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G蛋白偶联受体120调控NLRP3炎症小体参与多囊卵巢综合征炎症反应的分子机制探究
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作者 阳丽 吴湘 +3 位作者 李昂 吴菲 何薇薇 张珂 《实用妇产科杂志》 北大核心 2025年第3期216-222,共7页
目的:探讨G蛋白偶联受体120(GPR120)调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体介导多囊卵巢综合征(PCOS)炎症反应的机制。方法:45只野生型雌性C57BL/6J小鼠随机分为:对照组、模型组、TUG-891组,每组15只。模型组和TUG-891... 目的:探讨G蛋白偶联受体120(GPR120)调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体介导多囊卵巢综合征(PCOS)炎症反应的机制。方法:45只野生型雌性C57BL/6J小鼠随机分为:对照组、模型组、TUG-891组,每组15只。模型组和TUG-891组皮下植入35 d睾酮(T)连续释放药丸诱导PCOS模型,对照组接受安慰剂药丸。TUG-891组小鼠在植入T 21 d后每天腹腔注射TUG-891治疗,模型组与对照组腹腔注射等量0.9%氯化钠液。实验结束时(第35天)处死小鼠,收集血液样本和卵巢组织。通过免疫荧光染色检测卵巢组织中GPR120、NLRP3蛋白表达,天狼星红染色检测卵巢纤维化,免疫印迹分析检测组织中纤维化因子α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和炎症因子NLRP3、Toll样受体4(TLR4)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达。从雌性小鼠中分离卵巢颗粒细胞(GCs),原代GCs接种在含10%胎牛血清和1%青霉素-链霉素溶液的DMEM-F12中培养。将细胞分为对照组、TUG-891组、T组和T+TUG-891组。分别通过MTT法和流式细胞术分析GCs活力和凋亡水平。结果:与模型组比较,TUG-891组小鼠的体质量、卵巢重量、卵巢系数和排卵前卵泡数显著增加(P<0.05),以及性激素T、雌二醇(E 2)、促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平和闭锁卵泡数量显著降低(P<0.05)。TUG-891组卵巢组织中天狼星红染色和α-SMA、MMP2、TGF-β1的相对表达较模型组显著降低(P<0.05)。与模型组比较,TUG-891组卵巢组织中GRP120表达显著增加(P<0.05)、NLRP3表达显著减弱(P<0.05)。体外实验中,与T组比较,T+TUG-891组GCs增殖明显增加(P<0.05),以及GCs凋亡和GCs中NLRP3、TLR4和TNF-α蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论:GPR120激动剂TUG-891可能通过抑制NLRP3炎性体的产生,减轻高雄激素血症诱导的PCOS小鼠慢性轻度炎症,进而保护小鼠的卵巢和卵泡的生长发育能力。 展开更多
关键词 G蛋白受体120 核苷结合寡聚化结构域样受体蛋白3 多囊卵巢综合征 炎症
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Wnt通路中亮氨酸重复序列G蛋白偶联受体5/6在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及意义
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作者 李宣 王文鹏 +2 位作者 周敏 徐晓蕊 高吉照 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期595-602,共8页
目的研究富含亮氨酸重复序列G蛋白偶联受体(LGR)5/6在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达及意义。方法选取39例经诱导化疗后第33天骨髓达完全缓解的ALL患儿,诱导化疗前作为初发组,经诱导化疗第33天骨髓达完全缓解时作为缓解组,根据危... 目的研究富含亮氨酸重复序列G蛋白偶联受体(LGR)5/6在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达及意义。方法选取39例经诱导化疗后第33天骨髓达完全缓解的ALL患儿,诱导化疗前作为初发组,经诱导化疗第33天骨髓达完全缓解时作为缓解组,根据危险度分层再分为低危(n=16)、中危(n=9)和高危组(n=14)。30例免疫性血小板减少症的患儿为对照组。留取初发组、缓解组及对照组骨髓血3 ml,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测骨髓细胞中LGR5和LGR6 mRNA的相对表达,采用Western blot法检测骨髓细胞中LGR5和LGR6蛋白的相对表达。