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鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒的初步应用 被引量：1
1
作者 徐环 刘云涛 +3 位作者 刘涛 赵玉龙 李卫东 唐荣宏 《中国畜禽种业》 2024年第5期122-127,共6页
为建立鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒,该研究以灭活纯化的鸡传染性法氏囊病病毒作为包被抗原,连续制备了3批次鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒中试产品。结果表明:该试剂盒对IBDV阳性血清检测的灵敏度可达1∶6400;... 为建立鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒,该研究以灭活纯化的鸡传染性法氏囊病病毒作为包被抗原,连续制备了3批次鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒中试产品。结果表明:该试剂盒对IBDV阳性血清检测的灵敏度可达1∶6400;对鸡新城疫病毒、鸡减蛋下降综合征病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡抗网状内皮组织增生症病毒、鸡马立克氏病病毒、禽流感病毒H5亚型、鸡传染性贫血病毒阳性血清和SPF鸡阴性血清均无交叉反应;批内和批间重复性的变异系数分别在4.21%和5.07%以内。应用该试剂盒和某进口同类ELISA试剂盒对258份临床白羽肉鸡血清样品同时进行对比检测,相对敏感性、相对特异性和符合率分别为98.44%、96.97%和98.06%。可见,该试验建立的鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒具有有操作简便、特异性强、灵敏度高的特点。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病 血清学诊断 间接ELISA 临床应用
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鸡传染性法氏囊病病毒VP5的原核表达、多抗制备及初步应用
2
作者 韩金泽 牛鑫鑫 +12 位作者 王国栋 葛成菲 张玉龙 黄萌萌 许萌萌 于航博 刘润杭 韩京哲 吴子文 于晓雪 高玉龙 李留安 祁小乐 《中国动物检疫》 CAS 2024年第2期92-98,共7页
传染性法氏囊病(infectious bursal disease virus,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)引起的一种主要危害雏鸡的急性传染病。在IBDV编码的5个蛋白中,VP5是IBDV唯一可以缺失基因的蛋白。本研究克隆了IBD... 传染性法氏囊病(infectious bursal disease virus,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)引起的一种主要危害雏鸡的急性传染病。在IBDV编码的5个蛋白中,VP5是IBDV唯一可以缺失基因的蛋白。本研究克隆了IBDV优势流行毒株的VP5蛋白编码基因,利用原核表达系统表达了VP5蛋白,通过免疫BALB/c小鼠制备VP5多抗,并对多抗进行了鉴定和检测不同IBDV毒株的应用。结果显示,IBDV优势流行毒株的VP5蛋白实现了可溶性表达,分子质量约为17 kDa;制备的VP5多抗特异性良好,ELISA效价可达1:64000;VP5多抗可通过IFA和Western Blot检测识别IBDV rHLJ0504-HT株,不识别VP5基因缺失株。结果表明:试验成功表达了IBDV优势流行毒株的VP5蛋白,并制备了VP5多抗;VP5多抗可对IBDV及其VP5编码基因缺失毒株进行鉴别检测。本研究对于IBDV检测方法的建立以及VP5编码基因功能的进一步研究提供了物质基础。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 VP5 表达 多抗 应用
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2022年我国鸡传染性法氏囊病病毒遗传进化分析 被引量：1
3
作者 郑玉闯 徐环 +3 位作者 冯敬敬 付旭彬 金天明 唐荣宏 《动物医学进展》 北大核心 2024年第11期70-75,共6页
近年来,由传染性法氏囊病病毒(IBDV)变异株引起的非典型传染性法氏囊病(IBD)给我国养禽业带来了新的威胁。为了解IBDV变异株流行规律,对2022年全国范围内的3000份疑似IBD样品进行分子流行病学调查,结果表明16.9%(507/3000)检测为IBDV阳... 近年来,由传染性法氏囊病病毒(IBDV)变异株引起的非典型传染性法氏囊病(IBD)给我国养禽业带来了新的威胁。为了解IBDV变异株流行规律,对2022年全国范围内的3000份疑似IBD样品进行分子流行病学调查,结果表明16.9%(507/3000)检测为IBDV阳性,随机选择354份阳性样本进行基因型鉴定,变异株占比达89.0%(315/354)。选择5株代表毒株VP2基因进行遗传进化分析,结果表明代表毒株与国内外流行变异毒株处于同一遗传进化分支,与新型变异株SHG19的氨基酸同源性高达98.9%~99.3%;且FJ220325-1毒株氨基酸关键位点在七肽区326位由丝氨酸变异为亮氨酸,提示IBD流行特征正在发生变化,但抗原性及毒力是否发生变化需要进一步验证。研究丰富了IBDV变异株的流行病学数据,可为做好相关防控工作提供理论参考。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病 VP 2基因 分子流行病学调查 遗传进化分析 鸡
