鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子小鼠体内的表达分析

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作者 王增产 张小花 +3 位作者 万涛 王李英 刘湘 汤华 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期332-334,共3页

目的:分析鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子(Ornithine decarboxylase antizyme inhibitor,AZI)在小鼠体内的表达情况。方法:RT-PCR,Northern blot,免疫组化染色。结果:RT-PCR,Northern blot揭示AZT基因(Oazin)的表达是全身性的,即各器官都表达... 目的:分析鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子(Ornithine decarboxylase antizyme inhibitor,AZI)在小鼠体内的表达情况。方法:RT-PCR,Northern blot,免疫组化染色。结果:RT-PCR,Northern blot揭示AZT基因(Oazin)的表达是全身性的,即各器官都表达。特别是脑,心,肾脏,肌肉,胸腺,睾丸。免疫组化染色显示AZT蛋白在心瓣膜细胞,肾小管周围的间质细胞以及肝细胞的间质细胞中高表达。结论:用RT-PCR,Northern blot以及免疫组化染色法揭示了AZT在RNA和蛋白水平小鼠体内中的表达情况。 展开更多

关键词 鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子 表达

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siRNA干扰鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1的表达抑制黑素瘤细胞增殖 被引量：1

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作者 何玲 韩钰 +2 位作者 刘梦瑶 蔡富强 王艳林 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期414-418,共5页

目的:研究siRNA干扰鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1(ornithine decarboxylase antizyme inhibitor-1,OAZI-1)的表达对小鼠黑素瘤B16-F1细胞增殖的影响。方法:构建OAZI-1特异性siRNA表达质粒psilencer2.1-U6/OAZI-1及对照psilenc-er2.1-U6/s... 目的:研究siRNA干扰鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1(ornithine decarboxylase antizyme inhibitor-1,OAZI-1)的表达对小鼠黑素瘤B16-F1细胞增殖的影响。方法:构建OAZI-1特异性siRNA表达质粒psilencer2.1-U6/OAZI-1及对照psilenc-er2.1-U6/scrambled质粒,脂质体转染法将质粒转染入B16-F1细胞,Western blotting和定量PCR检测B16-F1细胞中OAZI-1的表达。MTT法和流式细胞术检测psilencer2.1-U6/OAZI-1对B16-F1细胞增殖和细胞周期的影响;MTT法检测干扰OAZI-1表达后B16-F1细胞对抗肿瘤药物紫杉醇(docetaxel)的敏感性。结果:成功获得稳定转染psilencer2.1-U6/OAZI-1质粒的B16-F1细胞(B16/OAZI-1细胞),B16/OAZI-1细胞中OAZI-1 mRNA和蛋白表达分别为阴性对照B16/scrambled细胞的25.0%和18.9%。干扰OAZI-1的表达抑制B16-F1细胞的增殖,G0/G1期细胞比例增加[(57.0±0.8)%vs(63.5±0.7)%,P<0.01],而S期和G2/M期细胞比例减少[(31.5±0.7)%vs(27.5±0.3)%,P<0.05;(11.5±0.3)%vs(9.1±0.6)%,P<0.01]。干扰OAZI-1的表达能降低B16-F1细胞对紫杉醇的敏感性。结论:siRNA干扰OAZI-1的表达能抑制黑素瘤B16-F1细胞的增殖,并降低其对紫杉醇的敏感性。 展开更多

关键词 鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1 RNA干扰技术 黑素瘤细胞

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鸟氨酸脱羧酶抗酶1基因的结构和功能 被引量：2

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作者 马容 康波 +1 位作者 姜冬梅 何珲 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1453-1458,共6页

