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麦冬皂苷B调节Notch/Snail信号通路对宫颈癌细胞迁移、侵袭和上皮间质转化的影响
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作者 刘佳 严金金 纪贤芬 《解剖学杂志》 2024年第6期500-505,F0003,共7页
目的:探究麦冬皂苷B(OPB)调节神经源性基因同源蛋白Notch/锌指转录因子Snail信号通路对宫颈癌细胞迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:CCK8法检测不同浓度OPB干预人宫颈癌SiHa细胞的存活率和半抑制浓度(IC50)。SiHa细胞共分为6... 目的:探究麦冬皂苷B(OPB)调节神经源性基因同源蛋白Notch/锌指转录因子Snail信号通路对宫颈癌细胞迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:CCK8法检测不同浓度OPB干预人宫颈癌SiHa细胞的存活率和半抑制浓度(IC50)。SiHa细胞共分为6组,即SiHa组(对照)、L-OPB组(5μmol/L OPB)、M-OPB组(10μmol/L OPB)、H-OPB组(20μmol/L OPB)、Jagged 1组(H-OPB+Notch1信号激活剂Jagged 1)、DAPT组(H-OPB+Notch信号抑制剂DAPT)。分组处理24 h,CCK8法分析细胞增殖,划痕实验分析迁移,Transwell实验分析侵袭,流式细胞术分析凋亡,免疫印迹检测EMT和Notch/Snail通路蛋白表达。通过宫颈癌小鼠模型比较对照组(生理盐水灌胃)和OPB组(OPB灌胃)肿瘤体积和质量,免疫组织化学检测肿瘤中Notch和Snail的表达。结果:与SiHa组相比,L-OPB组、M-OPB组和H-OPB组细胞活力、克隆数、迁移距离百分比、侵袭数依次减少,凋亡率依次增加;与H-OPB组相比,Jagged 1组细胞活力、克隆数、迁移距离百分比、侵袭数增加,凋亡率减少;DAPT组细胞活力、克隆数、迁移距离百分比、侵袭数减少,凋亡率增加。与SiHa组相比,L-OPB组、M-OPB组和H-OPB组细胞E-cadherin表达依次增加,vimentin、Notch、claudin-1、Snail、N-cadherin表达依次减少;与H-OPB组相比,Jagged 1组细胞vimentin、Notch、claudin-1、Snail、N-cadherin表达增加,E-cadherin表达减少;DAPT组细胞E-cadherin表达增加,vimentin、Notch、claudin-1、Snail、N-cadherin表达减少。与对照组小鼠相比,OPB组肿瘤体积和质量及Notch、Snail阳性表达率减少。结论:OPB可能抑制宫颈癌细胞迁移、侵袭和EMT,机制可能与Notch/Snail通路失活有关。 展开更多
关键词 麦冬皂苷b NOTCH SNAIL 宫颈癌 迁移 侵袭 上皮间质转化
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麦冬皂苷B诱导人肝癌HepG2细胞自噬的分子机制研究 被引量:15
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作者 周志红 《北方药学》 2017年第9期156-157,174,共3页
目的:研究麦冬皂苷B诱导人肝癌HepG2细胞自噬的分子机制。为临床抗肿瘤治疗提供理论依据。方法:MTT比色法检测人肝癌HepG2细胞增殖;流式细胞仪检测HepG2细胞的凋亡及细胞周期变化;吖啶橙、Lyso-Tracker Red(溶酶体红色荧光探针)染色、He... 目的:研究麦冬皂苷B诱导人肝癌HepG2细胞自噬的分子机制。为临床抗肿瘤治疗提供理论依据。方法:MTT比色法检测人肝癌HepG2细胞增殖;流式细胞仪检测HepG2细胞的凋亡及细胞周期变化;吖啶橙、Lyso-Tracker Red(溶酶体红色荧光探针)染色、HepG2-GFP-LC3转染细胞等检测细胞自噬;Western blotting(蛋白质印迹法)检测人肝癌HepG2细胞自噬信号通路中关键蛋白的变化。结果:人肝癌HepG2细胞的增殖被麦冬皂苷B抑制,而且麦冬皂苷B可诱导人肝癌HepG2细胞发生自噬,但不诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞,可导致LC3I转变为LC3II和Beclin-1(自噬标志性蛋白)表达增加,自噬抑制剂3-MA几乎完全逆转其抗增殖作用。Western blotting检测结果表明,AKT、mTOR和p70S6K的磷酸化及PTEN上调是被麦冬皂苷B抑制的结果。结论:麦冬皂苷B通过抑制Akt/mTOR信号通路诱导人肝癌HepG2细胞发生自噬。 展开更多