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鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白研究进展 被引量：19
4
作者 祁小乐 王笑梅 +1 位作者 高玉龙 高宏雷 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期656-660,共5页
鸡传染性法氏囊病（Infectious bursal disease，IBD）是由鸡传染性法氏囊病病毒（Infectious bursal disease virus，IBDV）引起的一种急性、高度接触性传染病，主要危害3～6周龄的雏鸡。该病于1957年首次发现于美国Gumboro地区。50年... 鸡传染性法氏囊病（Infectious bursal disease，IBD）是由鸡传染性法氏囊病病毒（Infectious bursal disease virus，IBDV）引起的一种急性、高度接触性传染病，主要危害3～6周龄的雏鸡。该病于1957年首次发现于美国Gumboro地区。50年来，IBD一直威胁着养禽业的发展。免疫抑制、抗原变异，特别是超强毒株（vvIBDV）的出现，使得该病的防控形势更加严峻。国际兽疫局（OIE）已将IBD列为“影响社会经济的重要疾病”。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 VP2蛋白 接触性传染病 VIRUS 国际兽疫局 免疫抑制 抗原变异 超强毒株
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鸡传染性法氏囊病病毒vp2基因在杆状病毒表达系统中的表达及免疫原性研究 被引量：8
5
作者 高玉龙 高宏雷 +4 位作者 王晓艳 李俊山 邓小芸 刘伟 王笑梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期427-431,共5页
将鸡传染性法氏囊病病毒超强毒Gx株vp2基因克隆到载体pFastBac HTA中,构建重组转座载体pFVP2,然后将其转化DH10Bac感受态大肠杆菌,将vp2基因整合到Bacmid穿梭载体中,获得重组穿梭载体BacmidVP2;通过脂质体转染将其转染Sf9昆虫细胞,获得... 将鸡传染性法氏囊病病毒超强毒Gx株vp2基因克隆到载体pFastBac HTA中,构建重组转座载体pFVP2,然后将其转化DH10Bac感受态大肠杆菌,将vp2基因整合到Bacmid穿梭载体中,获得重组穿梭载体BacmidVP2;通过脂质体转染将其转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBacVP2。用Western blot和间接免疫荧光试验分析表明IBDV VP2蛋白在Sf9昆虫细胞获得正确表达,所表达的重组VP2蛋白分子量约50 Ku。以rBacVP2感染Sf9细胞裂解物免疫3周龄SPF鸡,在免疫后7 d可检测到ELISA抗体;免疫后14 d可检测到琼脂免疫扩散抗体。攻毒试验表明,初次免疫后14 d对IBDV超强毒株的攻击保护率为75%,2次免疫后14 d对其的攻击保护率为100%。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 VP2基因 杆状病毒 免疫原性
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鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因突变对病毒体外复制的影响 被引量：5
6
作者 祁小乐 高立 +10 位作者 吴关 邓小芸 余飞 张礼洲 秦立廷 高玉龙 王永强 高宏雷 刘娣 华育平 王笑梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1577-1583,共7页
为了进一步了解影响鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)复制效率和致病力的分子基础,作者在序列分析的基础上,利用反向遗传操作技术,针对VP2上2个重要的氨基酸位点(222和279),修饰和拯救了相应的2株突变病毒,并研究了突变病毒在体内外的生物学... 为了进一步了解影响鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)复制效率和致病力的分子基础,作者在序列分析的基础上,利用反向遗传操作技术,针对VP2上2个重要的氨基酸位点(222和279),修饰和拯救了相应的2株突变病毒,并研究了突变病毒在体内外的生物学特性。复制动力学数据显示,VP2的222位由酪氨酸突变为脯氨酸可将IBDV在鸡胚成纤维细胞(CEF)上的复制滴度提高6倍以上,而279位氨基酸对病毒复制效率无显著影响。SPF鸡的感染试验显示,222位和279位氨基酸与IBDV的致病力没有关系。本研究首次报道了VP2 222位和279位氨基酸与IBDV复制效率和致病力的关系,有助于更加全面地了解IBDV的基因功能,也将为新型IBDV疫苗的设计提供依据和思路。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 VP2基因 复制 致病力 反向遗传
