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鸡贫血病毒VP3基因诱导人肺癌细胞SPC-A1凋亡的作用机制
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作者 连海 金宁一 +6 位作者 李霄 陈立刚 管国芳 孙丽丽 李雪梅 郑洪玲 崔英姬 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1063-1066,共4页
探索了重组质粒pVVP3对人肺癌细胞SPC-A1的作用及机制.将pVVP3经脂质体介导转染人肺癌细胞SPC-A1,通过MTT方法检测了细胞活力;采用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色分析了肿瘤细胞凋亡;采用罗丹明123和DCFA染色测定了线粒体跨膜电位(△Ψ... 探索了重组质粒pVVP3对人肺癌细胞SPC-A1的作用及机制.将pVVP3经脂质体介导转染人肺癌细胞SPC-A1,通过MTT方法检测了细胞活力;采用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色分析了肿瘤细胞凋亡;采用罗丹明123和DCFA染色测定了线粒体跨膜电位(△Ψm)和活性氧水平变化;通过底物染色反应检测了Caspase-3活性.检测分析结果表明:重组质粒pVVP3转染人肺癌细胞SPC-A1后,细胞活力明显降低; AO/EB染色可见明显的细胞凋亡形态学变化;与空质粒对照相比,线粒体△Ψm下降(P<0.01),活性氧水平升高(P<0.05),Caspase-3活性增强(P<0.01).以上结果提示,重组质粒pVVP3能够通过上调ROS水平,下调线粒体△Ψm,进而激活Caspase-3,最终诱导人肺癌细胞凋亡. 展开更多
关键词 鸡贫血病毒vp3 人肺癌细胞 凋亡
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pVVP3和pVHN核酸疫苗的构建、表达及对肿瘤细胞的作用 被引量:8
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作者 米志强 金宁一 +4 位作者 龚伟 薛立娟 连海 解丽华 李萍 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期704-708,共5页
用pVAX1载体构建抗肿瘤核酸疫苗 .将鸡贫血病病毒 (CAV)的VP3基因和鸡新城疫病毒(NDV)HN基因插入载体pVAX1的多克隆位点 ,构建了 2个重组基因疫苗pVVP3和pVHN .转染OS732细胞 ,Western印迹及血凝试验检测HN基因表达状况及表达产物的活性... 用pVAX1载体构建抗肿瘤核酸疫苗 .将鸡贫血病病毒 (CAV)的VP3基因和鸡新城疫病毒(NDV)HN基因插入载体pVAX1的多克隆位点 ,构建了 2个重组基因疫苗pVVP3和pVHN .转染OS732细胞 ,Western印迹及血凝试验检测HN基因表达状况及表达产物的活性 .RT PCR、DNALadder、TUNNEL染色检测VP3基因的表达及表达产物诱导OS732细胞凋亡作用 .酶切鉴定证实成功地构建了两个核酸疫苗 ,并能在真核细胞内表达 .含HN的核酸疫苗pVHN表达后具有血凝活性并致肿瘤细胞表面唾液酸含量降低 (P <0 0 5 ) .pVVP3的转染能导致OS732细胞凋亡 ,凋亡率可达87% .试验结果表明 。 展开更多
关键词 新城疫病毒 HN基因 贫血病毒vp3基因 抗肿瘤
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