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题名重组鸡β-防御素6基因的表达和生物学特性的研究
被引量：15
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作者
韩宗玺
廖文艳
王瑞琴
邵昱昊
马得莹
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机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／禽传染病研究室
东北农业大学动物营养研究所
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出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期476-480,共5页
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基金
国家自然科学基金(30600435)
NOVUS国际科学研究基金
+1 种基金
黑龙江省教育厅科研重点项目(No.1153lz05)
黑龙江省博士后启动基金
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文摘
从鸡骨髓细胞中分离提取总RNA,经过RT-PCR扩增出鸡β-防御素-6(AvBD6)基因。经克隆测序表明扩增出的cDNA碱基数为204bp,编码68个氨基酸残基。根据已发现的禽β-防御素和鼠β-防御素-6的氨基酸序列构建系统进化树。发现鸡AvBD6氨基酸序列与鸡AvBD7氨基酸序列同源性最高,为62.7%。将该基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上,进行原核表达。SDS-PAGE电泳表明,表达的重组鸡AvBD6融合蛋白分子量约为32ku。对该重组蛋白进行纯化与体外抗菌活性的测定。结果表明,重组鸡AvBD6融合蛋白对多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌有较高抗菌活性,对大肠杆菌的抗菌活性较弱,对猪霍乱沙门氏菌无抗菌活性。重组鸡AvBD6蛋白对上述细菌的最小抑菌浓度范围为31.25μg/mL～250μg/mL。此外,重组鸡AvBD6蛋白对温度和酸碱度有较高的稳定性。
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关键词
鸡β-防御素-6
遗传进化
抗菌活性
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Keywords
chicken β-defensin 6
evolutionary
antimicrobial activity
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分类号
S852.42
[农业科学—基础兽医学]
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