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鸡传染性法氏囊病病毒dsRNA的提纯与应用 被引量：8
7
作者 孙建和 陆苹 +1 位作者 赵渝 李晖 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期311-314,共4页
用传染性法氏囊病病毒 (IBDV)攻击 4周龄的非免疫鸡 ,以超速离心法从感染鸡法氏囊组织中分离、纯化IBDV ,应用蛋白酶K消化和Trizol(异硫氰酸胍 -酚 -氯仿法 )处理 2种方法从纯化的IBDV中抽提dsRNA。通过低熔点琼脂糖割胶 -酚 -氯仿抽提... 用传染性法氏囊病病毒 (IBDV)攻击 4周龄的非免疫鸡 ,以超速离心法从感染鸡法氏囊组织中分离、纯化IBDV ,应用蛋白酶K消化和Trizol(异硫氰酸胍 -酚 -氯仿法 )处理 2种方法从纯化的IBDV中抽提dsRNA。通过低熔点琼脂糖割胶 -酚 -氯仿抽提可获得纯化的dsRNA ,研究发现应用蛋白酶K消化获得的纯化RNA产量高 ,用其作模板进行RT -PCR可扩增IBDV基因组全长cDNAA片段和B片段、VP2基因和VP2 - 4 - 3基因。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 DSRNA 提纯 应用
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鸡传染性法氏囊病病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量：4
8
作者 王永强 祁小乐 +6 位作者 高宏雷 高玉龙 宇文延青 林欢 秦立廷 宋修庆 王笑梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期65-68,共4页
本试验根据GenBank中鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)基因组设计一对针对病毒vp5基因的引物和一条特异性Taq Man探针,建立了一种快速检测IBDV核酸载量的Taq Man荧光定量RT-PCR方法。通过对反应条件和反应体系的优化,使得该方法在108拷贝/μL... 本试验根据GenBank中鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)基因组设计一对针对病毒vp5基因的引物和一条特异性Taq Man探针,建立了一种快速检测IBDV核酸载量的Taq Man荧光定量RT-PCR方法。通过对反应条件和反应体系的优化,使得该方法在108拷贝/μL～101拷贝/μL范围内具有良好的线性关系。能够灵敏地检测初始模板中30个拷贝的病毒核酸,其灵敏度是常规RT-PCR检测方法的100倍。该方法不与其它的禽源病毒发生非特异性反应,并且具有良好的重复性,为IBDV的定性定量检测提供了有效的工具。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 荧光定量RT-PCR TAQ Man水解探针
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鸡传染性法氏囊病病毒BJQ902株在DF-1细胞系上增殖工艺研究 被引量：5
9
作者 章振华 李林 +6 位作者 景小冬 张建伟 沈佳 史爱华 郑小兰 黄凤军 姜北宇 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第10期2775-2779,共5页
试验旨在通过DF-1细胞增殖获得高效价的鸡传染性法氏囊病病毒（infectious bursal disease virus,IBDV）抗原。通过病毒接种量、收毒时间、接毒时间、温度和维持液血清浓度5个培养条件的筛选和优化,对IBDV BJQ902株在DF-1细胞上的增殖... 试验旨在通过DF-1细胞增殖获得高效价的鸡传染性法氏囊病病毒（infectious bursal disease virus,IBDV）抗原。通过病毒接种量、收毒时间、接毒时间、温度和维持液血清浓度5个培养条件的筛选和优化,对IBDV BJQ902株在DF-1细胞上的增殖工艺进行了研究。结果表明,IBDV BJQ902株在DF-1细胞上最佳增殖条件为：在37℃条件下培养,接毒量在0.01%～0.1%之间,接种时间为细胞传代后生长48～72h,维持液血清浓度为1%～2%,收毒时间为病毒接种后60～72h。在此培养条件下增殖病毒毒价在108.3～108.7 TCID50/0.1mL之间。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 BJQ902株 DF-1细胞 毒价
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鸡传染性法氏囊病病毒B节段对病毒致病性的影响 被引量：3
10
作者 高立 李凯 +5 位作者 祁小乐 高玉龙 高宏雷 王永强 孔宪刚 王笑梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期510-514,共5页
