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鼠李糖乳酸杆菌LG_A对鸡小肠上皮细胞β-防御素-9基因表达的影响
被引量:
14
1
作者
黎观红
洪智敏
+3 位作者
贾永杰
易中华
瞿明仁
刘思国
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期634-641,共8页
本研究旨在研究益生性鼠李糖乳酸杆菌LGA对体外培养的鸡小肠上皮细胞β-防御素-9(AvBD9)表达的调节作用。选用鼠李糖乳酸杆菌LGA对体外培养的鸡小肠上皮细胞进行剂量依赖性及时间依赖性刺激实验,利用实时荧光定量PCR(fluorescence quant...
本研究旨在研究益生性鼠李糖乳酸杆菌LGA对体外培养的鸡小肠上皮细胞β-防御素-9(AvBD9)表达的调节作用。选用鼠李糖乳酸杆菌LGA对体外培养的鸡小肠上皮细胞进行剂量依赖性及时间依赖性刺激实验,利用实时荧光定量PCR(fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)从mRNA水平研究刺激后上皮细胞AvBD9基因表达水平的差异。结果表明,不同浓度(2×105、2×106、2×107 cfu.mL-1)鼠李糖乳酸杆菌LGA均能上调AvBD9mRNA的表达,且在不同细菌浓度之间AvBD9mRNA的表达存在差异。热灭活鼠李糖乳杆菌LGA亦能上调AvBD9基因表达,且上调值显著高于活菌(P<0.05)。鼠李糖乳杆菌LGA刺激上皮细胞后AvBD9表达存在时间依赖关系,12h时AvBD9的表达达到峰值。Western blot检测结果显示,鼠李糖乳杆菌LGA刺激后的上皮细胞培养上清中存在AvBD9蛋白表达,表明AvBD9蛋白可以分泌到细胞外而发挥其生物学功能。益生性鼠李糖乳酸杆菌LGA与鸡肠道上皮细胞的相互作用过程中,鼠李糖乳酸杆菌LGA能够促进上皮细胞抗菌肽β-防御素-9的表达。本研究结果提示益生性乳杆菌可能通过促进肠道上皮抗菌肽的表达而发挥其益生作用。
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关键词
β-防御素-9
鸡小肠上皮细胞
鼠李糖乳酸杆菌LGA
荧光定量PCR
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职称材料
铜对鸡小肠上皮细胞增殖的影响
2
作者
刘立明
任清丹
《饲料研究》
CAS
北大核心
2012年第12期56-57,共2页
通过体外分离培养鸡小肠上皮细胞,在含10%血清的培养液中分别添加0、15.6、31.2、46.8和62.4μmol/L质量浓度的铜。结果表明:鸡小肠上皮细胞对铜的刺激敏感,铜可以有效促进细胞增殖,与对照组相比铜添加组细胞的增殖率显著升高,且当培养...
通过体外分离培养鸡小肠上皮细胞,在含10%血清的培养液中分别添加0、15.6、31.2、46.8和62.4μmol/L质量浓度的铜。结果表明:鸡小肠上皮细胞对铜的刺激敏感,铜可以有效促进细胞增殖,与对照组相比铜添加组细胞的增殖率显著升高,且当培养液中添加的铜质量浓度达到46.8μmol/L时鸡小肠上皮细胞的增殖率最高。且处理组各质量浓度间细胞数量差异极显著,各时间段间细胞数量差异极显著,质量浓度与时间的交互作用差异极显著。
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关键词
铜
鸡小肠上皮细胞
细胞
增殖
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职称材料
富硒乳酸菌对黄曲霉毒素B_(1)诱导鸡小肠上皮细胞凋亡的影响
被引量:
5
3
作者
李元辉
傅春妮
+4 位作者
李鹏程
彭玉凯
李留安
张建斌
秦顺义
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2021年第12期4702-4709,共8页
试验旨在探究富硒乳酸菌对黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))对鸡小肠上皮细胞(CSIEC)凋亡的影响。将体外培养的CSIEC细胞分为对照组(C)、AFB_(1)(300μmol/L AFB_(1))、AFB_(1)+0.01 Se(300μmol/L AFB_(1)+0.01μmol/L富硒乳酸菌,以Se计)、AFB...
