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题名麻花鸡副黏病毒ZH-1株F基因真核表达载体的构建
被引量:2
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作者
李红丽
詹丽娥
乔忠
王彩先
陆冰洋
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机构
山西省农科院畜牧兽医研究所
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出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2009年第3期54-58,共5页
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基金
山西省自然科学基金资助项目(2008011072)
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文摘
将麻花鸡副黏病毒ZH^-1株毒种接种于11日龄SPF鸡胚,收集48-96 h死亡的鸡胚尿囊液。参考已发表的鸡源副黏病毒F基因序列,设计并合成了一对特异性引物,用以扩增麻花鸡副黏病毒ZH^-1株F基因,预期扩增的F基因片段包含完整的开放阅读框。通过RT-PCR扩增出麻花鸡副黏病毒ZH^-1株F基因片段,琼脂糖凝胶电泳回收、纯化,得到F基因片段,经EcoRⅠ和SalⅠ消化,将F基因克隆进入PCI-neo载体,转化大肠杆菌DH5α,挑选菌落,经限制性核酸内切酶SalⅠ和EcoRⅠ双酶切及PCR鉴定,结果证明重组真核表达载体PCI-neo-F构建成功,为下一步在哺乳动物细胞Vero细胞中表达打下良好的基础。扩增的F基因测序后,与其他禽副黏病毒1型F基因进行系统发育树的分析比较,为阐明麻花鸡副黏病毒ZH^-1株的遗传背景奠定了基础。
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关键词
麻花鸡副黏病毒
F基因
序列分析
重组质粒
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Keywords
Paramyxovirus of brambling chicken
F gene
Sequence analysis
Recombinant plasmid
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分类号
Q786
[生物学—分子生物学]
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