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鸡鲍氏志贺氏菌脂多糖的提取方法研究
被引量：
4
1
作者
潘国民
许兰菊
+4 位作者
蒋媛媛
李炜
邓九虎
白毅洁
李欣
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2010年第6期138-140,共3页
为了提取和纯化鸡鲍氏志贺氏菌脂多糖(LPS),利用1%葡萄糖肉汤培养基大量培养已分离鉴定的鸡鲍氏志贺氏菌,并应用酚水法提取鸡鲍氏志贺氏菌脂多糖。经聚乙二醇20000浓缩,DNA酶及RNA酶酶解,离心分离,冷冻干燥等制得纯化的LPS。对提取物分...
为了提取和纯化鸡鲍氏志贺氏菌脂多糖(LPS),利用1%葡萄糖肉汤培养基大量培养已分离鉴定的鸡鲍氏志贺氏菌,并应用酚水法提取鸡鲍氏志贺氏菌脂多糖。经聚乙二醇20000浓缩,DNA酶及RNA酶酶解,离心分离,冷冻干燥等制得纯化的LPS。对提取物分别进行糖、蛋白质及核酸含量测定,结果显示,所提取纯化的LPS糖含量为27.06 mg/L,蛋白质含量为0.25 g/L,核酸含量为40.20 mg/L,鲎试剂检测具有凝集活性。上述结果表明:该试验方法能有效提取鸡鲍氏志贺氏菌LPS,提取物纯度较高,核酸及蛋白质含量较低,是提取脂多糖的一种简便快捷的方法。
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关键词
鸡鲍氏志贺氏菌
脂多糖
提取
纯化
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职称材料
包被LPS抗原检测鸡源鲍氏志贺氏菌抗体的间接ELISA方法的建立
2
作者
邓久虎
许兰菊
+3 位作者
杨永珍
张丹鹤
苗银萍
李炜
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第1期91-96,共6页
以鸡源鲍氏志贺氏菌菌体提取的脂多糖(LPS)成分作为检测抗原,以辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgG抗体为第二抗体,以TMB为显色剂,成功建立了检测鸡源鲍氏志贺氏菌抗体的间接ELISA方法.通过对间接ELISA反应条件的一系列研究,确定了各种最适...
以鸡源鲍氏志贺氏菌菌体提取的脂多糖(LPS)成分作为检测抗原,以辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgG抗体为第二抗体,以TMB为显色剂,成功建立了检测鸡源鲍氏志贺氏菌抗体的间接ELISA方法.通过对间接ELISA反应条件的一系列研究,确定了各种最适工作条件:鸡源鲍氏志贺氏菌LPS抗原最适包被质量浓度为5mg·L-1,最适包被条件为4℃过夜;待检血清的最佳稀释度为1∶160,与包被抗原在37℃作用1 h;酶标二抗的最适工作浓度为1∶2 000,血清与酶标二抗的反应条件为37℃1 h;最适封闭条件为37℃作用1 h;底物最适反应条件为室温避光20 min;阴阳性临界值为0.385.经特异性试验、敏感性试验和重复性试验,表明建立的间接ELISA方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等特点.
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关键词
鸡
源
鲍氏
志贺
氏
菌
LPS
抗体
间接ELISA
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职称材料
题名
鸡鲍氏志贺氏菌脂多糖的提取方法研究
被引量：
4
1
作者
潘国民
许兰菊
蒋媛媛
李炜
邓九虎
白毅洁
李欣
机构
河南农业大学
出处
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2010年第6期138-140,共3页
基金
河南省科技攻关项目(072102130019)
文摘
为了提取和纯化鸡鲍氏志贺氏菌脂多糖(LPS),利用1%葡萄糖肉汤培养基大量培养已分离鉴定的鸡鲍氏志贺氏菌,并应用酚水法提取鸡鲍氏志贺氏菌脂多糖。经聚乙二醇20000浓缩,DNA酶及RNA酶酶解,离心分离,冷冻干燥等制得纯化的LPS。对提取物分别进行糖、蛋白质及核酸含量测定,结果显示,所提取纯化的LPS糖含量为27.06 mg/L,蛋白质含量为0.25 g/L,核酸含量为40.20 mg/L,鲎试剂检测具有凝集活性。上述结果表明:该试验方法能有效提取鸡鲍氏志贺氏菌LPS,提取物纯度较高,核酸及蛋白质含量较低,是提取脂多糖的一种简便快捷的方法。
关键词
鸡鲍氏志贺氏菌
脂多糖
提取
纯化
Keywords
S.boydii
Lipopolysaccharide
Extraction
Purification
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
包被LPS抗原检测鸡源鲍氏志贺氏菌抗体的间接ELISA方法的建立
2
作者
邓久虎
许兰菊
杨永珍
张丹鹤
苗银萍
李炜
机构
河南农业大学牧医工程学院
出处
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第1期91-96,共6页
基金
河南省重点科技攻关项目(072102130019)
文摘
以鸡源鲍氏志贺氏菌菌体提取的脂多糖(LPS)成分作为检测抗原,以辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgG抗体为第二抗体,以TMB为显色剂,成功建立了检测鸡源鲍氏志贺氏菌抗体的间接ELISA方法.通过对间接ELISA反应条件的一系列研究,确定了各种最适工作条件:鸡源鲍氏志贺氏菌LPS抗原最适包被质量浓度为5mg·L-1,最适包被条件为4℃过夜;待检血清的最佳稀释度为1∶160,与包被抗原在37℃作用1 h;酶标二抗的最适工作浓度为1∶2 000,血清与酶标二抗的反应条件为37℃1 h;最适封闭条件为37℃作用1 h;底物最适反应条件为室温避光20 min;阴阳性临界值为0.385.经特异性试验、敏感性试验和重复性试验,表明建立的间接ELISA方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等特点.
关键词
鸡
源
鲍氏
志贺
氏
菌
LPS
抗体
间接ELISA
Keywords
Shigella boydii from chicken
LPS
antibody
indirect ELISA
分类号
S831.7 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸡鲍氏志贺氏菌脂多糖的提取方法研究
潘国民
许兰菊
蒋媛媛
李炜
邓九虎
白毅洁
李欣
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2010
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
包被LPS抗原检测鸡源鲍氏志贺氏菌抗体的间接ELISA方法的建立
邓久虎
许兰菊
杨永珍
张丹鹤
苗银萍
李炜
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
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