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鸡γ-干扰素与补体受体2蛋白相互作用的研究
1
作者
靳换
孟昭英
+6 位作者
涂敏
沈佳
史爱华
赵蕾
习硕
张建伟
章振华
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第10期4476-4484,共9页
【目的】研究鸡γ-干扰素(chicken interferonγ,chIFN-γ)与鸡补体受体2(chicken complement receptor 2,chCR2)蛋白的相互作用,为研究chIFN-γ和chCR2新功能奠定基础。【方法】通过同源重组方法构建chIFN-γ相关表达质粒,利用免疫共...
【目的】研究鸡γ-干扰素(chicken interferonγ,chIFN-γ)与鸡补体受体2(chicken complement receptor 2,chCR2)蛋白的相互作用,为研究chIFN-γ和chCR2新功能奠定基础。【方法】通过同源重组方法构建chIFN-γ相关表达质粒,利用免疫共沉淀、激光共聚焦和表面等离子共振技术鉴定chIFN-γ与chCR2蛋白的相互作用,并通过分子对接技术模拟chIFN-γ与chCR2蛋白的相互作用模式。【结果】成功构建了pCMV-Myc-chIFN-γ表达质粒。将pCMV-Myc-chIFN-γ和pCMV-HA-chCR2-ΔTM质粒共转染HEK-293FT细胞,结果表明chIFN-γ蛋白可以与chCR2蛋白进行相互作用;将pCMV-Myc-chIFN-γ和pCMV-HA-chCR2-ΔTM质粒共转染DF-1细胞,结果表明chIFN-γ蛋白与chCR2蛋白可以在DF-1细胞中进行共定位。表面等离子共振试验结果显示chIFN-γ与chCR2蛋白之间的平衡解离常数(KD)值为0.362μmol/L,二者之间有较高的亲和力。分子对接试验结果显示,chIFN-γ与chCR2蛋白之间的相互作用模式为Asp23-His150间形成1组盐桥作用,Asn37-Ser143、Glu57-Gly179和Ile93-Tyr184间形成3组氢键作用。【结论】本研究结果证明了chIFN-γ与chCR2蛋白可以进行相互作用,且二者之间的作用模式为1组盐桥和3组氢键作用。
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关键词
鸡
γ-干扰素(chIFN-γ)
鸡
补体受体
2(
chcr
2)
相互作用
亲和力
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职称材料
基于表面等离子共振技术鉴定鸡补体受体2与其配体chC3 d的亲和力
2
作者
靳换
杨芊芊
+7 位作者
王聪
涂敏
赵蕾
澎湃
王海良
孟昭英
李永清
章振华
《中国兽药杂志》
2023年第7期1-7,共7页
鸡补体受体2(Chicken complement receptor 2,chCR2)是一种表达于鸡B淋巴细胞表面的跨膜蛋白,chCR2可以与其生理学配体鸡补体组分3 d(Chicken complement component 3 d,chC3 d)相互作用。目前评估受体与配体亲和力的方法主要有表面等...
鸡补体受体2(Chicken complement receptor 2,chCR2)是一种表达于鸡B淋巴细胞表面的跨膜蛋白,chCR2可以与其生理学配体鸡补体组分3 d(Chicken complement component 3 d,chC3 d)相互作用。目前评估受体与配体亲和力的方法主要有表面等离子共振技术(Surface plasmon resonance,SPR)和生物膜干涉技术(Biolayer interferometry,BLI)等。旨在利用表面等离子共振技术鉴定chCR2受体分子与其配体chC3 d分子的亲和力。成功构建了重组真核表达载体pTT5-chCR2和pTT5-chC3 d;利用HEK 293F表达系统表达了His-chCR2和His-chC3 d蛋白;利用NI柱纯化系统纯化了His-chCR2和His-chC3 d蛋白;利用表面等离子共振技术,通过分析chCR2与chC3 d结合的动力学参数得出两者之间的平衡解离常数KD为1.37μmol/L。结果表明chCR2与其配体chC3 d之间的亲和力较高。
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关键词
鸡
补体受体
2
鸡
补体
组分3
d
表面等离子共振技术
相互作用
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职称材料
题名
鸡γ-干扰素与补体受体2蛋白相互作用的研究
1
作者
靳换
孟昭英
涂敏
沈佳
史爱华
赵蕾
习硕
张建伟
章振华
机构
北京市农林科学院畜牧兽医研究所
北京农学院动物科学技术学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第10期4476-4484,共9页
基金