为研究鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)3个不同亚群B节段对病毒致病性的影响,本实验将IBDV HLJ0504超强毒株的A节段分别与3个亚群(Ⅰ亚群Gt株、Ⅱ亚群HLJ0504株及Ⅲ亚群HuB-1株)B节段进行组合,拯救了rH4AGtB、rH4AH4B和rH4AHuB3种重组病毒... 为研究鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)3个不同亚群B节段对病毒致病性的影响,本实验将IBDV HLJ0504超强毒株的A节段分别与3个亚群(Ⅰ亚群Gt株、Ⅱ亚群HLJ0504株及Ⅲ亚群HuB-1株)B节段进行组合,拯救了rH4AGtB、rH4AH4B和rH4AHuB3种重组病毒。动物实验结果表明,rH4AHuB引起雏鸡死亡率为80%、rH4AH4B次之为73.3%、rH4AGtB仅为33.3%。此外,rH4AHuB在体内复制的能力明显高于rH4AGtB(p<0.05),但与rH4AH4B无明显差异(p>0.05)。以上结果表明,IBDV B节段影响病毒的致病性,不同亚群B节段对IBDV致病性的影响作用不同。其中,第II、III亚群的B节段能够提高病毒在体内的复制能力,从而使IBDV的致病性增强,而第I亚群的B节段则降低了病毒在体内的复制能力,使IBDV的致病性减弱。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 B节段 复制 致病性
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鸡传染性法氏囊病病毒BC6/85株VP2基因的原核表达、纯化及鉴定 被引量：6
11
作者 刘丹 杨承槐 +4 位作者 吴华伟 李启红 高金源 陈建 郎洪武 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第5期17-21,共5页
为获得可用于鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体检测的重组抗原VP2蛋白,根据GenBank中发表的IBDV VP2序列设计一对特异性引物,应用RT-PCR技术克隆IBDV经典标准攻毒株(BC6/85株)的VP2基因,插入质粒pET-32a中构建重组表达质粒pET-32a-VP2,经... 为获得可用于鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体检测的重组抗原VP2蛋白,根据GenBank中发表的IBDV VP2序列设计一对特异性引物,应用RT-PCR技术克隆IBDV经典标准攻毒株(BC6/85株)的VP2基因,插入质粒pET-32a中构建重组表达质粒pET-32a-VP2,经IPTG诱导后获得了以包涵体形式表达的重组蛋白。重组蛋白纯化后,Western-blot检测表明具有良好的反应原性。本研究为下步建立IBDV抗体的间接ELISA方法及新型疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 VP2基因 克隆 原核表达
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鸡传染性法氏囊病病毒JSNJ株的分离鉴定及其部分特性研究 被引量：3
12
作者 王占伟 刘茂军 +13 位作者 冯志新 熊祺琰 王海燕 白昀 唐应华 吴叙苏 甘源 刘冬霞 王丽 白方方 孔猛 韦艳娜 刘冬阳 邵国青 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第5期47-51,共5页
从江苏南京疑似传染性法氏囊病病毒感染的鸡场采集病料,通过临床症状、病理剖检变化、人工感染、SPF鸡胚接种、琼脂扩散试验和PCR扩增鉴定等,证实了该鸡场发生了鸡传染性法氏囊病,且从病料中分离到了纯净的传染性法氏囊病病毒。同时,证... 从江苏南京疑似传染性法氏囊病病毒感染的鸡场采集病料,通过临床症状、病理剖检变化、人工感染、SPF鸡胚接种、琼脂扩散试验和PCR扩增鉴定等,证实了该鸡场发生了鸡传染性法氏囊病,且从病料中分离到了纯净的传染性法氏囊病病毒。同时,证实该毒株的毒力较强,具有标准毒株的理化特性,免疫原性也比较好。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 分离鉴定 敏感性试验 免疫原性
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鸡传染性法氏囊病病毒VP3基因的克隆与原核表达 被引量：3
13
作者 宋铁彬 白江 +2 位作者 马博 王连江 陈福勇 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第11期29-30,共2页
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 VP3基因 克隆与原核表达 RNA病毒 IBDV A节段 基因组 VP2
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鸡传染性法氏囊病病毒VP5缺失标记疫苗的生物学特性研究 被引量：2
14
作者 高立 李凯 +5 位作者 祁小乐 高玉龙 高宏雷 王永强 孔宪刚 王笑梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期659-662,共4页