关键词 麦冬皂苷b 人肝癌HEPG2细胞 细胞周期 细胞自噬与凋亡 AKT
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麦冬皂苷B对结肠癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制研究 被引量:7
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作者 闫江涛 高立伟 左一凡 《食品与药品》 CAS 2020年第6期476-480,共5页
目的探讨麦冬皂苷B对结肠癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法选取本院2017年1月~2019年1月收治的25例结肠癌患者的癌组织及相应癌旁组织;将结肠癌细胞HT29分为对照(NC)组、不同浓度麦冬皂苷B组、miR-NC组、miR-142-3p组、anti-miR-N... 目的探讨麦冬皂苷B对结肠癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法选取本院2017年1月~2019年1月收治的25例结肠癌患者的癌组织及相应癌旁组织;将结肠癌细胞HT29分为对照(NC)组、不同浓度麦冬皂苷B组、miR-NC组、miR-142-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-142-3p组、麦冬皂苷B+anti-miR-NC组、麦冬皂苷B+anti-miR-142-3p组。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖;蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase-3)蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-142-3p表达水平。结果麦冬皂苷B处理的结肠癌细胞HT29中cyclin D1表达水平显著降低,cleaved-caspase-3表达水平显著升高,细胞凋亡率显著升高,miR-142-3p表达水平显著升高(P<0.05)。与癌旁组织相比,结肠癌组织中miR-142-3p表达水平显著降低(P<0.05);mi R-142-3p高表达可抑制结肠癌细胞增殖、促进细胞凋亡;mi R-142-3p低表达可促进结肠癌细胞增殖、抑制细胞凋亡;mi R-142-3p低表达可抑制麦冬皂苷B对结肠癌细胞HT29增殖和凋亡的影响。结论麦冬皂苷B通过上调miR-142-3p的表达抑制结肠癌细胞增殖、促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 麦冬皂苷b miR-142-3p 结肠癌 增殖 凋亡
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襄麦冬多糖及皂苷体外活性研究 被引量:10
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作者 陈哲 冯佳悦 +4 位作者 曹诚 柯炎波 杨润 余海忠 王海燕 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2018年第13期7-12,共6页
用热水浸提醇沉法提取襄麦冬多糖并研究其体外抗氧化活性;利用滤纸片法研究不同浓度的襄麦冬皂苷B的抑菌活性。结果显示,襄麦冬多糖具有一定的体外抗氧化活性,其中对超氧阴离子自由基清除能力最强,高达70.83%,其次为对羟自由基的清除能... 用热水浸提醇沉法提取襄麦冬多糖并研究其体外抗氧化活性;利用滤纸片法研究不同浓度的襄麦冬皂苷B的抑菌活性。结果显示,襄麦冬多糖具有一定的体外抗氧化活性,其中对超氧阴离子自由基清除能力最强,高达70.83%,其次为对羟自由基的清除能力(25.69%),对DPPH自由基的清除能力最弱。浓度为2.0、4.0 mg/mL的襄麦冬皂苷B对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有抑菌作用,对大肠杆菌的抑菌圈直径分别为(10.83±0.82)mm,(14.89±0.50)mm;金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别为(11.63±0.33)、(17.05±0.67)mm,在相同浓度下,金黄色葡萄球菌对麦冬皂苷的敏感性比大肠杆菌强。研究结果表明,襄麦冬多糖及皂苷B分别具有明显的抗氧化作用和抑菌活性。 展开更多