试验旨在探究富硒乳酸菌对黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))对鸡小肠上皮细胞(CSIEC)凋亡的影响。将体外培养的CSIEC细胞分为对照组(C)、AFB_(1)(300μmol/L AFB_(1))、AFB_(1)+0.01 Se(300μmol/L AFB_(1)+0.01μmol/L富硒乳酸菌,以Se计)、AFB_(1)+0.05 Se和AFB_(1)+0.1 Se组,待细胞长至60%~70%汇合时,AFB_(1)+0.01 Se、AFB_(1)+0.05 Se和AFB_(1)+0.1 Se组培养液更换为含对应Se浓度的培养液,对照组和AFB_(1)组更换为正常培养液,8 h后向含AFB_(1)组加入300μmol/L AFB_(1),继续培养24 h。用CCK-8法检测细胞存活率,ELISA法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,TUNEL法检测细胞凋亡率,Western blotting检测线粒体通路和内质网通路相关蛋白Bcl-2、Bax、PERK、ATF4、CHOP、GRP78、p53和p21的表达。细胞存活率检测结果表明,与对照组相比,其余各组CSIEC存活率均极显著降低(P<0.01);与AFB_(1)组相比,加硒各组存活率均极显著升高(P<0.01)。LDH活性检测结果表明,与对照组相比,其余各组LDH活性均极显著升高(P<0.01);与AFB_(1)组相比,加硒各组LDH活性均极显著降低(P<0.01)。细胞凋亡率检测结果表明,与对照组相比,AFB_(1)组TUNEL阳性细胞数极显著升高(P<0.01),且与加硒各组差异均不显著(P>0.05)。Bcl-2/Bax表达量检测结果表明,与对照组相比,AFB_(1)组Bcl-2/Bax极显著降低(P<0.01),AFB_(1)+0.05 Se组显著升高(P<0.05)。内质网应激通路相关蛋白表达量检测结果表明,与对照组相比,AFB_(1)组PERK、CHOP、GRP78和p53的表达量均极显著升高(P<0.01);与AFB_(1)组相比,加硒各组PERK、GRP78表达量均极显著降低(P<0.01),AFB_(1)+0.05 Se和AFB_(1)+0.1 Se组CHOP和p53的表达量均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05)。因此,富硒乳酸菌能够缓解AFB_(1)诱导的CSIEC凋亡。
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关键词
富硒乳酸菌
黄曲霉毒素
鸡小肠上皮细胞
细胞
凋亡
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职称材料
鸡胚小肠上皮细胞的分离及原代培养研究
被引量:
14
4
作者
洪智敏
贾永杰
+2 位作者
瞿明仁
黎观红
刘思国
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期1164-1170,共7页
取18日龄的SPF鸡胚,分别采用组织块培养法、胰蛋白酶、胶原酶I和嗜热菌蛋白酶消化法分离和体外培养小肠上皮细胞。结果表明:组织块培养法所获得的上皮细胞纯度较低;胰蛋白酶消化后多为单细胞,细胞贴壁和生长能力较弱;胶原酶Ⅰ单独消化50...
取18日龄的SPF鸡胚,分别采用组织块培养法、胰蛋白酶、胶原酶I和嗜热菌蛋白酶消化法分离和体外培养小肠上皮细胞。结果表明:组织块培养法所获得的上皮细胞纯度较低;胰蛋白酶消化后多为单细胞,细胞贴壁和生长能力较弱;胶原酶Ⅰ单独消化50 min或嗜热菌蛋白酶单独消化110 min以及胶原酶Ⅰ、嗜热菌蛋白酶联合消化后均可得到大量隐窝细胞团块,经低速离心去除单细胞、差速贴壁除去成纤维细胞,可获得较纯的上皮细胞。分离的细胞接种培养12~24 h贴壁,48~72 h细胞团中的细胞向四周蔓延,形成一群群的细胞集落,6~7 d细胞汇合成片,成"铺路石样",细胞多呈扁平多角状,椭圆状,单层生长,边界清晰,互不重叠。经形态学观察、扫描电镜鉴定、碱性磷酸酶染色和免疫组化鉴定为上皮细胞。
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关键词
鸡小肠上皮细胞
分离
原代培养
鸡
胚
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职称材料
鸡胚小肠上皮细胞的体外分离培养和鉴定
被引量:
7
5
作者
詹康
左晓昕
+3 位作者
贡笑笑
陈银银
占今舜
赵国琦
《动物营养学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期2150-2156,共7页
本试验旨在提供鸡小肠上皮细胞的体外分离方法,为进一步研究鸡肠道疾病的致病机理、鸡肠道营养物质转运吸收与免疫机理提供模型。本试验采用组织块培养法来分离培养鸡小肠上皮细胞。运用刮除法、酶消化法、有限稀释法纯化鸡小肠上皮细...
