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鸡白痢沙门菌和鸡伤寒沙门菌PCR-RFLP鉴别 被引量:7
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作者 涂玉蓉 陈建红 +3 位作者 任涛 张济培 司兴奎 牛森 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第6期80-83,共4页
根据鸡白痢沙门菌和鸡伤寒沙门菌flic基因可变区两端的保守序列设计1对引物,PCR扩增出约866 bp的产物,用Hinp1I对PCR产物进行酶切,经RFLP分析区分鸡白痢沙门菌和鸡伤寒沙门菌。利用该技术对1株鸡白痢沙门菌标准株及2株鸡伤寒沙门菌标准... 根据鸡白痢沙门菌和鸡伤寒沙门菌flic基因可变区两端的保守序列设计1对引物,PCR扩增出约866 bp的产物,用Hinp1I对PCR产物进行酶切,经RFLP分析区分鸡白痢沙门菌和鸡伤寒沙门菌。利用该技术对1株鸡白痢沙门菌标准株及2株鸡伤寒沙门菌标准株进行分子鉴别,结果与预计的RFLP模式相符,证明该方法可行。在此基础上对分离株进行鉴别,证明分离株均属于鸡白痢沙门菌。 展开更多
关键词 白痢沙门 鸡伤寒沙门菌 PCR-RFLP flic基因 鉴别
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鸡白痢与鸡伤寒沙门菌双重PCR方法的建立和初步应用 被引量:5
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作者 朱春红 陶志云 +5 位作者 刘宏祥 徐文娟 章双杰 李非 唐燕飞 蒋莲华 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第8期74-76,共3页
分析不同血清型/生物型沙门菌全基因组序列筛选出鸡白痢和鸡伤寒沙门菌特异性基因组序列,设计两对引物,建立双重PCR方法鉴别检测鸡白痢和鸡伤寒沙门菌不同生物型,并进行初步的临床应用。双重PCR方法结果显示,鸡白痢沙门菌显示417 bp条带... 分析不同血清型/生物型沙门菌全基因组序列筛选出鸡白痢和鸡伤寒沙门菌特异性基因组序列,设计两对引物,建立双重PCR方法鉴别检测鸡白痢和鸡伤寒沙门菌不同生物型,并进行初步的临床应用。双重PCR方法结果显示,鸡白痢沙门菌显示417 bp条带,鸡伤寒沙门菌显示417 bp和636 bp两个条带,而阴性对照未出现条带,与预期设计相符。双重PCR体系对56株不同血清型沙门菌鉴定结果与细菌学分离的血清型鉴定结果完全一致,说明本试验建立的双重PCR体系特异性良好,应用上述方法检测鸡场疑似20份临床样本,结果发现8株鸡白痢沙门菌阳性,1株鸡伤寒沙门菌阳性。上述结果表明,已建立双重PCR方法特异性检测鸡白痢和鸡伤寒沙门菌。本试验为鸡白痢和鸡伤寒不同生物型沙门菌的检测提供了一种简洁、敏感、特异的新方法。 展开更多
关键词 白痢沙门 鸡伤寒沙门菌 检测 双重-PCR
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鸡白痢、鸡伤寒沙门菌分子分型方法的验证 被引量:4
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作者 龚建森 徐敬潇 +4 位作者 张笛 祁克宗 徐步 窦新红 董永毅 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第1期166-172,共7页
为验证鸡白痢、鸡伤寒沙门菌分子分型方法的准确性,本研究以3株鸡白痢、鸡伤寒沙门菌国际参考菌株和306株国内分离株为研究对象,采用5种已知的分子分型方法开展验证性实验。结果发现,基于特定基因可变区的2种分型方法具有良好的特异性,... 为验证鸡白痢、鸡伤寒沙门菌分子分型方法的准确性,本研究以3株鸡白痢、鸡伤寒沙门菌国际参考菌株和306株国内分离株为研究对象,采用5种已知的分子分型方法开展验证性实验。结果发现,基于特定基因可变区的2种分型方法具有良好的特异性,其检测结果与生化分型结果一致,而3种基于特定基因单核苷酸多态性的分型方法则出现假阳性或假阴性的结果。上述结果表明,鸡白痢、鸡伤寒沙门菌分子分型方法的准确性仍需进一步验证。 展开更多
关键词 白痢沙门 鸡伤寒沙门菌 单核苷酸多态性 生化鉴定 分子分型
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一株高致病性鸡伤寒沙门菌的分离与鉴定 被引量:2
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作者 李书光 王玉茂 +3 位作者 管宇 刘吉山 李玲 沈志强 《中国家禽》 北大核心 2013年第16期47-49,共3页