鸟氨酸脱羧酶抗酶1(OAZ1)基因可通过特殊的+1移码机制翻译全长的功能蛋白。研究发现,OAZ1能与鸟氨酸脱羧酶(ODC)结合并降解ODC,负调控细胞内多胺的水平;OAZ1还能降解Cyclin D1、Cyclin E1和Smad1周期蛋白,阻滞细胞周期;此外,近年来研究... 鸟氨酸脱羧酶抗酶1(OAZ1)基因可通过特殊的+1移码机制翻译全长的功能蛋白。研究发现,OAZ1能与鸟氨酸脱羧酶(ODC)结合并降解ODC,负调控细胞内多胺的水平;OAZ1还能降解Cyclin D1、Cyclin E1和Smad1周期蛋白,阻滞细胞周期;此外,近年来研究表明,OAZ1还具有抗肿瘤效应和调控动物繁殖的功能。抗酶抑制因子能竞争性结合ODC-OAZ1复合体中的OAZ1,从而阻止ODC降解;天门冬酰胺也能通过抑制OAZ1的翻译来调节ODC的活性。本文就OAZ1基因结构和功能的研究现状作一综述。 展开更多

关键词 鸟氨酸脱羧酶抗酶1 多胺 细胞周期 肿瘤 繁殖

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人鸟氨酸脱羧酶抗酶1突变基因的克隆与原核表达 被引量：1

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作者 蔡富强 韩钰 王艳林 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期149-153,共5页

克隆人鸟氨酸脱羧酶抗酶1(Homo sapiensornithine decarboxylase antizyme 1,HOAZ1)开放性阅读框+1核糖体移码位点缺失的突变基因,构建突变基因的原核表达质粒,分离纯化其原核表达的重组蛋白。采用巢式-PCR和重叠延伸-PCR技术,从人非小... 克隆人鸟氨酸脱羧酶抗酶1(Homo sapiensornithine decarboxylase antizyme 1,HOAZ1)开放性阅读框+1核糖体移码位点缺失的突变基因,构建突变基因的原核表达质粒,分离纯化其原核表达的重组蛋白。采用巢式-PCR和重叠延伸-PCR技术,从人非小细胞肺癌细胞株A549的cDNA中获得人类鸟氨酸脱羧酶抗酶1开放性阅读框+1核糖体移码(+1RF)位点缺失突变的基因序列(DM-HOAZ1)。将该序列克隆到原核表达载体pET-28a(+)后,转化表达菌Rosseta(DE3)感受态细胞。阳性克隆用IPTG诱导重组蛋白表达,然后在尿素变性条件下经Ni-NTA树脂亲和层析纯化重组HOAZ1。原核表达和纯化的HOAZ1重组蛋白用Western Blot鉴定。结果显示,成功获得HOAZ1开放阅读框中+1RF位点缺失的突变基因和该突变基因的原核表达质粒pET-28a(+)/DM-HOAZ1;用pET-28a(+)/DM-HOAZ1转化大肠杆菌后,HOAZ-1可被IPTG诱导性高表达,且表达量随诱导时间延长递增;原核表达的HOAZ1可用Ni-NTA树脂亲和层析有效纯化。建立了原核表达和分离纯化HOAZ1蛋白的试验方法,为进一步研究HOAZ1的功能和临床应用奠定了基础。 展开更多

关键词 鸟氨酸脱羧酶抗酶1 突变 原核表达

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棉花黄萎病菌鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白基因VdOAZ的功能分析 被引量：5

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作者 宋雯 王春巧 +2 位作者 俞燕 高峰 黄家风 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期101-113,共13页