本试验旨在提供鸡小肠上皮细胞的体外分离方法,为进一步研究鸡肠道疾病的致病机理、鸡肠道营养物质转运吸收与免疫机理提供模型。本试验采用组织块培养法来分离培养鸡小肠上皮细胞。运用刮除法、酶消化法、有限稀释法纯化鸡小肠上皮细胞。利用噻唑蓝(MTT)法来鉴定鸡小肠上皮细胞生长情况。通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测鸡小肠上皮细胞特异性基因的表达来鉴定鸡小肠上皮细胞。结果表明:1)采用组织块细胞培养法能够成功获得鸡小肠上皮细胞系。2)接种组织块8h内鸡小肠上皮细胞开始大量增殖。3)鸡小肠上皮细胞的生长曲线为"S"形,符合细胞增殖规律。4)传至第5代的鸡小肠上皮细胞体积开始变大,细胞形态模糊并开始衰老凋亡;细胞传代时进行接种,大量的细胞未贴壁。综上所述,采用在6孔板内接种鸡小肠组织快,能够获得具有稳定性的鸡小肠上皮细胞,为鸡肠道疾病致病机理、鸡肠道营养物质转运吸收和永生化鸡小肠上皮细胞提供细胞素材。
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关键词
鸡小肠上皮细胞
营养免疫
稳定性
永生化
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职称材料
题名
鼠李糖乳酸杆菌LG_A对鸡小肠上皮细胞β-防御素-9基因表达的影响
被引量:
14
1
作者
黎观红
洪智敏
贾永杰
易中华
瞿明仁
刘思国
机构
江西农业大学动物科技学院
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期634-641,共8页
基金
国家自然科学基金项目(30800791)
江西省青年科学家培养对象计划项目(赣科发计字[2010]209号)
文摘
本研究旨在研究益生性鼠李糖乳酸杆菌LGA对体外培养的鸡小肠上皮细胞β-防御素-9(AvBD9)表达的调节作用。选用鼠李糖乳酸杆菌LGA对体外培养的鸡小肠上皮细胞进行剂量依赖性及时间依赖性刺激实验,利用实时荧光定量PCR(fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)从mRNA水平研究刺激后上皮细胞AvBD9基因表达水平的差异。结果表明,不同浓度(2×105、2×106、2×107 cfu.mL-1)鼠李糖乳酸杆菌LGA均能上调AvBD9mRNA的表达,且在不同细菌浓度之间AvBD9mRNA的表达存在差异。热灭活鼠李糖乳杆菌LGA亦能上调AvBD9基因表达,且上调值显著高于活菌(P<0.05)。鼠李糖乳杆菌LGA刺激上皮细胞后AvBD9表达存在时间依赖关系,12h时AvBD9的表达达到峰值。Western blot检测结果显示,鼠李糖乳杆菌LGA刺激后的上皮细胞培养上清中存在AvBD9蛋白表达,表明AvBD9蛋白可以分泌到细胞外而发挥其生物学功能。益生性鼠李糖乳酸杆菌LGA与鸡肠道上皮细胞的相互作用过程中,鼠李糖乳酸杆菌LGA能够促进上皮细胞抗菌肽β-防御素-9的表达。本研究结果提示益生性乳杆菌可能通过促进肠道上皮抗菌肽的表达而发挥其益生作用。
关键词
β-防御素-9
鸡小肠上皮细胞
鼠李糖乳酸杆菌LGA
荧光定量PCR
Keywords
β-defensin-9
chicken small intestinal epithelial cells
Lactobacillus rhamnosus LGA
fluorescence quantitative PCR
分类号
S831.1 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
铜对鸡小肠上皮细胞增殖的影响
2
作者
刘立明
任清丹
机构
吉林农业科技学院
吉林省畜牧兽医科学研究院
出处
《饲料研究》
CAS
北大核心
2012年第12期56-57,共2页
文摘
通过体外分离培养鸡小肠上皮细胞,在含10%血清的培养液中分别添加0、15.6、31.2、46.8和62.4μmol/L质量浓度的铜。结果表明:鸡小肠上皮细胞对铜的刺激敏感,铜可以有效促进细胞增殖,与对照组相比铜添加组细胞的增殖率显著升高,且当培养液中添加的铜质量浓度达到46.8μmol/L时鸡小肠上皮细胞的增殖率最高。且处理组各质量浓度间细胞数量差异极显著,各时间段间细胞数量差异极显著,质量浓度与时间的交互作用差异极显著。
关键词
铜
鸡小肠上皮细胞
细胞
增殖
分类号
S831 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
富硒乳酸菌对黄曲霉毒素B_(1)诱导鸡小肠上皮细胞凋亡的影响