关键词 麦冬多糖 抗氧化活性 麦冬皂苷b 抑菌活性
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UPLC-MS/MS同时测定麦冬配方颗粒中4个成分的含量及山麦冬成分的检查 被引量:5
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作者 刘斌 张力伟 +4 位作者 王煦辰 孔令红 赵海燕 周海燕 丁富娟 《中国现代中药》 CAS 2024年第1期144-151,共8页
目的:采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法(UPLC-MS/MS)建立同时测定麦冬配方颗粒中4个有效成分的含量,并检查是否含有山麦冬的2个专属性成分的方法。方法:采用XBridge BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.5μm),流动相为乙腈(A)-... 目的:采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法(UPLC-MS/MS)建立同时测定麦冬配方颗粒中4个有效成分的含量,并检查是否含有山麦冬的2个专属性成分的方法。方法:采用XBridge BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.5μm),流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱,流速:0.2 mL·min^(–1),柱温:35℃,电喷雾离子源,多反应监测模式正、负离子全扫描。对麦冬配方颗粒中麦冬皂苷C、麦冬皂苷D、甲基麦冬黄烷酮A、甲基麦冬黄烷酮B、山麦冬皂苷B、短葶山麦冬皂苷C进行含量测定并聚类分析。结果:6个待测成分在各自线性范围内线性关系良好(r≥0.995),平均加样回收率为95.9%~99.3%,RSD为0.9%~2.2%。26批样品中麦冬皂苷C、麦冬皂苷D、甲基麦冬黄烷酮A、甲基麦冬黄烷酮B的质量分数分别为6.4~17.3、15.1~29.1、9.0~22.6、4.5~14.4μg·g–1;有3批检出山麦冬皂苷B,其中2批同时检出短葶山麦冬皂苷C。结论:该方法简单、快速、准确,可用于麦冬配方颗粒的质量控制。 展开更多
关键词 麦冬配方颗粒 超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法 麦冬C 麦冬D 甲基麦冬黄烷酮A 甲基麦冬黄烷酮b 麦冬皂苷b 短葶山麦冬C
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近红外漫反射光谱法快速测定麦冬多指标成分含量 被引量:8
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作者 祁梅 顾志荣 +2 位作者 李芹 王安红 葛斌 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2023年第3期114-120,共7页
目的利用近红外光谱(NIR)技术建立麦冬5种代表性成分的偏最小二乘(PLS)定量分析模型,为快速控制麦冬药材质量提供参考。方法收集3个麦冬主产区的120批样品,采集NIR原始光谱,采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)同时测定麦冬皂... 目的利用近红外光谱(NIR)技术建立麦冬5种代表性成分的偏最小二乘(PLS)定量分析模型,为快速控制麦冬药材质量提供参考。方法收集3个麦冬主产区的120批样品,采集NIR原始光谱,采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)同时测定麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′、甲基麦冬二氢高异黄酮A、甲基麦冬二氢高异黄酮B含量的化学参考值,以决定系数(R^(2))、校正均方差(RMSEC)、预测均方差(RMSEP)和留一法交叉验证均方差(RMSECV)为指标,选择最佳光谱预处理方法、最佳波段及最佳因子数,建立PLS模型。