【目的】明确棉花黄萎病菌中鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白(OAZ)基因(VdOAZ)的功能。【方法】以大丽轮枝菌野生型菌株V592的基因组DNA和cDNA为模板,对VdOAZ基因全长进行克隆并测序。构建针对VdOAZ基因的敲除载体和互补载体,通过农杆菌介导的遗... 【目的】明确棉花黄萎病菌中鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白(OAZ)基因(VdOAZ)的功能。【方法】以大丽轮枝菌野生型菌株V592的基因组DNA和cDNA为模板,对VdOAZ基因全长进行克隆并测序。构建针对VdOAZ基因的敲除载体和互补载体,通过农杆菌介导的遗传转化筛选VdOAZ基因敲除菌株和和互补菌株。以野生型菌株V592为对照,对VdOAZ基因敲除突变体和互补菌株的菌落生长速率、产孢量、微菌核产量及对棉花的致病力进行测定;通过实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应测定致病相关的其他基因在VdOAZ基因敲除突变体中的表达量,及亚精胺诱导条件下,V592菌株中VdOAZ基因及致病相关的其他基因的相对表达量。【结果】从棉花黄萎病菌中克隆到VdOAZ基因的全长为1 006 bp,具有2个开放阅读框(Open reading frame,ORF),ORF2编码的蛋白具有OAZ所特有的ODC-AZ保守结构域。与野生型菌株V592和互补菌株相比,VdOAZ基因敲除突变体的菌落生长速率降低、微菌核产量及产孢量明显减少,对棉花的致病力下降,表明VdOAZ基因与大丽轮枝菌分生孢子和微菌核的产生有关,并参与大丽轮枝菌致病。在VdOAZ基因敲除突变体中,VdPKAC1、VMK1、VdNLP1、VdNLP2和VdSge1基因表达量显著上调;V592菌株经亚精胺诱导培养后,VdOAZ基因的表达量显著上调,而上述5个致病相关基因的表达量均明显下调,表明VdOAZ基因对其表达具有负调控作用。【结论】VdOAZ基因响应多胺水平改变,通过调控VdPKAC1、VMK1、VdNLP1、VdNLP2、VdSge1的表达影响大丽轮枝菌孢子产生、微菌核形成和致病过程。 展开更多

关键词 大丽轮枝菌 鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白基因(OAZ) 产孢 微菌核 致病力

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皮质酮对大鼠再生肝鸟氨酸脱羧酶及抗酶基因表达的影响 被引量：1

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作者 索世英 曹兰菊 +1 位作者 马建敏 宁黔冀 《四川动物》 CSCD 北大核心 2008年第5期937-938,共2页

以部分肝切除诱导的雄性SD大鼠(180～200g)早期再生肝为材料,用RT-PCR法分析皮质酮处理后再生肝鸟氨酸脱羧酶及抗酶mRNA水平变化。结果表明,皮质酮对鸟氨酸脱羧酶mRNA水平具有剂量依赖性抑制作用;10、20mg/kg体重皮质酮对抗酶mRNA水平... 以部分肝切除诱导的雄性SD大鼠(180～200g)早期再生肝为材料,用RT-PCR法分析皮质酮处理后再生肝鸟氨酸脱羧酶及抗酶mRNA水平变化。结果表明,皮质酮对鸟氨酸脱羧酶mRNA水平具有剂量依赖性抑制作用;10、20mg/kg体重皮质酮对抗酶mRNA水平影响不大,40mg/kg处理可促进其转录。 展开更多

关键词 皮质酮 鸟氨酸脱羧酶 抗酶 再生肝

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鸟氨酸脱羧酶抗酶基因功能的研究进展

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作者 刘津津 柯赛赛 +3 位作者 何珲 姜冬梅 胡熙璕 康波 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第1期15-17,共3页

鸟氨酸脱羧酶抗酶(OAZ)具有调控细胞多胺代谢、诱导细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖的功能。近年来研究发现,鸟氨酸脱羧酶抗酶在动物繁殖过程中也具有重要调控作用。就鸟氨酸脱羧酶抗酶基因功能的研究现状做一综述,为进一步深入研究OAZ功能... 鸟氨酸脱羧酶抗酶(OAZ)具有调控细胞多胺代谢、诱导细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖的功能。近年来研究发现,鸟氨酸脱羧酶抗酶在动物繁殖过程中也具有重要调控作用。就鸟氨酸脱羧酶抗酶基因功能的研究现状做一综述,为进一步深入研究OAZ功能提供帮助。 展开更多

关键词 鸟氨酸脱羧酶抗酶 多胺代谢 细胞增殖 繁殖

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抗酶抑制因子结构、功能与代谢的研究进展

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作者 马建敏 索世英 宁黔冀 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期255-257,共3页

