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麦类壳多胞斑点病菌的快速检测方法研究
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作者 李金庆 王英超 +3 位作者 邵秀玲 季蕾 张静 尹伟力 《安徽农业科学》 CAS 2024年第18期118-119,132,共3页
利用麦类壳多胞斑点病菌β-tubulin一段保守基因序列,设计特异性引物进行麦类壳多胞斑点病菌的检测,并进行特异性与灵敏度验证。结果显示,该方法特异性强,灵敏度可达5 pg/μL,适合于麦类壳多胞斑点病菌的快速检测。
关键词 β-tubulin基因 麦类壳多胞斑点病菌 特异性 灵敏度
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进境法国大麦中麦类壳多胞斑点病菌的鉴定及致病性测定
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作者 叶露飞 牟桂萍 +3 位作者 闫晓东 杨赛军 左然玲 易建平 《生物安全学报(中英文)》 2025年第4期338-344,共7页
【目的】进境法国大麦中麦类壳多胞斑点病菌的鉴定及致病性测定。【方法】利用平板分离法从进境法国大麦样品中分离到真菌分离物5225-17,对分离物进行菌落形态特征观察、ITS、β-tubulin、β-xylosidase基因序列分析和致病性测试。【结... 【目的】进境法国大麦中麦类壳多胞斑点病菌的鉴定及致病性测定。【方法】利用平板分离法从进境法国大麦样品中分离到真菌分离物5225-17,对分离物进行菌落形态特征观察、ITS、β-tubulin、β-xylosidase基因序列分析和致病性测试。【结果】分离物5225-17在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基上菌落正面为白色絮状,背面中央为淡粉色。分离物边缘规则,生长速度较快,约0.5~1.0 cm·d^(-1)。分离物在PDA培养基上产孢困难,在水琼脂(WA)培养基上20℃培养21 d后可见菌丝产孢。分生孢子呈圆柱形、透明,孢子上端稍弯曲或直,末端钝或圆,具3~5个隔膜,含有油球,长×宽为26.8μm×3.6μm(平均值)。子囊棒状、透明、顶部圆,长×宽为(40~80)μm×(8~11)μm;子囊孢子8个,浅黄色至淡黄褐色,梭形,直或稍弯曲,3个隔膜,少数2个或4个,隔膜处明显缢缩,长×宽为20.8μm×4.1μm(平均值)。ITS、β-tubulin和β-xylosidase基因序列均与麦类壳多胞斑点病菌Parastagonospora pseudonodorum完全一致。基于多基因的系统发育树表明,分离物5225-17与P.pseudonodorum分支聚在一起,与其近似种P.nodorum亲缘关系较远。致病性测试显示,分离物5225-17接种离体叶片和活体叶片均产生典型症状。【结论】分离物5225-17为麦类壳多胞斑点病菌P.pseudonodorum。 展开更多
关键词 麦类壳多胞斑点病菌 大麦 分离鉴定 致病性
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麦类粮食3种检疫性病原真菌三重荧光PCR检测方法的建立
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作者 李金庆 季蕾 +5 位作者 郭骁驹 邵秀玲 杨斌 孙民琴 张静 王云霞 《河北农业科学》 2024年第4期99-108,共10页
麦类壳多胞斑点病菌(Parastagonospora pseudonodorum)、小麦基腐病菌(Oculimacula yallundae)、小麦全蚀病菌(Gaeumannomyces graminis var.tritici)是麦类作物上的重要检疫性病原真菌。建立一种可以同时检测上述3种植物病原真菌的三... 麦类壳多胞斑点病菌(Parastagonospora pseudonodorum)、小麦基腐病菌(Oculimacula yallundae)、小麦全蚀病菌(Gaeumannomyces graminis var.tritici)是麦类作物上的重要检疫性病原真菌。建立一种可以同时检测上述3种植物病原真菌的三重荧光PCR方法,可以实现进境麦类粮食中这3种病原真菌的快速准确检疫鉴定。在对麦类壳多胞斑点病菌TUB2基因、小麦基腐病菌ITS1基因、小麦全蚀病菌EF1-α基因单重荧光PCR扩增引物与探针浓度优化的基础上,对三重荧光PCR扩增的引物与探针浓度进行优化,据此进一步对三重荧光PCR扩增程序的退火温度进行优化,建立了可同时检测上述3种植物病原真菌的三重荧光PCR方法,并对该方法的特异性和灵敏度分别进行了验证。结果表明:三重荧光PCR扩增时,TUB2基因、ITS1基因、EF1-α基因的引物与探针最优添加量分别为0.5、0.6和0.6μL,最优退火温度为60℃。特异性验证结果显示,3种靶标菌株均出现了显著扩增;而10株非靶标菌株均未出现扩增,结果为阴性。灵敏度验证结果显示,3种靶标病菌的检测灵敏度分别为41、39、45 fg/μL。本研究建立的三重实时荧光PCR检测方法特异性强、灵敏度高,能够同时快速准确鉴定麦类壳多胞斑点病菌、小麦基腐病菌、小麦全蚀病菌,适用于口岸进境粮食这3种病原真菌的快速准确鉴定。 展开更多
关键词 三重荧光PCR 麦类壳多胞斑点病菌 小麦基腐病菌 小麦全蚀病菌 快速检测
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