键词
黄海希瓦氏菌
胞外产物(ECP)
仿刺参
致病性
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职称材料
复合益生菌对刺参非特异性免疫和抗病力的影响
被引量:
1
4
作者
憨素连
王福强
+1 位作者
王晶
刘晨敏
《安徽农业科学》
CAS
2015年第36期94-96,101,共4页
[目的]研究复合益生菌粉对刺参非特异性免疫和抗病力的影响。[方法]选择体重相近的450头刺参并随机分为5组,分别在其基础日粮中添加含有0(A组)、0.2%(B组)、0.4%(C组)、0.6%(D组)、0.8%(E组)的复合益生菌粉(106CFU/g),进行饲喂试验,研...
[目的]研究复合益生菌粉对刺参非特异性免疫和抗病力的影响。[方法]选择体重相近的450头刺参并随机分为5组,分别在其基础日粮中添加含有0(A组)、0.2%(B组)、0.4%(C组)、0.6%(D组)、0.8%(E组)的复合益生菌粉(106CFU/g),进行饲喂试验,研究复合益生菌粉对刺参非特异性免疫和抗病力的影响。[结果]复合益生菌对刺参碱性磷酸酶(AKP)和超氧化物歧化酶(SOD)活性无显著影响;与其他试验组和对照组相比,0.6%的复合益生菌提高了刺参的酸性磷酸酶(ACP)活性,0.4%、0.6%和0.8%的复合益生菌显著提高了刺参过氧化氢酶(CAT)活性(P<0.05),而0.6%和0.8%的复合益生菌则显著提高了刺参溶菌酶(LSZ)活性(P<0.05)。在攻毒6 d和攻毒10 d后,各试验组的AKP、LSZ、SOD活性均与对照组没有显著差异。攻毒6 d后,E组ACP活性显著低于对照组(P<0.05)。攻毒10 d后,C、D、E组ACP活性均极显著低于对照组(P<0.01)。[结论]在基础饲料中添加复合益生菌能增强刺参的非特性免疫能力,其添加量以0.6%为。
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关键词
复合益生
菌
刺参
生长
非特异性免疫
黄海希瓦氏菌
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职称材料
题名
黄海希瓦氏菌单抗介导间接ELISA快速检测技术的建立
被引量:
9
1
作者
景宏丽
李强
吴秋仙
李华
机构
大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点实验室
出处
《大连水产学院学报》
CSCD
北大核心
2010年第6期547-550,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30800853)
国家"十一五"科技支撑项目(2006BAD09A01)
+1 种基金
国家"908"项目(908-01-ZH3)
辽宁省海洋与渔业厅项目(201005)
文摘
应用农业部海洋水产增养殖学重点实验室制备的特异性抗黄海希瓦氏菌Shewanella smarisflavi AP629单克隆抗体3D9作为一抗,以碱性磷酸酶(AP)标记的羊抗鼠Ig作为酶标二抗,建立了仿刺参Apostichopusjaponicus"化皮病"病原菌——黄海希瓦氏菌AP629的间接ELISA快速检测方法,并进行了条件优化。结果表明:抗原的最佳包被浓度为107个/mL,一抗工作的最佳稀释度为1∶32,病原菌的检测灵敏度为5×105个/mL。该方法特异性强,与希瓦氏菌属其它种类、弧菌和气单胞菌等均无交叉反应。该方法的建立有助于快速准确地诊断由黄海希瓦氏菌AP629引起的仿刺参疾病。
关键词
仿刺参
黄海希瓦氏菌
单克隆抗体
间接ELISA
Keywords
Apostichopus japonicus
Shewanella smarisflavi
monoclonal antibody
indirect ELISA
分类号
S947 [农业科学—水产养殖]
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职称材料
题名
黄海希瓦氏菌多克隆抗体部分特性的分析
被引量:
2
2
作者
李强
齐楠
杨丽文
李华
王轶南
机构
大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室
出处
《大连海洋大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期376-380,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30800853)
国家"十一五"科技支撑计划项目(2006BAD09A01)
+1 种基金
国家专项(908-01-ZH3)
辽宁省海洋与渔业厅项目(201005)
文摘
采用免疫学方法,以仿刺参Apostichopus japonicus"化皮病"病原菌——黄海希瓦氏菌Shewanella marisflavi AP629福尔马林灭活疫苗作为免疫原,对新西兰大白兔进行免疫,制备了高效价的多克隆抗体。通过间接酶联免疫、间接免疫荧光和免疫印迹等技术对多克隆抗体的部分特性进行了分析。结果表明:获得的多克隆抗体的效价为1∶32768;多抗与黄海希瓦氏菌标准菌株存在很强的阳性反应,与弧菌和气单胞菌、链球菌和大肠杆菌交叉反应很弱或不存在交叉反应;多抗不仅与菌体本身反应,与菌株表面的分泌物也发生特异性结合。免疫印迹结果显示,多克隆抗体与黄海希瓦氏菌AP629结合的抗原决定簇主要蛋白带有6条,相对分子质量分别为131 000、128 000、113 000、62 000、38 000和33 000,其中38 000和33 000蛋白条带的抗原性最强;与胞外产物结合的抗原决定簇清楚的蛋白条带主要有3条,相对分子质量分别为62 000、38 000和33 000,其中62 000蛋白条带的信号最强。