被引量:
5
3
作者
李元辉
傅春妮
李鹏程
彭玉凯
李留安
张建斌
秦顺义
机构
天津农学院动物科学与动物医学学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2021年第12期4702-4709,共8页
基金
天津市自然科学基金重点项目(20JCZDJC00170)
天津市“131”创新型人才团队建设项目(20180318)
+2 种基金
天津农学院研究生科研创新项目(2019XY022)
天津市科技帮扶提升重大工程项目(20ZYCGSN00260)
天津市高校“中青年骨干创新人才培养计划”人选资助项目。
文摘
试验旨在探究富硒乳酸菌对黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))对鸡小肠上皮细胞(CSIEC)凋亡的影响。将体外培养的CSIEC细胞分为对照组(C)、AFB_(1)(300μmol/L AFB_(1))、AFB_(1)+0.01 Se(300μmol/L AFB_(1)+0.01μmol/L富硒乳酸菌,以Se计)、AFB_(1)+0.05 Se和AFB_(1)+0.1 Se组,待细胞长至60%~70%汇合时,AFB_(1)+0.01 Se、AFB_(1)+0.05 Se和AFB_(1)+0.1 Se组培养液更换为含对应Se浓度的培养液,对照组和AFB_(1)组更换为正常培养液,8 h后向含AFB_(1)组加入300μmol/L AFB_(1),继续培养24 h。用CCK-8法检测细胞存活率,ELISA法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,TUNEL法检测细胞凋亡率,Western blotting检测线粒体通路和内质网通路相关蛋白Bcl-2、Bax、PERK、ATF4、CHOP、GRP78、p53和p21的表达。细胞存活率检测结果表明,与对照组相比,其余各组CSIEC存活率均极显著降低(P<0.01);与AFB_(1)组相比,加硒各组存活率均极显著升高(P<0.01)。LDH活性检测结果表明,与对照组相比,其余各组LDH活性均极显著升高(P<0.01);与AFB_(1)组相比,加硒各组LDH活性均极显著降低(P<0.01)。细胞凋亡率检测结果表明,与对照组相比,AFB_(1)组TUNEL阳性细胞数极显著升高(P<0.01),且与加硒各组差异均不显著(P>0.05)。Bcl-2/Bax表达量检测结果表明,与对照组相比,AFB_(1)组Bcl-2/Bax极显著降低(P<0.01),AFB_(1)+0.05 Se组显著升高(P<0.05)。内质网应激通路相关蛋白表达量检测结果表明,与对照组相比,AFB_(1)组PERK、CHOP、GRP78和p53的表达量均极显著升高(P<0.01);与AFB_(1)组相比,加硒各组PERK、GRP78表达量均极显著降低(P<0.01),AFB_(1)+0.05 Se和AFB_(1)+0.1 Se组CHOP和p53的表达量均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05)。因此,富硒乳酸菌能够缓解AFB_(1)诱导的CSIEC凋亡。
关键词
富硒乳酸菌
黄曲霉毒素
鸡小肠上皮细胞
细胞
凋亡
Keywords
selenium-enriched lactic acid bacteria
aflatoxin
chicken small intestinal epithelial cells
cell apoptosis
分类号
S831.7 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
鸡胚小肠上皮细胞的分离及原代培养研究
被引量:
14
4
作者
洪智敏
贾永杰
瞿明仁
黎观红
刘思国
机构
江西农业大学/江西省高等学校动物营养与饲料重点实验室
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
出处
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期1164-1170,共7页
基金
国家自然科学基金项目(30800791)
江西省青年科学家培养对象计划项目(赣科发计字[2010]209号)
文摘
