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题名一种新型黄原胶裂解酶的异源表达及酶学性质表征
被引量：2
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作者
杜元元
郭小宇
李鹤
王亚芳
杨帆
李宪臻
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机构
大连工业大学生物工程学院
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出处
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期175-181,共7页
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基金
国家自然科学基金项目(31371742
31601458)
+1 种基金
辽宁省高等学校杰出青年学者成长计划(LJQ2015009)
大连市科技计划(2013B11NC078)
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文摘
黄原胶裂解酶是一种黄原胶修饰酶,对黄原胶的改性及新型黄原胶寡糖的制备具有十分重要的意义。本实验从一株性能优良的黄原胶降解菌Microbacterium sp.XT11中首次克隆出黄原胶降解酶编码基因xly。该基因编码理论分子量为122027 u的蛋白质,其N端含有一条35 aa的分泌信号肽,C端含有一段392 aa的碳水化合物结合域CBM。随后,在去除分泌信号肽及CBM的截短酶的N端融合了谷胱甘肽巯基转移酶亲和纯化标签(GST),所形成的融合蛋白XLY-GST能够在大肠杆菌BL21(DE3)中高水平可溶表达。纯化的XLY-GST表现出与天然黄原胶裂解酶一致的酶学性质,其最适作用温度为40℃,最适p H为6.0,对碱性环境具有一定的耐受力(最高耐受p H10.5)。Ca2+和Mn2+对该裂解酶有显著地激活作用,而Cu2+则对该酶有一定的抑制作用。XLY-GST对黄原胶侧链的乙酰基和丙酮酸基团修饰程度表现出较高的特异性。本实验所取得的研究结果对黄原胶裂解酶的制备及黄原胶侧链修饰的研究奠定了基础。
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关键词
黄原胶裂解酶
黄原胶修饰
酶学性质
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Keywords
xanthan lyase
xanthan modification
enzyme characterization
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分类号
TS201.3
[轻工技术与工程—食品科学]
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