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恩诺沙星抗体免疫检测条件的建立
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作者 张庆华 熊清明 +1 位作者 高建忠 严骏骢 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期173-176,共4页
目的制备恩诺沙星(ERLX)的多克隆抗体,以期建立通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测恩诺沙星抗体的效价和优化快速检测方法。方法将牛血清白蛋白(BSA)和鸡血清白蛋白(OVA)偶联成功的恩诺沙星完全抗原(BSA-ERLX和OVA-ERLX)免疫新西兰家兔得... 目的制备恩诺沙星(ERLX)的多克隆抗体,以期建立通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测恩诺沙星抗体的效价和优化快速检测方法。方法将牛血清白蛋白(BSA)和鸡血清白蛋白(OVA)偶联成功的恩诺沙星完全抗原(BSA-ERLX和OVA-ERLX)免疫新西兰家兔得到的血清分别保存在4、-20和-70℃半年后,用ELISA方法确定抗原包被的最适浓度、血清(一抗)的效价、一抗的最适稀释倍数及二抗的最适稀释倍数。首先将抗原包被浓度分为三组:20、10和5μg/ml,确定最适包被浓度,并在此基础上确定血清的效价和血清的最适稀释倍数。结果不同温度下保存的BSA-ERLX和OVA-ERLX抗体的最适抗原包被浓度均为10μg/ml。在4、-20和-70℃保存的BSA-ERLX的抗体效价分别为12800、25600和25600;一抗的最适稀释倍数分别是:800、800和1600,二抗最适稀释倍数为1000。OVA-ERLX的效价在4、-20和-70℃分别为3200、6400和6400;一抗的最适稀释倍数分别为800、1600、1600,二抗的最适稀释倍数均为1000。结论不同温度下保存的BSA-ERLX比OVA-ERLX抗体效价均高,综合考虑认为,-20℃保存的BSA-ERLX抗体,更加适合于进行ELISA检测。 展开更多
关键词 恩诺沙星 酶联免疫吸附试验 血清蛋白 鸡血清白蛋白 效价
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