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用逆转录病毒法制作鸡输卵管生物反应器的研究
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作者 赵英会 杜立新 张念华 《山东家禽》 2001年第3期31-33,共3页
关键词 逆转录病毒法 鸡输卵管生物反应器 研究结果 转基因
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基于网络药理学与分子对接探究苦虎益母口服液治疗鸡输卵管炎的作用机制 被引量:1
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作者 房思远 赵子玉 +4 位作者 荣轩 朱永明 张世佳 李育明 赵兵令 《中国兽药杂志》 2023年第11期31-39,共9页
为了探讨苦虎益母口服液治疗鸡输卵管炎的作用机制,试验通过网络药理学和分子对接的方法进行研究。首先筛选TCMSP数据库中苦参、虎杖、黄芪、菟丝子、益母草五味药材的成分和靶点,利用Uniprot数据库对靶标进行规范化处理,利用Cytoscape ... 为了探讨苦虎益母口服液治疗鸡输卵管炎的作用机制,试验通过网络药理学和分子对接的方法进行研究。首先筛选TCMSP数据库中苦参、虎杖、黄芪、菟丝子、益母草五味药材的成分和靶点,利用Uniprot数据库对靶标进行规范化处理,利用Cytoscape 3.8.2建立药物-有效活性成分-靶点网络图。由GeneCards、OMIM、CTD数据库收集鸡输卵管炎的靶点。利用微生信在线平台制作鸡输卵管炎和苦虎益母口服液的韦恩图,找到共同靶点。由STRING数据库构建蛋白质-蛋白质互作(PPI)网络互作图,并通过Cytoscape 3.8.2可视化。再使用DAVID在线工具对重叠靶标进行基因本体(GO)以及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。使用AutoDock Tools软件对核心成分和靶点进行分子对接验证。预测苦虎益母口服液治疗鸡输卵管炎的活性成分有74种,对应靶点77个,1137个鸡输卵管炎靶点,35个共同靶点。PPI网络显示涉及的关键靶点是雌激素受体1(ESR1)、细胞周期调节因子(CCND1)、血管内皮生长因子A(VEGFA)。GO功能富集分析筛选符合伪发现率<0.05的条件后得到相关条目8个。生物过程(biological process,BP)涉及到白细胞介素-18、巨噬细胞活化、免疫反应、细胞对异生刺激的反应、RNA聚合酶II启动子转录正调;细胞组分(cellular component,CC)涉及到细胞外间隙;分子功能(molecular function,MF)涉及到干扰素-γ受体结合、细胞因子。KEGG富集分析表明苦虎益母口服液发挥作用的通路主要有细胞衰老、细胞周期和Toll样受体信号通路。分子对接结果表明苦虎益母口服液有效活性成分槲皮素、山奈酚和木犀草素与关键靶点ESR1、CCND1和VEGFA的结核活性较好,结合能均小于0 kJ/mol。苦虎益母口服液多种有效成分可能作用于多个靶点,通过参与多种信号通路对鸡输卵管炎发挥作用。 展开更多
关键词 网络药理学 分子对接 苦虎益母口服液 鸡输卵管
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蛋鸡感染H9N2 AIV后输卵管不同部位病毒的分布及病理组织学观察 被引量:1
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作者 陈占莉 曹晓蕾 +6 位作者 唐超 江跃德 黄晶晶 李涛 王秋珍 伍成奇 王晶钰 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第11期56-61,共6页
为探索H9N2AIV感染蛋鸡致输卵管功能异常的机理,对蛋鸡感染H9N2亚型AIV后输卵管不同部位病毒载量与病理变化进行检测与观察。以H9N2亚型AIV人工感染非免疫蛋鸡,在感染后3、5、7d分别采取鸡输卵管组织,real-time PCR检测感染鸡输卵管组织... 为探索H9N2AIV感染蛋鸡致输卵管功能异常的机理,对蛋鸡感染H9N2亚型AIV后输卵管不同部位病毒载量与病理变化进行检测与观察。以H9N2亚型AIV人工感染非免疫蛋鸡,在感染后3、5、7d分别采取鸡输卵管组织,real-time PCR检测感染鸡输卵管组织中AIV病毒载量,同时HE染色后观察病理组织学变化。结果表明,real-time PCR从鸡输卵管膨大部、峡部、子宫部和阴道部均检出了禽流感病毒,其中以膨大部和子宫部病毒载量最高,分别达5.27×104拷贝/μL±3.55×103拷贝/μL和5.52×104拷贝/μL±3.14×103拷贝/μL。组织病理学观察发现蛋鸡感染H9N2亚型AIV后输卵管膨大部、峡部和子宫部病变明显。观察到上皮细胞脱落坏死,炎性细胞浸润腺体,腺体间隙变大甚至溶解,腺体组织充血出血。本研究证实蛋鸡感染H9N2亚型AIV后输卵管组织中AIV病毒载量与其病理变化存在明显的正相关。 展开更多
关键词 鸡输卵管 H9N2 亚型禽流感病毒 病理变化 病毒载量
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蛋鸡感染H9N2 AIV后输卵管不同部位病理组织学观察
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作者 徐文华 《农业开发与装备》 2016年第10期101-102,共2页
