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人源福氏志贺菌对鸡肠上皮原代细胞侵袭特性研究
被引量：
3
1
作者
师润
刘红英
+5 位作者
陈陆
杨霞
吕文强
余秋颖
赵军
王川庆
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期95-101,共7页
为研究人源福氏志贺菌对鸡肠上皮原代细胞侵袭力和侵袭特性,进一步验证人源志贺菌对鸡的致病性并建立体外研究模型,采用Hela细胞庆大霉素保护试验和免疫组织化学染色检测分离的人源福氏志贺菌ZD02株的毒力。然后采用细胞免疫组织化学染...
为研究人源福氏志贺菌对鸡肠上皮原代细胞侵袭力和侵袭特性,进一步验证人源志贺菌对鸡的致病性并建立体外研究模型,采用Hela细胞庆大霉素保护试验和免疫组织化学染色检测分离的人源福氏志贺菌ZD02株的毒力。然后采用细胞免疫组织化学染色研究ZD02株对鸡肠上皮细胞的侵袭力和相关侵袭特性。人源福氏志贺菌ZD02株能够侵入Hela细胞,庆大霉素保护试验结果显示,感染后30、60、90、120min时ZD02株侵袭率分别为1.43%、2.43%、2.56%、2.62%,证明ZD02株具有毒力。ZD02株侵袭鸡肠上皮原代细胞免疫组织化学检测结果显示,ZD02株能侵入鸡肠上皮细胞,感染后1、2、3、4h时ZD02株侵袭率分别为1.7%、6.2%、8.0%、11.2%。鸡肠上皮原代细胞经EGTA处理后,ZD02株侵袭率显著提高。人源福氏志贺菌ZD02株对鸡肠上皮细胞具有侵袭力,且从肠上皮细胞基底侧部侵袭。本研究进一步验证了志贺菌人禽互传的可能性,鸡肠上皮原代细胞可作为研究志贺菌致病机理的体外模型。
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关键词
人源福氏志贺菌
鸡肠上皮原代细胞
侵袭
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职称材料
鸡肠上皮原代细胞体外分离培养与鉴定
被引量：
3
2
作者
师润
杨霞
+2 位作者
陈陆
余秋颖
王川庆
《江苏农业科学》
北大核心
2013年第1期34-37,共4页
为了探讨鸡肠上皮原代细胞分离培养方法,进一步研究人源志贺菌对鸡的致病性和为相关侵袭特性提供体外模型,分别取不同日龄鸡胚,用0.1 g/mLⅠ型中性蛋白酶和300 U/mLⅪ型胶原酶联合分离纯化鸡肠上皮原代细胞,筛选其最佳培养方法,并对培...
为了探讨鸡肠上皮原代细胞分离培养方法,进一步研究人源志贺菌对鸡的致病性和为相关侵袭特性提供体外模型,分别取不同日龄鸡胚,用0.1 g/mLⅠ型中性蛋白酶和300 U/mLⅪ型胶原酶联合分离纯化鸡肠上皮原代细胞,筛选其最佳培养方法,并对培养细胞进行鉴定;然后采用0.125%胰酶和0.01%EDTA联合消化进行鸡肠上皮原代细胞传代。结果显示,应用Ⅰ型中性蛋白酶和Ⅺ型胶原酶消化15日龄鸡胚肠组织可获得满意的肠上皮细胞分离效果,细胞贴壁性良好。培养出圆形或多角形单层生长呈"铺路石样"的细胞,培养的细胞在12 h内贴壁,24～48 h明显增殖,72 h后细胞增殖速度减慢,生长状况不良。经透射电镜观察鉴定为肠上皮细胞。且传代后细胞贴壁生长良好。建立的鸡肠上皮原代细胞分离培养方法可获得纯度较高的鸡肠上皮原代细胞,制备的细胞可以连续传代3次。
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关键词
鸡肠上皮原代细胞
体外培养
鉴定
传代
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职称材料
细胞信号转导和骨架在人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞中的作用
被引量：
2
3
作者
师润
杨霞
+6 位作者
陈陆
刘红英
常洪涛
余秋颖
明星
郑关民
王川庆
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期276-282,共7页
为研究细胞信号转导和骨架在人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞中的作用,分别用酪氨酸蛋白激酶、酪氨酸蛋白磷酸酶、蛋白激酶C、Ca2+通道等信号转导抑制剂染料木黄酮、原钒酸钠、星状孢子素、硝苯地平和微丝蛋白聚合抑制剂细胞松弛素...