对某蛋鸡场送检的10日龄左右病死雏鸡,进行了病理剖检,并开展了病原微生物分离培养、PCR鉴定、生化鉴定、血清学分型、动物回归、药物敏感性试验。结果显示,分离菌株为革兰氏阴性小杆菌,能够与鸡白痢鸡伤寒沙门菌阳性血清产生明显的凝集... 对某蛋鸡场送检的10日龄左右病死雏鸡,进行了病理剖检,并开展了病原微生物分离培养、PCR鉴定、生化鉴定、血清学分型、动物回归、药物敏感性试验。结果显示,分离菌株为革兰氏阴性小杆菌,能够与鸡白痢鸡伤寒沙门菌阳性血清产生明显的凝集,PCR结果证实该分离株为鸡伤寒沙门菌;动物回归试验中,分离的鸡沙门菌具有较强的致病性;药物敏感性试验表明,分离株对替米考星、磷霉素、阿莫西林耐药,使用敏感药物氟苯尼考对鸡群沙门菌的控制取得了良好的治疗效果。 展开更多
关键词 鸡伤寒沙门菌 分离鉴定 药敏试验 回归试验
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海兰褐蛋鸡感染鸡伤寒沙门菌的诊断 被引量:1
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作者 司振书 殷国政 +1 位作者 路建彪 李玉保 《家禽科学》 2016年第9期7-9,共3页
某蛋鸡养殖场90日龄海兰褐蛋鸡疑似沙门菌感染,为确定病原,对该鸡群随机采血,通过平板凝集试验进行鸡白痢-鸡伤寒沙门菌的血清学诊断,同时,无菌采取病鸡肝脏进行了细菌分离培养、生化鉴定及药敏试验。结果,血清阳性率达54.5%,分离菌在... 某蛋鸡养殖场90日龄海兰褐蛋鸡疑似沙门菌感染,为确定病原,对该鸡群随机采血,通过平板凝集试验进行鸡白痢-鸡伤寒沙门菌的血清学诊断,同时,无菌采取病鸡肝脏进行了细菌分离培养、生化鉴定及药敏试验。结果,血清阳性率达54.5%,分离菌在麦康凯琼脂上形成无色、透明、有光泽的圆形菌落,能发酵甘露醇、甘露糖、蕈糖、果糖、麦芽糖,不能发酵乳糖、棉子糖、蔗糖,鸟氨酸脱羧试验阴性,符合鸡伤寒沙门菌的生化特性。分离菌对头孢吡肟、头孢噻肟、氟苯尼考及丁胺卡那敏感,而对环丙沙星、氧氟沙星及强力霉素等耐药。表明该鸡群受到了鸡伤寒沙门菌的感染,采取了综合防治措施,病情得到有效控制。 展开更多
关键词 海兰褐 鸡伤寒沙门菌 分离鉴定
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鸡伤寒沙门菌减毒株1009ΔspiCΔcrp的保护效力评价 被引量:2
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作者 程瞾 杨美鑫 +4 位作者 殷俊磊 康喜龙 胡茂志 潘志明 焦新安 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期67-70,共4页
目的为研制安全有效的鸡伤寒沙门菌减毒活疫苗,该实验对鸡伤寒沙门菌减毒株1009ΔspiCΔcrp的安全性及保护力进行观察。方法以1×108集落形成单位的1009ΔspiCΔcrp对3日龄雏鸡口服免疫,在7 d后进行再次免疫,测定雏鸡的体质量变化... 目的为研制安全有效的鸡伤寒沙门菌减毒活疫苗,该实验对鸡伤寒沙门菌减毒株1009ΔspiCΔcrp的安全性及保护力进行观察。方法以1×108集落形成单位的1009ΔspiCΔcrp对3日龄雏鸡口服免疫,在7 d后进行再次免疫,测定雏鸡的体质量变化、血清抗体水平和细胞因子水平,并对SG9强毒株攻毒后的保护力进行评价。结果免疫组鸡的体质量增长与对照组无明显差异,血清IgG水平持续上升并显著高于对照组,白细胞介素4(IL-4)、IL-6和IL-1β的水平也升高。以SG9强毒株攻击后,免疫组的保护率为100%,而对照组为20%。HE染色结果显示,免疫组鸡无病变,而对照组鸡脏器病变明显。结论1009ΔspiCΔcrp具有良好的安全性和免疫原性,是防治鸡伤寒理想的疫苗候选株。 展开更多
关键词 鸡伤寒沙门菌 减毒活疫苗 cAMP受体蛋白 1009ΔspiCΔcrp 安全性及保护力
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新型凝集技术快速检测鸡白痢、鸡伤寒沙门菌 被引量:3
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作者 杨磊 赵广英 窦文超 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1994-1999,共6页
为探求鸡白痢、鸡伤寒沙门菌快速检测的新型凝集技术,尝试用3种有机活性染料与抗体分别修饰二氧化硅活性微球制成免疫彩色二氧化硅微球(ICSN),构建快速检测鸡白痢、鸡伤寒沙门菌新型凝集技术。利用反相微乳法制备彩色二氧化硅纳米... 为探求鸡白痢、鸡伤寒沙门菌快速检测的新型凝集技术,尝试用3种有机活性染料与抗体分别修饰二氧化硅活性微球制成免疫彩色二氧化硅微球(ICSN),构建快速检测鸡白痢、鸡伤寒沙门菌新型凝集技术。利用反相微乳法制备彩色二氧化硅纳米微球(CSN),用扫描电镜表征形貌特征和分散程度,通过凝集现象表征对鸡白痢、鸡伤寒沙门菌的检测效果。结果表明该新型凝集技术灵敏度好,其凝集结果醒目、直观、易于肉眼判别,且耗用抗体不到常规凝集试验的1/500,对目标菌的检测范围为10^2~10^9cfu·mL-1;重复性和稳定性好,4℃放置28d后,凝集效果与放置前无显著差异;具有较好的特异性和准确性。用ICSN构建的新型凝集技术具有灵敏、经济、稳定、简便、快速、准确等优点,不仅适用于快速检测鸡白痢、鸡伤寒沙门菌,还可为其它致病微生物快速检测提供基础模型。 展开更多