结果麦冬皂苷B的PLS模型R^(2)=0.9702,RMSEC=0.5207,RMSEP=0.5541,交叉验证R^(2)=0.9430,RMSECV=0.6465,外部验证平均回收率为101.63%;麦冬皂苷D的PLS模型R^(2)=0.9498,RMSEC=0.6627,RMSEP=0.3157,交叉验证R^(2)=0.9206,RMSECV=0.3583,外部验证平均回收率为102.07%;麦冬皂苷D’的PLS模型R^(2)=0.9804,RMSEC=0.0853,RMSEP=0.4155,交叉验证R^(2)=0.9516,RMSECV=0.6933,外部验证平均回收率为99.44%;甲基麦冬二氢高异黄酮A的PLS模型R^(2)=0.9593,RMSEC=0.8122,RMSEP=0.5674,交叉验证R^(2)=0.9395,RMSECV=0.7444,外部验证平均回收率为103.11%;甲基麦冬二氢高异黄酮B的PLS模型R^(2)=0.9408,RMSEC=0.6451,RMSEP=0.7476,交叉验证R^(2)=0.9283,RMSECV=0.8849,外部验证平均回收率为101.59%。校正集与验证集样品均匀分布在回归线两侧,表明模型预测值与实测值之间具有较好的相关性,模型预测性能较为理想。结论本研究建立的定量模型操作简单,预测结果准确,可用于麦冬5种成分含量的快速测定。 展开更多
关键词 近红外光谱 麦冬 麦冬皂苷b 麦冬D 麦冬D' 甲基麦冬二氢高异黄酮A 甲基麦冬二氢高异黄酮b 偏最小二乘 快速测定
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基于HPLC-MS/MS法的咽炎片中麦冬掺伪检查 被引量:4
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作者 马昌豪 李洪芹 李怀伟 《食品与药品》 CAS 2022年第1期40-43,共4页
目的建立咽炎片中麦冬掺伪检测方法。方法高效液相色谱-串联电喷雾三重四级杆质谱法(HPLC-MS/MS),采用Innoval ODS-2色谱柱(2.1 mm×100 mm,3μm),以乙腈-0.1%甲酸(75:25)为流动相,流速为0.3 ml/min,柱温40℃,进样量2μl,多反应监测... 目的建立咽炎片中麦冬掺伪检测方法。方法高效液相色谱-串联电喷雾三重四级杆质谱法(HPLC-MS/MS),采用Innoval ODS-2色谱柱(2.1 mm×100 mm,3μm),以乙腈-0.1%甲酸(75:25)为流动相,流速为0.3 ml/min,柱温40℃,进样量2μl,多反应监测(MRM)模式。结果31批咽炎片样品中,有7批次样品检出短葶山麦冬掺伪,有1批次样品检出湖北麦冬掺伪,有1批次样品同时检出短葶山麦冬和湖北麦冬掺伪。结论咽炎片中存在麦冬和山麦冬混用,本方法准确可靠,可为咽炎片中麦冬的质量控制提供参考。 展开更多
关键词 咽炎片 麦冬 掺伪 麦冬皂苷b 短葶山麦冬C
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高效液相色谱-串联质谱法测定天王补心丸中山麦冬 被引量:5
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作者 李丽莉 吕轶峰 +3 位作者 宁崇良 覃丽郦 白桂昌 何颂华 《化学分析计量》 CAS 2023年第10期72-76,共5页
建立超高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定天王补心丸中麦冬的混淆品山麦冬(湖北麦冬、短葶山麦冬)的方法。样品经甲醇提取,以0.1%(体积分数)甲酸-乙腈为流动相,用Waters CORTECS®C18色谱柱分离,采用电喷雾离子源(ESI),以多... 建立超高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定天王补心丸中麦冬的混淆品山麦冬(湖北麦冬、短葶山麦冬)的方法。样品经甲醇提取,以0.1%(体积分数)甲酸-乙腈为流动相,用Waters CORTECS®C18色谱柱分离,采用电喷雾离子源(ESI),以多反应监测(MRM)模式进行正、负离子同时扫描,用HPLC-MS/MS法测定湖北麦冬、短葶山麦冬的代表性成分山麦冬皂苷B、短葶山麦冬皂苷C。山麦冬皂苷B、短葶山麦冬皂苷C的质量浓度分别在5.18~207.4、5.2~2080 ng/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数均为0.9993,方法检出限分别为56、134 ng/g。样品加标回收率分别为99.16%、101.54%,测定结果的相对标准偏差分别为2.57%、5.27%(n=9)。该方法简单、稳定、可靠,可用于分析天王补心丸中麦冬的掺假情况。 展开更多
关键词 高效液相色谱-串联质谱法 天王补心丸 麦冬 麦冬 麦冬皂苷b 短葶山麦冬C
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