为评价鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP5缺失病毒株rHLJ0504HT△VP5的生物学特性,本研究首先对该缺失病毒与其亲本病毒rHLJ0504HT(vvIBDV HLJ0504 253/284双位点突变细胞适应病毒)进行了体外复制动力学比较研究。结果表明,VP5缺失病毒复... 为评价鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP5缺失病毒株rHLJ0504HT△VP5的生物学特性,本研究首先对该缺失病毒与其亲本病毒rHLJ0504HT(vvIBDV HLJ0504 253/284双位点突变细胞适应病毒)进行了体外复制动力学比较研究。结果表明,VP5缺失病毒复制滴度明显低于亲本病毒(p<0.05)。动物实验结果表明,该缺失病毒可以诱导机体产生良好的免疫应答反应,免疫后10 d,其抗体水平与亲本病毒相当;并能够抵抗同源或异源超强毒的攻击,为免疫鸡提供100%保护。此外,该缺失病毒对免疫鸡无明显的致病性;VP5缺失病毒免疫组与未免疫组禽流感血凝抑制效价相当,不存在明显差异(p>0.05),表明该病毒对免疫鸡无免疫抑制作用,不影响其它疫苗的免疫效果。而且,VP5的缺失可以作为鉴定该缺失病毒的生物学标记。以上结果表明,rHLJ0504HT△VP5是一株安全有效的IBDV标记候选疫苗株。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 VP5缺失 标记疫苗
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鸡传染性法氏囊病病毒(ZJ2000)基因组B节段全长的克隆及其毒力位点的分析预测 被引量：2
15
作者 魏永伟 郑江涛 +2 位作者 王连胜 李龙 于涟 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期252-256,共5页
将本实验室保存的ZJ2000株囊毒加生理盐水研磨后接种9～10日龄鸡胚增殖病毒,收集尿囊液透析纯化,用蛋白酶K法提取病毒基因组dsRNA。通过RT-PCR获得基因组B节段全长的cDNA,并将其克隆到PUC18-T载体中进行测序。同时,本研究对GenBank中登... 将本实验室保存的ZJ2000株囊毒加生理盐水研磨后接种9～10日龄鸡胚增殖病毒,收集尿囊液透析纯化,用蛋白酶K法提取病毒基因组dsRNA。通过RT-PCR获得基因组B节段全长的cDNA,并将其克隆到PUC18-T载体中进行测序。同时,本研究对GenBank中登录的IBDV基因组B节段进行了大量分析,发现B节段的5′-NCR存在1个基因高突变区,并且ZJ2000株的5′-NCR可形成独特的二级结构。经过对VP1一级结构的大量分析,筛选出B节段中17个可能对IBDV毒力产生影响的候选毒力位点,并在此基础上又对这些位点氨基酸的特性进行统计分析,进一步探讨了这些位点对VP1功能影响的可能性,为深入研究IBDV基因组B节段对其毒力的影响作了有益的探索。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 基因组B节段全长 克隆
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鸡传染性法氏囊病病毒VP3蛋白的原核表达及其B细胞抗原表位鉴定 被引量：1
16
作者 赵坤 郑玉姝 +4 位作者 赵德明 赵朴 赵恒章 常新耀 王选年 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期958-962,共5页
为鉴定鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP3蛋白中的B细胞抗原表位,本研究将IBDV的VP3基因亚克隆于pET-28a中,构建了表达重组质粒pETVP3,经IPTG诱导在E. coli BL21(DE3)中表达了重组蛋白(rVP3)。Western blot鉴定表明,rVP3能被IBDV抗血清特... 为鉴定鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP3蛋白中的B细胞抗原表位,本研究将IBDV的VP3基因亚克隆于pET-28a中,构建了表达重组质粒pETVP3,经IPTG诱导在E. coli BL21(DE3)中表达了重组蛋白(rVP3)。Western blot鉴定表明,rVP3能被IBDV抗血清特异性识别。同时,根据IBDVVP3的氨基酸序列,合成覆盖VP3全序列的重叠多肽,并与载体蛋白BSA藕联制备多肽人工结合抗原。Peptide-ELISA和Dot-ELISA检测结果表明VP3中有2个线性表位可以被已制备的单克隆抗体(MAb)识别,即728PRDWDRLPYLNL739和982PKPKPKPNAPTQ993;Dot-ELISA结果显示,在VP3中还存在另外4个线性多克隆抗体识别位点:818LANAPQAGSKSQRA831,851QREKD TRISKKMETMGIYFATP872,876ALNGHRGPSPGQLKYWQNTREI897和961QMKDLLLTAMEMK973。这些抗原表位的鉴定为开发IBD表位疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 VP3蛋白 原核表达 重叠多肽 B细胞抗原表位
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抗鸡传染性法氏囊病病毒抗体Fab的表达及其中和活性的测定 被引量：1
17
作者 张瑛杰 尹杰超 +5 位作者 李天鹤 周兵 徐鹏飞 荆燕 任桂萍 李德山 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期866-870,共5页