结果初发组LGR5 mRNA(0.850±0.279)及蛋白(0.083±0.027)的相对表达均低于缓解组(mRNA:1.418±0.324,蛋白:0.130±0.033)与对照组(mRNA:1.541±0.409,蛋白:0.138±0.041)(P_(mRNA)=0.000,P_(蛋白)=0.000),初发组LGR6 mRNA(2.444±1.160)及蛋白(0.298±0.088)的相对表达均高于缓解组(mRNA:0.886±0.390,蛋白:0.111±0.039)与对照组(mRNA:0.928±0.373,蛋白:0.094±0.037)(P_(mRNA)=0.000,P_(蛋白)=0.000)。在初发组中,低危患儿LGR5 mRNA(1.004±0.284)及蛋白(0.097±0.030)的相对表达均高于中危(mRNA:0.728±0.239,蛋白:0.071±0.022)和高危患儿(mRNA:0.752±0.222,蛋白:0.074±0.020)(P_(mRNA)=0.012,P_(蛋白)=0.016),低危患儿LGR6 mRNA(1.822±0.979)及蛋白(0.245±0.077)的相对表达均低于中危(mRNA:2.954±1.039,蛋白:0.338±0.081)和高危患儿(mRNA:2.827±1.165,蛋白:0.333±0.075)(P_(mRNA)=0.016,P_(蛋白)=0.004)。在缓解组中,低危患儿LGR5 mRNA(1.597±0.329)及蛋白(0.150±0.035)的相对表达均高于中危(mRNA:1.277±0.288,蛋白:0.117±0.029)和高危患儿(mRNA:1.305±0.253,蛋白:0.116±0.023)(P_(mRNA)=0.012,P_(蛋白)=0.006),低危患儿LGR6 mRNA(0.662±0.334)及蛋白(0.089±0.034)的相对表达均低于中危(mRNA:1.066±0.273,蛋白:0.130±0.033)和高危患儿(mRNA:1.027±0.405,蛋白:0.126±0.038)(P_(mRNA)=0.007,P_(蛋白)=0.007)。结论LGR5和LGR6的表达与儿童ALL的发生和危险度有关,其具体作用机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 WNT通路 亮氨重复序列G蛋白受体
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Hedgehog蛋白对人视网膜微血管内皮细胞功能的影响及其可能的信号通路 被引量:2
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作者 李扬 胡钦瑞 +2 位作者 王斌 夏会卡 张小虎 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期713-718,共6页
目的探讨Hedgehog蛋白对血-视网膜内屏障中人视网膜微血管内皮细胞(HRMEC)功能的影响及其可能的信号通路。方法取在正常培养基中培养的HRMEC,分为正常对照组、0.5μmol/L激动剂组和1.0μmol/L激动剂组,分别加入终浓度为0、0.5和1.0μmo... 目的探讨Hedgehog蛋白对血-视网膜内屏障中人视网膜微血管内皮细胞(HRMEC)功能的影响及其可能的信号通路。方法取在正常培养基中培养的HRMEC,分为正常对照组、0.5μmol/L激动剂组和1.0μmol/L激动剂组,分别加入终浓度为0、0.5和1.0μmol/L的Hedgehog激动剂purmorphamine;取高糖培养基中培养的HRMEC,分为高糖对照组、1.5μmol/L抑制剂组和2.5μmol/L抑制剂组,分别加入终浓度为0、1.5和2.5μmol/L的Smoothed抑制剂Erismodegib。采用MTS细胞增生实验和Transwell细胞迁移试验检测各组HRMEC增生A 490值和相对迁移率。采用Western blot方法检测各组细胞鸟苷酸结合蛋白偶联受体(GPCRs)通路下游PLCγ1、Akt和Erk蛋白磷酸化水平变化。结果高糖对照组细胞Hedgehog蛋白相对表达量为6.24±0.11,明显高于正常对照组的1.00±0.00,差异有统计学意义(t=667.573,P<0.001)。0.5μmol/L激动剂组和1.0μmol/L激动剂组A 490值分别为1.349±0.050和1.422±0.053,相对迁移率分别为2.34±0.14和3.59±0.32,明显高于正常对照组的1.203±0.101和1.00±0.00,差异均有统计学意义(均P<0.01)。1.5μmol/L抑制剂组和2.5μmol/L抑制剂组细胞A 490值分别为0.849±0.010和0.737±0.030,相对迁移率分别为0.43±0.02和0.27±0.01,明显低于高糖对照组的1.000±0.040和1.00±0.00,差异均有统计学意义(均P<0.01)。0.5μmol/L激动剂组和1.0μmol/L激动剂组PLCγ1磷酸化比值、Akt磷酸化比值和Erk磷酸化比值均明显高于正常对照组,1.5μmol/L抑制剂组和2.5μmol/L抑制剂组PLCγ1磷酸化比值、Akt磷酸化比值和Erk磷酸化比值均明显低于高糖对照组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论高糖诱导HRMEC中Hedgehog蛋白表达,Hedgehog蛋白可能通过调节GPCRs通路中PLCγ1、Akt和Erk磷酸化水平来调节HRMEC的功能。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 Hedgehog蛋白 鸟苷酸结合蛋白偶联受体通路 人视网膜微血管内皮细胞