关键词
仿刺参
黄海希瓦氏菌
多克隆抗体
Keywords
Apostichopus japonicus
Shewartella marisflavi
polyclonal antibody
分类号
S917.1 [农业科学—水产科学]
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职称材料
题名
黄海希瓦氏菌胞外产物特性研究
被引量:
3
3
作者
吴秋仙
刘学伟
机构
盐城市亭湖区水产技术推广站
江苏长寿集团南山饲料有限公司
出处
《水产养殖》
CAS
2020年第5期33-37,共5页
文摘
为研究黄海希瓦氏菌(S.smarflavi)AP629胞外产物(ECPs)的致病性,用平板玻璃纸法提取胞外产物。结果显示,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)发现ECPs蛋白条带主要在114 kDa、66 kDa、39kDa、36 kDa、79 kDa;ECPs具有酪蛋白酶、淀粉酶、卵磷脂蛋白酶和脂肪酶活性,无明胶酶活性;一些金属离子和化学试剂对菌株AP629ECPs的酶活有影响,EDTA、PMSF、SDS、MnCl2作用浓度分别为10、5、5、5 mM时,ECPs酶活受到不同程度抑制;Ca2+和Mg2+则提高ECPs的酶活,可分别提高3%~19%和12%~28%的酶的活性。菌株AP629的胞外产物人工感染小白鼠和仿刺参试验结果表明,黄海希瓦氏菌AP629的胞外产物不显示致病性。该文为揭示黄海希瓦氏菌AP629发病机理奠定了基础。
关键词
黄海希瓦氏菌
胞外产物(ECP)
仿刺参
致病性
Keywords
Shewanella smarflavi
ECPs
Apostichopus japonicus
pathogenicity
分类号
S917 [农业科学—水产科学]
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职称材料
题名
复合益生菌对刺参非特异性免疫和抗病力的影响
被引量:
1
4
作者
憨素连
王福强
王晶
刘晨敏
机构
大连海洋大学动物营养与饲料实验室
出处
《安徽农业科学》
CAS
2015年第36期94-96,101,共4页
基金
辽宁省科技厅计划项目(2008203002)
文摘
[目的]研究复合益生菌粉对刺参非特异性免疫和抗病力的影响。[方法]选择体重相近的450头刺参并随机分为5组,分别在其基础日粮中添加含有0(A组)、0.2%(B组)、0.4%(C组)、0.6%(D组)、0.8%(E组)的复合益生菌粉(106CFU/g),进行饲喂试验,研究复合益生菌粉对刺参非特异性免疫和抗病力的影响。[结果]复合益生菌对刺参碱性磷酸酶(AKP)和超氧化物歧化酶(SOD)活性无显著影响;与其他试验组和对照组相比,0.6%的复合益生菌提高了刺参的酸性磷酸酶(ACP)活性,0.4%、0.6%和0.8%的复合益生菌显著提高了刺参过氧化氢酶(CAT)活性(P<0.05),而0.6%和0.8%的复合益生菌则显著提高了刺参溶菌酶(LSZ)活性(P<0.05)。在攻毒6 d和攻毒10 d后,各试验组的AKP、LSZ、SOD活性均与对照组没有显著差异。攻毒6 d后,E组ACP活性显著低于对照组(P<0.05)。攻毒10 d后,C、D、E组ACP活性均极显著低于对照组(P<0.01)。[结论]在基础饲料中添加复合益生菌能增强刺参的非特性免疫能力,其添加量以0.6%为。
关键词
复合益生
菌
刺参
生长
非特异性免疫
黄海希瓦氏菌
Keywords
Compound probiotics
Sea cucumber
Growth
Nonspecific immunity
Shewanella smarisflavi
分类号
S828.5 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
黄海希瓦氏菌单抗介导间接ELISA快速检测技术的建立
景宏丽
李强
吴秋仙
李华
《大连水产学院学报》
CSCD
北大核心
2010
9
在线阅读
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职称材料
2
黄海希瓦氏菌多克隆抗体部分特性的分析
李强
齐楠
杨丽文
李华
王轶南
《大连海洋大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
黄海希瓦氏菌胞外产物特性研究
吴秋仙
刘学伟
《水产养殖》
CAS
2020
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
复合益生菌对刺参非特异性免疫和抗病力的影响
憨素连
王福强
王晶
刘晨敏
《安徽农业科学》
CAS
2015
1
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职称材料
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