抗酶抑制因子是一种热不稳定蛋白,与鸟氨酸脱羧酶同源,但不具有鸟氨酸脱羧酶活性,经泛素依赖途径被降解。抗酶抑制因子与抗酶高度亲和,抑制抗酶功能,恢复鸟氨酸脱羧酶活性。研究发现,抗酶抑制因子还能够调节多胺转运,抑制细胞周期蛋白D... 抗酶抑制因子是一种热不稳定蛋白,与鸟氨酸脱羧酶同源,但不具有鸟氨酸脱羧酶活性,经泛素依赖途径被降解。抗酶抑制因子与抗酶高度亲和,抑制抗酶功能,恢复鸟氨酸脱羧酶活性。研究发现,抗酶抑制因子还能够调节多胺转运,抑制细胞周期蛋白D1的降解,以及加速中心粒复制,从而促进细胞增殖及肿瘤发生。 展开更多

关键词 抗酶抑制因子 抗酶 鸟氨酸脱羧酶 肿瘤

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AZIN-1小分子抑制剂抗非小细胞肺癌活性研究 被引量：2

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作者 王顺超 欧洁 +1 位作者 孙丽丹 吴红艳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期556-561,共6页

目的研究鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1(AZIN-1)小分子抑制剂对非小细胞肺癌的抑制作用及机制。方法通过CCK-8法检测A549细胞增殖;流式细胞术(Annexin V-FITC/PI双染)分析A549细胞凋亡;蛋白质免疫印迹实验检测A549细胞内鸟氨酸脱羧酶(ODC... 目的研究鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1(AZIN-1)小分子抑制剂对非小细胞肺癌的抑制作用及机制。方法通过CCK-8法检测A549细胞增殖;流式细胞术(Annexin V-FITC/PI双染)分析A549细胞凋亡;蛋白质免疫印迹实验检测A549细胞内鸟氨酸脱羧酶(ODC)、鸟氨酸脱羧酶抗酶-1(AZ-1)和AZIN-1的表达;流式细胞术(PI单染)分析A549细胞周期;高效液相色谱法检测A549细胞内总多胺含量。结果AZIN-1小分子抑制剂能够显著抑制A549细胞的增殖,使细胞发生G0/G1周期阻滞,并诱导A549细胞发生凋亡,显著抑制AZIN-1和ODC的表达,干扰细胞内多胺代谢,降低细胞内总多胺含量。结论AZIN-1小分子抑制剂对A549细胞具有显著的生长抑制作用,其作用机制可能与诱导细胞凋亡和干扰多胺代谢有关。 展开更多

关键词 鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1 小分子抑制剂 多胺 非小细胞肺癌 细胞增殖 凋亡

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抗酶的研究进展 被引量：1

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作者 马建敏 和俊涛 宁黔冀 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期106-110,共5页

抗酶(antizyme)是当细胞内多胺水平升高时刺激机体合成的一种小分子量调节蛋白,能特异性地与鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)结合,经泛素非依赖途径被26S蛋白酶体降解,从而使多胺合成减少;抗酶还可以调节多胺转运,以稳定细... 抗酶(antizyme)是当细胞内多胺水平升高时刺激机体合成的一种小分子量调节蛋白,能特异性地与鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)结合,经泛素非依赖途径被26S蛋白酶体降解,从而使多胺合成减少;抗酶还可以调节多胺转运,以稳定细胞内多胺水平。近年来随着生物技术的不断发展,对抗酶的认识也逐步深入,本文综述了抗酶家族、合成、作用及定位等方面的研究进展。 展开更多

关键词 抗酶 鸟氨酸脱羧酶 多胺

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无患子籽油护肤乳液的制备及性能分析

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作者 雷锦舸 郑竟成 +3 位作者 周力 罗质 何东平 雷芬芬 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期110-117,共8页