取18日龄的SPF鸡胚,分别采用组织块培养法、胰蛋白酶、胶原酶I和嗜热菌蛋白酶消化法分离和体外培养小肠上皮细胞。结果表明:组织块培养法所获得的上皮细胞纯度较低;胰蛋白酶消化后多为单细胞,细胞贴壁和生长能力较弱;胶原酶Ⅰ单独消化50 min或嗜热菌蛋白酶单独消化110 min以及胶原酶Ⅰ、嗜热菌蛋白酶联合消化后均可得到大量隐窝细胞团块,经低速离心去除单细胞、差速贴壁除去成纤维细胞,可获得较纯的上皮细胞。分离的细胞接种培养12~24 h贴壁,48~72 h细胞团中的细胞向四周蔓延,形成一群群的细胞集落,6~7 d细胞汇合成片,成"铺路石样",细胞多呈扁平多角状,椭圆状,单层生长,边界清晰,互不重叠。经形态学观察、扫描电镜鉴定、碱性磷酸酶染色和免疫组化鉴定为上皮细胞。
关键词
鸡小肠上皮细胞
分离
原代培养
鸡
胚
Keywords
small intestinal epithelial cells
isolation
primary culture
chicken embryo
分类号
S831.1 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
鸡胚小肠上皮细胞的体外分离培养和鉴定
被引量:
7
5
作者
詹康
左晓昕
贡笑笑
陈银银
占今舜
赵国琦
机构
扬州大学动物科学与技术学院
出处
《动物营养学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期2150-2156,共7页
基金
江苏省高校优势学科建设工作资助项目(PAPD)
文摘
本试验旨在提供鸡小肠上皮细胞的体外分离方法,为进一步研究鸡肠道疾病的致病机理、鸡肠道营养物质转运吸收与免疫机理提供模型。本试验采用组织块培养法来分离培养鸡小肠上皮细胞。运用刮除法、酶消化法、有限稀释法纯化鸡小肠上皮细胞。利用噻唑蓝(MTT)法来鉴定鸡小肠上皮细胞生长情况。通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测鸡小肠上皮细胞特异性基因的表达来鉴定鸡小肠上皮细胞。结果表明:1)采用组织块细胞培养法能够成功获得鸡小肠上皮细胞系。2)接种组织块8h内鸡小肠上皮细胞开始大量增殖。3)鸡小肠上皮细胞的生长曲线为"S"形,符合细胞增殖规律。4)传至第5代的鸡小肠上皮细胞体积开始变大,细胞形态模糊并开始衰老凋亡;细胞传代时进行接种,大量的细胞未贴壁。综上所述,采用在6孔板内接种鸡小肠组织快,能够获得具有稳定性的鸡小肠上皮细胞,为鸡肠道疾病致病机理、鸡肠道营养物质转运吸收和永生化鸡小肠上皮细胞提供细胞素材。
关键词
鸡小肠上皮细胞
营养免疫
稳定性
永生化
Keywords
chicken intestinal epithelial cell
nutrition and immunity
stability
immortalize
分类号
S852.2 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鼠李糖乳酸杆菌LG_A对鸡小肠上皮细胞β-防御素-9基因表达的影响
黎观红
洪智敏
贾永杰
易中华
瞿明仁
刘思国
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
14
在线阅读
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职称材料
2
铜对鸡小肠上皮细胞增殖的影响
刘立明
任清丹
《饲料研究》
CAS
北大核心
2012
0
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职称材料
3
富硒乳酸菌对黄曲霉毒素B_(1)诱导鸡小肠上皮细胞凋亡的影响
李元辉
傅春妮
李鹏程
彭玉凯
李留安
张建斌
秦顺义
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2021
5
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职称材料
4
鸡胚小肠上皮细胞的分离及原代培养研究
洪智敏
贾永杰
瞿明仁
黎观红
刘思国
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
14
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下载PDF
职称材料
5
鸡胚小肠上皮细胞的体外分离培养和鉴定
詹康
左晓昕
贡笑笑
陈银银
占今舜
赵国琦
《动物营养学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
7
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