为研究细胞信号转导和骨架在人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞中的作用,分别用酪氨酸蛋白激酶、酪氨酸蛋白磷酸酶、蛋白激酶C、Ca2+通道等信号转导抑制剂染料木黄酮、原钒酸钠、星状孢子素、硝苯地平和微丝蛋白聚合抑制剂细胞松弛素B处理鸡肠上皮原代细胞后,采用细胞免疫组织化学染色检测人源福氏志贺菌ZD02株对鸡肠上皮原代细胞侵袭率,用间接免疫荧光双重标记检测ZD02株侵袭鸡肠上皮原代细胞后F-肌动蛋白分布的变化。结果显示,染料木黄酮、硝苯地平和细胞松弛素B能显著抑制人源福氏志贺菌ZD02株内化,星状孢子素和原钒酸钠对ZD02株的内化无影响,人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞时F-肌动蛋白发生聚集。本研究表明人源福氏志贺菌ZD02株侵袭鸡肠上皮原代细胞过程中需要酪氨酸蛋白激酶、Ca2+通道活化以及细胞微丝重排。
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关键词
人源福氏志贺菌
鸡肠上皮原代细胞
细胞
信号转导
细胞
骨架
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职称材料
题名
人源福氏志贺菌对鸡肠上皮原代细胞侵袭特性研究
被引量：
3
1
作者
师润
刘红英
陈陆
杨霞
吕文强
余秋颖
赵军
王川庆
机构
河南农业大学牧医工程学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期95-101,共7页
基金
国家自然科学基金(30972187)
教育部高等学校博士学科点专项科研基金(2011410511003)
文摘
为研究人源福氏志贺菌对鸡肠上皮原代细胞侵袭力和侵袭特性,进一步验证人源志贺菌对鸡的致病性并建立体外研究模型,采用Hela细胞庆大霉素保护试验和免疫组织化学染色检测分离的人源福氏志贺菌ZD02株的毒力。然后采用细胞免疫组织化学染色研究ZD02株对鸡肠上皮细胞的侵袭力和相关侵袭特性。人源福氏志贺菌ZD02株能够侵入Hela细胞,庆大霉素保护试验结果显示,感染后30、60、90、120min时ZD02株侵袭率分别为1.43%、2.43%、2.56%、2.62%,证明ZD02株具有毒力。ZD02株侵袭鸡肠上皮原代细胞免疫组织化学检测结果显示,ZD02株能侵入鸡肠上皮细胞,感染后1、2、3、4h时ZD02株侵袭率分别为1.7%、6.2%、8.0%、11.2%。鸡肠上皮原代细胞经EGTA处理后,ZD02株侵袭率显著提高。人源福氏志贺菌ZD02株对鸡肠上皮细胞具有侵袭力,且从肠上皮细胞基底侧部侵袭。本研究进一步验证了志贺菌人禽互传的可能性,鸡肠上皮原代细胞可作为研究志贺菌致病机理的体外模型。
关键词
人源福氏志贺菌
鸡肠上皮原代细胞
侵袭
Keywords
human source S. flexneri
primary chicken intestinal epithelial cells
invasion
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
鸡肠上皮原代细胞体外分离培养与鉴定
被引量：
3
2
作者
师润
杨霞
陈陆
余秋颖
王川庆
机构
河南农业大学牧医工程学院
出处
《江苏农业科学》
北大核心
2013年第1期34-37,共4页
基金
国家自然科学基金(编号:30972187)
教育部高等学校博士学科点专项(编号:2011410511003)
文摘
为了探讨鸡肠上皮原代细胞分离培养方法,进一步研究人源志贺菌对鸡的致病性和为相关侵袭特性提供体外模型,分别取不同日龄鸡胚,用0.1 g/mLⅠ型中性蛋白酶和300 U/mLⅪ型胶原酶联合分离纯化鸡肠上皮原代细胞,筛选其最佳培养方法,并对培养细胞进行鉴定;然后采用0.125%胰酶和0.01%EDTA联合消化进行鸡肠上皮原代细胞传代。结果显示,应用Ⅰ型中性蛋白酶和Ⅺ型胶原酶消化15日龄鸡胚肠组织可获得满意的肠上皮细胞分离效果,细胞贴壁性良好。培养出圆形或多角形单层生长呈"铺路石样"的细胞,培养的细胞在12 h内贴壁,24～48 h明显增殖,72 h后细胞增殖速度减慢,生长状况不良。经透射电镜观察鉴定为肠上皮细胞。且传代后细胞贴壁生长良好。建立的鸡肠上皮原代细胞分离培养方法可获得纯度较高的鸡肠上皮原代细胞,制备的细胞可以连续传代3次。
关键词
鸡肠上皮原代细胞
体外培养
鉴定
传代
分类号
S831.2 [农业科学—畜牧学]
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题名
细胞信号转导和骨架在人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞中的作用
被引量：
2
3
作者
师润
杨霞
陈陆
刘红英
常洪涛
余秋颖
明星
郑关民
王川庆
机构
河南农业大学牧区工程学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期276-282,共7页
基金
国家自然科学基金(30972187)
教育部高等学校博士学科点专项科研基金(2011410511003)
文摘
为研究细胞信号转导和骨架在人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞中的作用,分别用酪氨酸蛋白激酶、酪氨酸蛋白磷酸酶、蛋白激酶C、Ca2+通道等信号转导抑制剂染料木黄酮、原钒酸钠、星状孢子素、硝苯地平和微丝蛋白聚合抑制剂细胞松弛素B处理鸡肠上皮原代细胞后,采用细胞免疫组织化学染色检测人源福氏志贺菌ZD02株对鸡肠上皮原代细胞侵袭率,用间接免疫荧光双重标记检测ZD02株侵袭鸡肠上皮原代细胞后F-肌动蛋白分布的变化。结果显示,染料木黄酮、硝苯地平和细胞松弛素B能显著抑制人源福氏志贺菌ZD02株内化,星状孢子素和原钒酸钠对ZD02株的内化无影响,人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞时F-肌动蛋白发生聚集。本研究表明人源福氏志贺菌ZD02株侵袭鸡肠上皮原代细胞过程中需要酪氨酸蛋白激酶、Ca2+通道活化以及细胞微丝重排。
关键词
人源福氏志贺菌
鸡肠上皮原代细胞
细胞
信号转导
细胞
骨架
Keywords
human source S.flexneri
primary chicken intestinal epithelial cells
cell signal transduction
cytoskeleton
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
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1
人源福氏志贺菌对鸡肠上皮原代细胞侵袭特性研究
师润
刘红英
陈陆
杨霞
吕文强
余秋颖
赵军
王川庆
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
3
在线阅读
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职称材料
2
鸡肠上皮原代细胞体外分离培养与鉴定
师润
杨霞
陈陆
余秋颖
王川庆
《江苏农业科学》
北大核心
2013
3
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3
细胞信号转导和骨架在人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞中的作用
师润
杨霞
陈陆
刘红英
常洪涛
余秋颖
明星
郑关民
王川庆
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
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