国家自然科学基金青年基金(32202793)
北京市农林科学院创新能力建设(KJCX20230424、KJCX20240338)。
文摘
【目的】研究鸡γ-干扰素(chicken interferonγ,chIFN-γ)与鸡补体受体2(chicken complement receptor 2,chCR2)蛋白的相互作用,为研究chIFN-γ和chCR2新功能奠定基础。【方法】通过同源重组方法构建chIFN-γ相关表达质粒,利用免疫共沉淀、激光共聚焦和表面等离子共振技术鉴定chIFN-γ与chCR2蛋白的相互作用,并通过分子对接技术模拟chIFN-γ与chCR2蛋白的相互作用模式。【结果】成功构建了pCMV-Myc-chIFN-γ表达质粒。将pCMV-Myc-chIFN-γ和pCMV-HA-chCR2-ΔTM质粒共转染HEK-293FT细胞,结果表明chIFN-γ蛋白可以与chCR2蛋白进行相互作用;将pCMV-Myc-chIFN-γ和pCMV-HA-chCR2-ΔTM质粒共转染DF-1细胞,结果表明chIFN-γ蛋白与chCR2蛋白可以在DF-1细胞中进行共定位。表面等离子共振试验结果显示chIFN-γ与chCR2蛋白之间的平衡解离常数(KD)值为0.362μmol/L,二者之间有较高的亲和力。分子对接试验结果显示,chIFN-γ与chCR2蛋白之间的相互作用模式为Asp23-His150间形成1组盐桥作用,Asn37-Ser143、Glu57-Gly179和Ile93-Tyr184间形成3组氢键作用。【结论】本研究结果证明了chIFN-γ与chCR2蛋白可以进行相互作用,且二者之间的作用模式为1组盐桥和3组氢键作用。
关键词
鸡
γ-干扰素(chIFN-γ)
鸡
补体受体
2(
chcr
2)
相互作用
亲和力
Keywords
chicken interferonγ(chIFN-γ)
chicken complement receptor
2
(
chcr
2
)
interaction
affinity
分类号
S831 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
基于表面等离子共振技术鉴定鸡补体受体2与其配体chC3 d的亲和力
2
作者
靳换
杨芊芊
王聪
涂敏
赵蕾
澎湃
王海良
孟昭英
李永清
章振华
机构
北京市农林科学院畜牧兽医研究所
中牧实业股份有限公司
北京翎羽生物科技有限公司
北京市兽药饲料监测中心
出处
《中国兽药杂志》
2023年第7期1-7,共7页
基金
国家自然科学基金青年基金(32202793)
北京市农林科学院青年基金(QNJJ202111)
+1 种基金
北京市农林科学院畜牧兽医研究所改革与发展(XMS202313)
北京市农林科学院创新能力建设(KJCX20230424)。
文摘
鸡补体受体2(Chicken complement receptor 2,chCR2)是一种表达于鸡B淋巴细胞表面的跨膜蛋白,chCR2可以与其生理学配体鸡补体组分3 d(Chicken complement component 3 d,chC3 d)相互作用。目前评估受体与配体亲和力的方法主要有表面等离子共振技术(Surface plasmon resonance,SPR)和生物膜干涉技术(Biolayer interferometry,BLI)等。旨在利用表面等离子共振技术鉴定chCR2受体分子与其配体chC3 d分子的亲和力。成功构建了重组真核表达载体pTT5-chCR2和pTT5-chC3 d;利用HEK 293F表达系统表达了His-chCR2和His-chC3 d蛋白;利用NI柱纯化系统纯化了His-chCR2和His-chC3 d蛋白;利用表面等离子共振技术,通过分析chCR2与chC3 d结合的动力学参数得出两者之间的平衡解离常数KD为1.37μmol/L。结果表明chCR2与其配体chC3 d之间的亲和力较高。
关键词
鸡
补体受体
2
鸡
补体
组分3
d
表面等离子共振技术
相互作用
Keywords
chicken complement receptor
2
chicken complement component 3 d
surface plasmon resonance
interaction
分类号
S859.79 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸡γ-干扰素与补体受体2蛋白相互作用的研究
靳换
孟昭英
涂敏
沈佳
史爱华
赵蕾
习硕
张建伟
章振华
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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职称材料
2
基于表面等离子共振技术鉴定鸡补体受体2与其配体chC3 d的亲和力
靳换
杨芊芊
王聪
涂敏
赵蕾
澎湃
王海良
孟昭英
李永清
章振华
《中国兽药杂志》
2023
0
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