对蛋鸡感染H9N2亚型AIV后输卵管不同部位病理变化进行观察,为揭示AIV感染蛋鸡致输卵管功能异常的机理提供实验依据。以H9N2亚型AIV人工感染非免蛋鸡,在感染后3、5、7天分别采取鸡输卵管组织,HE染色观察病理组织学变化。结果发现蛋鸡感染... 对蛋鸡感染H9N2亚型AIV后输卵管不同部位病理变化进行观察,为揭示AIV感染蛋鸡致输卵管功能异常的机理提供实验依据。以H9N2亚型AIV人工感染非免蛋鸡,在感染后3、5、7天分别采取鸡输卵管组织,HE染色观察病理组织学变化。结果发现蛋鸡感染H9N2亚型AIV后输卵管膨大部、峡部和子宫部病变明显。本研究证实蛋鸡感染H9N2亚型AIV后输卵管组织病理变化明显。 展开更多
关键词 鸡输卵管 H9N2流感病毒 病理变化
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含重组人组织激肽释放酶降血压鸡蛋的开发 被引量:1
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作者 高波 房浩霞 +1 位作者 王安平 孙怀昌 《中国家禽》 北大核心 2008年第18期27-29,共3页
通过将人组织激肽释放酶(human tissue kallikrein,KLK1)cDNA克隆入自行构建的鸡输卵管特异表达载体pOV中,获得重组载体pOVK经脂质体包裹后,经翅静脉等途径注射产蛋鸡,在收集的鸡蛋蛋清中检测到KLK1活性,表达量高达45U/mL蛋清,有效表达... 通过将人组织激肽释放酶(human tissue kallikrein,KLK1)cDNA克隆入自行构建的鸡输卵管特异表达载体pOV中,获得重组载体pOVK经脂质体包裹后,经翅静脉等途径注射产蛋鸡,在收集的鸡蛋蛋清中检测到KLK1活性,表达量高达45U/mL蛋清,有效表达持续7d左右。用含2~4UKLK1的蛋清饲喂高血压大鼠,可使其血压降低70mmHg,5d后回升至饲喂前水平。试验结果表明,在鸡蛋清中表达的重组KLK1口服具有降血压作用,可用于研制降血压保健蛋。 展开更多
关键词 人组织激肽释放酶 鸡输卵管表达 降血压
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基于鸡卵清蛋白启动子的纳豆激酶慢病毒表达载体表达特性的研究
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作者 蔡薇 吴志鹏 +2 位作者 赵俊生 徐宁迎 郭晓令 《江苏农业科学》 2019年第13期42-45,共4页
纳豆激酶(nattokinase,NK)是一种有效的抗血栓药物。基于已构建的纳豆激酶慢病毒表达载体,旨在比较其在鸡输卵管上皮细胞和鸡胚成纤维细胞中特异性表达的有效性。提取含卵清蛋白启动子(ovalbumin promoter,OV2)和雌激素反应元件(estroge... 纳豆激酶(nattokinase,NK)是一种有效的抗血栓药物。基于已构建的纳豆激酶慢病毒表达载体,旨在比较其在鸡输卵管上皮细胞和鸡胚成纤维细胞中特异性表达的有效性。提取含卵清蛋白启动子(ovalbumin promoter,OV2)和雌激素反应元件(estrogen response element,ERE)的pLV-OV2-ERE-NK-2A-EGFP重组质粒。通过PCR和双酶切进行初步鉴定,经生物公司测序、包装和滴定得转染传代培养的鸡输卵管上皮细胞和鸡胚成纤维细胞,并采用荧光显微镜和qPCR法检测细胞表达产物。结果表明,载体pLV-OV2-ERE-NK-2A-EGFP构建成功;且荧光显微镜下,鸡输卵管上皮细胞的绿色荧光多于成纤维细胞;qPCR检测发现 NK 正常表达。提示成功构建纳豆激酶慢病毒表达载体且在鸡输卵管上皮细胞中正常表达。 展开更多
关键词 纳豆激酶 卵清蛋白启动子 雌激素反应元件(ERE) 慢病毒载体 鸡输卵管上皮细胞 胚成纤维细胞
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重组人组织激肽释放酶与猪胰腺组织激肽释放酶的理化特性比较
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作者 高波 孙怀昌 宋成义 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期374-378,共5页
为了研究表达在蛋清中的重组人组织激肽释放酶(rhK1)是否与天然组织激肽释放酶具有相似的理化特性,对鸡输卵管暂态生物反应器表达的rhK1与猪胰腺组织激肽释放酶(pK)的理化特性进行比较鉴定.Western blotting检测结果显示,表达在... 为了研究表达在蛋清中的重组人组织激肽释放酶(rhK1)是否与天然组织激肽释放酶具有相似的理化特性,对鸡输卵管暂态生物反应器表达的rhK1与猪胰腺组织激肽释放酶(pK)的理化特性进行比较鉴定.Western blotting检测结果显示,表达在蛋清中的rhK1能被人组织激肽释放酶(hK1)特异抗体识别,与pK无交叉反应,rhK1酶原和成熟酶的分子量约为43kDa和37kDa.理化鉴定结果显示,rhK1在pH7~10的范围内活性稳定,而pK在pH8~9的范围内活性较稳定;rhK1和pK均能被Cu^2+、Fe^3+和Al^3+完全抑制;rhK1和pK的热稳定性相似,但rhK1在37℃孵育20min后被显著激活、以上试验结果表明,表达在蛋清中的rhK1分子量正确,理化特性与猪的天然酶相似,具有开发利用价值. 展开更多
关键词 鸡输卵管暂态生物反应器 重组人组织激肽释放酶 猪胰腺组织激肽释放酶 理化特性
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