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基于转录组测序探讨宝心艾维西木口服液对斑马鱼心力衰竭的影响
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作者 霍仕霞 铁晓璐 +5 位作者 张云 李治建 尹海龙 董雨薇 赵军 尹强 《中成药》 北大核心 2025年第8期2753-2758,共6页
目的探讨宝心艾维西木口服液对斑马鱼心力衰竭的作用及机制。方法以AB野生型及Tg(cmlc2:EGFP)斑马鱼为研究对象,设置空白组、模型组、地高辛组、宝心艾维西木口服液组。采用盐酸维拉帕米建立斑马鱼心力衰竭模型,选取相应尾数置于显微镜... 目的探讨宝心艾维西木口服液对斑马鱼心力衰竭的作用及机制。方法以AB野生型及Tg(cmlc2:EGFP)斑马鱼为研究对象,设置空白组、模型组、地高辛组、宝心艾维西木口服液组。采用盐酸维拉帕米建立斑马鱼心力衰竭模型,选取相应尾数置于显微镜下拍照并进一步分析斑马鱼心包面积、静脉淤血面积、静脉窦-动脉球(SV-BA)距离、心率、短轴缩短率(FS)、射血分数(LVEF)、血流速度变化;观察心肌细胞凋亡、心脏组织形态变化;通过转录组测序预测宝心艾维西木口服液抗心力衰竭活性的相关信号通路,并利用RT-qPCR法检测信号通路相关基因的表达。结果与模型组比较,宝心艾维西木口服液中、高剂量组斑马鱼心包面积、静脉淤血面积、SV-BA距离、心肌细胞凋亡数均降低(P<0.01);心率、FS、LVEF、血流速度均升高(P<0.05,P<0.01);心脏壁厚度有不同程度的改善。通过KEGG、GO富集分析发现,差异基因富集在Apelin信号通路、G蛋白偶联受体结合生物过程,且宝心艾维西木口服液可调控该通路基因的异常表达。结论宝心艾维西木口服液对维拉帕米致斑马鱼心力衰竭具有一定的改善作用,该作用与其抑制心肌细胞凋亡、调节Apelin信号通路及G蛋白偶联受体结合生物过程相关。 展开更多
关键词 宝心艾维西木口服液 心力衰竭 斑马鱼 转录组测序 Apelin信号通路 G蛋白受体结合 细胞凋亡
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CARMA3调控NF-κB信号通路激活的研究进展 被引量:2
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作者 周洋 郑文燕 +3 位作者 胡帝宇 童智子 蒋松宏 王怡丹 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期149-154,共6页
含半胱天冬酶募集结构域的膜相关鸟苷酸激酶蛋白3(caspase recruitment domain and membrane-associated guanylate kinase-like domain protein 3,CARMA3)属于CARMA家族,是一个新型的骨架蛋白。CARMA3通过调控NF-κB信号通路的激活,影... 含半胱天冬酶募集结构域的膜相关鸟苷酸激酶蛋白3(caspase recruitment domain and membrane-associated guanylate kinase-like domain protein 3,CARMA3)属于CARMA家族,是一个新型的骨架蛋白。CARMA3通过调控NF-κB信号通路的激活,影响细胞的周期进程、增殖和信号转导,从而影响癌症的发生和细胞应答。论文介绍了NF-κB信号通路的激活过程、G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)的配体、DNA损伤和感染可激活CARMA3介导的NF-κB信号通路、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的活性水平受CARMA3介导的NF-κB信号通路的影响、A20负调控CARMA3介导的NF-κB信号通路,以及CARMA3与癌症发生的关联,旨在为基于NF-κB信号通路的细胞周期进程、增殖和细胞应答方面的研究提供参考。 展开更多
关键词 含半胱天冬酶募集结构域的膜相关鸟苷激酶蛋白3(CARMA3) NF-ΚB G蛋白受体(GPCRs) 血管内皮生长因子(VEGF)
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