为表达抗鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体Fab并检测其中和活性,本研究将抗IBDV抗体的轻链(L)和重链片段(Fd)基因分别克隆于p ET-27b(+)载体中,并转化于大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达。将L和Fd片段包涵体蛋白变性后等量混合于复性液... 为表达抗鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体Fab并检测其中和活性,本研究将抗IBDV抗体的轻链(L)和重链片段(Fd)基因分别克隆于p ET-27b(+)载体中,并转化于大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达。将L和Fd片段包涵体蛋白变性后等量混合于复性液中,制备Fab并对其进行活性鉴定。结果显示L和Fd蛋白相对分子质量大小分别为25 ku和28 ku。Western blot和ELISA检测结果表明,获得的抗体Fab大小约为50 ku,并且与VP2蛋白和不同病毒株均具有特异性结合能力。体外中和试验结果表明,获得的IBDV抗体Fab具有中和活性,可以有效阻断IBDV(B87株)对鸡胚成纤维细胞(DF1)的感染。本实验获得的IBDV抗体Fab有望成为治疗IBD的候选生物制剂,为研制治疗IBD抗体制剂奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 FAB抗体 共复性 中和活性 治疗性抗体
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鸡传染性法氏囊病病毒细胞嗜性及受体研究现状 被引量：3
18
作者 张礼洲 祁小乐 王笑梅 《中国家禽》 北大核心 2014年第20期2-5,共4页
鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)强、弱毒株在侵染宿主细胞上存在着明显的细胞嗜性差异,普遍认为,这种细胞嗜性差异主要由宿主细胞的不同受体所介导。迄今为止,已报道4种IBDV受体相关分子:SIg M免疫球蛋白... 鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)强、弱毒株在侵染宿主细胞上存在着明显的细胞嗜性差异,普遍认为,这种细胞嗜性差异主要由宿主细胞的不同受体所介导。迄今为止,已报道4种IBDV受体相关分子:SIg M免疫球蛋白、热休克蛋白90(c Hsp90)、整合素α4β1、Toll样受体(TLR)。本文对IBDV细胞嗜性及细胞受体相关研究进行了综述。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 细胞嗜性 受体
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反向遗传学技术在鸡传染性法氏囊病病毒研究中的应用进展 被引量：3
19
作者 沈巍巍 陈果 +1 位作者 何秀苗 韦平 《中国家禽》 北大核心 2016年第17期45-49,共5页
反向遗传学技术是研究鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)的一种新手段,从"基因-性状"层面对基因突变、节段重排等生物学特性的改变进行解读,可突破常规的对IBDV从"性状-基因"进行研究的... 反向遗传学技术是研究鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)的一种新手段,从"基因-性状"层面对基因突变、节段重排等生物学特性的改变进行解读,可突破常规的对IBDV从"性状-基因"进行研究的局限性。本文主要对IBDV反向遗传操作系统的建立及其在IBDV细胞嗜性、毒力分子基础、致病机制及致弱机理等重要生物特性中的应用进行综述。 展开更多
关键词 反向遗传技术 鸡传染性法氏囊病病毒 细胞嗜性 毒力相关分子
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鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因植物表达载体的构建 被引量：2
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作者 吴建祥 于涟 龚辉 《浙江农业大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第6期644-648,共5页
以含鸡传染性法氏囊病病毒(杭州分离株,HZ96)VP2基因的质粒PBS为模板,根据其序列设计引物进行PCR扩增,得到1.5kb左右长的VP2基因产物;用Kpn 和Sal 酶切纯化的PCR产物;将纯化的酶切产物在T4DNA连接酶的作用下定向克隆到植物表达载体Cambi... 以含鸡传染性法氏囊病病毒(杭州分离株,HZ96)VP2基因的质粒PBS为模板,根据其序列设计引物进行PCR扩增,得到1.5kb左右长的VP2基因产物;用Kpn 和Sal 酶切纯化的PCR产物;将纯化的酶切产物在T4DNA连接酶的作用下定向克隆到植物表达载体Cambia1301水稻胚乳特异性启动子GT1下游,并经PCR、酶切和测序鉴定。植物重组表达载体经三亲交配已导入根癌农杆菌中。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 VP2基因 植物表达载体 水稻胚乳特异性启动子GTl
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