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含有鸡体偏嗜性密码子的H5亚型禽流感病毒HA基因的优化构建及其DNA疫苗体外瞬时表达研究
被引量：
3
1
作者
姜永萍
李呈军
+5 位作者
张洪波
步志高
张芳芳
邓国华
于康震
陈化兰
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期441-444,449,共5页
不同物种间细胞在蛋白翻译过程中具有密码子使用的偏嗜性,鸡与A型流感病毒的密码子使用频率存在着明显差异.为此,利用寡核苷酸合成、重叠延伸PCR及限制酶切法构建了密码子优化的表达A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]HA蛋白...
不同物种间细胞在蛋白翻译过程中具有密码子使用的偏嗜性,鸡与A型流感病毒的密码子使用频率存在着明显差异.为此,利用寡核苷酸合成、重叠延伸PCR及限制酶切法构建了密码子优化的表达A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]HA蛋白的基因optiHA5,并将其插入CMV启动子表达载体pCI构建了H5亚型DNA疫苗质粒pCIoptiHA5,将含有GD/1/96(H5N1)野生型HA基因的质粒pCIHA5和pCIoptiHA5分别转染293T细胞,间接免疫荧光检测转染后24～48h293T细胞中瞬时表达的HA抗原蛋白;Westemblot证实上述2种表达质粒均可正确表达H5亚型HA抗原蛋白,结果表明密码子优化的基因optiHA5体外瞬时表达水平显著高于野生型HA基因.这一结果为进一步开展SPF鸡免疫保护效果的比较研究奠定了基础.
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关键词
H5亚型禽流感病毒
HA基因
DNA疫苗
鸡体偏嗜性密码子
偏
嗜
性
寡核苷酸
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职称材料
题名
含有鸡体偏嗜性密码子的H5亚型禽流感病毒HA基因的优化构建及其DNA疫苗体外瞬时表达研究
被引量：
3
1
作者
姜永萍
李呈军
张洪波
步志高
张芳芳
邓国华
于康震
陈化兰
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
农业部畜牧兽医总站
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期441-444,449,共5页
基金
国有重点基础研究规划"973"(G1999011902)项目资助
文摘
不同物种间细胞在蛋白翻译过程中具有密码子使用的偏嗜性,鸡与A型流感病毒的密码子使用频率存在着明显差异.为此,利用寡核苷酸合成、重叠延伸PCR及限制酶切法构建了密码子优化的表达A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]HA蛋白的基因optiHA5,并将其插入CMV启动子表达载体pCI构建了H5亚型DNA疫苗质粒pCIoptiHA5,将含有GD/1/96(H5N1)野生型HA基因的质粒pCIHA5和pCIoptiHA5分别转染293T细胞,间接免疫荧光检测转染后24～48h293T细胞中瞬时表达的HA抗原蛋白;Westemblot证实上述2种表达质粒均可正确表达H5亚型HA抗原蛋白,结果表明密码子优化的基因optiHA5体外瞬时表达水平显著高于野生型HA基因.这一结果为进一步开展SPF鸡免疫保护效果的比较研究奠定了基础.
关键词
H5亚型禽流感病毒
HA基因
DNA疫苗
鸡体偏嗜性密码子
偏
嗜
性
寡核苷酸
Keywords
HA gene
codon optimization
over-lapping extension PCR
indirect i mmunofluorescence
Western blot analysis
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
S852.659 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
含有鸡体偏嗜性密码子的H5亚型禽流感病毒HA基因的优化构建及其DNA疫苗体外瞬时表达研究
姜永萍
李呈军
张洪波
步志高
张芳芳
邓国华
于康震
陈化兰
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
3
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