关键词 有机活性染料 免疫彩色二氧化硅微球 新型凝集技术 快速检测 白痢沙门 鸡伤寒沙门菌
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双重放大酶免疫传感器检测鸡白痢鸡伤寒沙门菌 被引量:1
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作者 胡春梅 窦文超 赵广英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1991-1997,共7页
为探求新型鸡白痢鸡伤寒沙门菌快速检测技术,本研究首次利用多壁碳纳米管与离子液体[BMIM]PF6修饰四通道丝网印刷碳电极,制成双重放大信号检测鸡白痢鸡伤寒沙门菌的酶免疫传感器。用原子力显微镜表征其表观形态,循环伏安法监测其电化学... 为探求新型鸡白痢鸡伤寒沙门菌快速检测技术,本研究首次利用多壁碳纳米管与离子液体[BMIM]PF6修饰四通道丝网印刷碳电极,制成双重放大信号检测鸡白痢鸡伤寒沙门菌的酶免疫传感器。用原子力显微镜表征其表观形态,循环伏安法监测其电化学特性。结果表明,在优化的检测条件下,免疫电极对目标菌的线性响应范围为103~109 cfu.mL-1,检出限为3.93×102 cfu.mL-1(S/N=3),4℃放置28d后,响应电流为初始值的90.15%,具有良好的稳定性、特异性、重现性和准确性。多壁碳纳米管与离子液体结合制备的鸡白痢鸡伤寒沙门菌酶免疫传感器实现了检测信号的双重放大,检测灵敏度高,离子液体有助于保持酶标抗体的活性,延长免疫电极的有效时间。依据该方法构建的酶免疫传感器为快速检测其它致病菌酶免疫传感器的研究提供了良好的参照模型。 展开更多
关键词 快速检测 白痢鸡伤寒沙门菌 酶免疫传感器 双重放大 多壁碳纳米管 离子液体
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SG97A平衡致死系统的构建及其初步应用
9
作者 耿士忠 陈晓娟 +1 位作者 潘志明 焦新安 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2243-2250,共8页
敲除鸡伤寒沙门菌(SG)减毒疫苗株97Aasd基因,构建宿主载体平衡致死系统并表达新城疫病毒(NDV)F蛋白,构建二价活菌苗。PCR扩增两段位于asd基因外侧的序列作为等位基因,以氯霉素抗性(CmR)基因替代asd基因,构建自杀质粒pGMB151Δasd::CmR,... 敲除鸡伤寒沙门菌(SG)减毒疫苗株97Aasd基因,构建宿主载体平衡致死系统并表达新城疫病毒(NDV)F蛋白,构建二价活菌苗。PCR扩增两段位于asd基因外侧的序列作为等位基因,以氯霉素抗性(CmR)基因替代asd基因,构建自杀质粒pGMB151Δasd::CmR,通过E.coliχ7213与SG97A固相杂交,将质粒转入SG97A,反向筛选获得SG97AΔasd::CmR,利用质粒pCP20去除CmR后,DAP的依赖菌株命名为SG97AΔasd。将含asd基因的质粒pYA3334转入SG97AΔasd中构建宿主载体平衡致死系统,并表达NDV-F蛋白。结果表明,通过等位基因重组方法,成功构建SG97AΔasd及宿主载体平衡致死系统,重组菌能够表达NDV-F蛋白,并能在鸡体内诱导产生特异性抗体。本研究成功构建SG97AΔasd宿主载体平衡致死系统,并表达NDV-F蛋白及其诱导宿主产生抗体,为应用该系统构建二价活菌苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡伤寒沙门菌 asd基因 宿主载体平衡致死系统 NDV-F蛋白
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动物医学进展2011年1~12期总目次
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《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第12期I0001-I0020,共20页
关键词 动物模型 PRRSV 奶牛乳房炎 医学进展 圆环病毒 柔嫩艾美耳球虫 艾美尔属 鸡伤寒沙门菌 禽流感病毒 流感病毒群 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪附红细胞体 猪血虫体 分离鉴定 副猪嗜血杆 目次
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