为促进无患子籽油在化妆品中的应用研究,首先以无患子籽油为原料制备纳米乳液,以粒径和Zeta电位为指标,采用单因素实验对乳液制备工艺条件进行了优化,然后在单因素实验的基础上制备无患子籽油护肤乳液,并以橄榄油护肤乳液和商品护肤乳... 为促进无患子籽油在化妆品中的应用研究,首先以无患子籽油为原料制备纳米乳液,以粒径和Zeta电位为指标,采用单因素实验对乳液制备工艺条件进行了优化,然后在单因素实验的基础上制备无患子籽油护肤乳液,并以橄榄油护肤乳液和商品护肤乳液为对照,对其稳定性、安全性、抗氧化活性、保湿性、酪氨酸酶抑制活性及紫外吸收效果进行了评价。结果表明:无患子籽油纳米乳液的最佳制备工艺条件为复合乳化剂(吐温-60与Span A83体积比3∶1)添加量8%、助乳化剂添加量6%、无患子籽油添加量2%或4%、乳化温度70℃、剪切速度12000 r/min;3种护肤乳液RY-1(无患子籽油添加量2%)、RY-2(无患子籽油添加量4%)、RY-3(橄榄油添加量2%)的稳定性、安全性均较好;RY-1、RY-2、RY-3清除DPPH·的EC_(50)分别为61.5、55.7、58.1μg/mL,清除ABTS+·的EC50分别为58.3、50.1、53.5μg/mL,清除·OH的EC50分别为59.7、30.2、59.9μg/mL,清除O_(2)^(-)·的EC_(50)分别为59.6、41.8、57.3μg/mL,对酪氨酸酶活性抑制的EC_(50)分别为147.5、118.6、140.2μg/mL;在相对湿度43%、81%环境下,4种护肤乳液保湿率大小顺序均为RY-2>商品乳液>RY-3>RY-1;无患子籽油护肤乳液具有一定的紫外吸收能力。综上,RY-2配方优于RY-1和RY-3,无患子籽油护肤乳液安全无刺激性,且具有一定抗氧化活性,有良好的应用前景。 展开更多

关键词 无患子籽油 护肤乳液 稳定性 安全性 保湿性 抗氧化活性 酪氨酸酶活性抑制率 紫外吸收效果

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灰树花子实体醇提物生物活性研究 被引量：6

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作者 马迪 韩乐 +2 位作者 冯娜 韩伟 张劲松 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期381-385,共5页

对灰树花子实体95%乙醇提取物的不同萃取分部(石油醚分部、氯仿分部、乙酸乙酯分部、正丁醇分部和剩余分部)进行了化学成分的定性检验和体外抗肿瘤、抑制DPP-IV酶的活性研究。结果表明:灰树花子实体的醇提取物中可能含有生物碱、氨基酸... 对灰树花子实体95%乙醇提取物的不同萃取分部(石油醚分部、氯仿分部、乙酸乙酯分部、正丁醇分部和剩余分部)进行了化学成分的定性检验和体外抗肿瘤、抑制DPP-IV酶的活性研究。结果表明:灰树花子实体的醇提取物中可能含有生物碱、氨基酸或蛋白、有机酸、酚类或鞣质、甾体、蒽醌等物质。石油醚分部、氯仿分部、乙酸乙酯分部和正丁醇分部对正常细胞WPMY-1的增殖无抑制作用而对三种肿瘤细胞L1210、SW620、K562全部或部分的增殖有一定的抑制作用,其中氯仿分部对L1210细胞增殖的抑制作用最强,其IC50达到0.13μg/m L。这说明这四个分部具有抗肿瘤活性。剩余分部对肿瘤细胞L1210、K562和正常细胞WPMY-1的增殖均具有抑制作用,说明该分部可能具有细胞毒性。灰树花子实体的氯仿分部、乙酸乙酯分部和正丁醇分部具有较强的抑制DPP-IV酶的活性,这三个萃取分部对DPP-IV酶抑制的IC50分别为497.33、776.51、704.24μg/m L,该结果说明此三个分部具有降血糖的潜力。 展开更多

关键词 灰树花 子实体 抗肿瘤活性 DPP-IV酶抑制活性

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红麻副产品栽培中华红芝发酵液美白抗氧化研究 被引量：3

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作者 王亚惠 谢纯良 +3 位作者 周映君 龚文兵 朱作华 彭源德 《中国麻业科学》 2020年第2期83-90,共8页

灵芝(Ganoderma lucidum)是一种重要的食药用真菌,在化妆品领域有广泛的应用。本实验以红麻副产品栽培中华红芝子实体为研究对象,利用酿酒酵母和保加利亚乳杆菌进行发酵试验,即分别向灵芝浆液中接种6.5%酿酒酵母,6.5%保加利亚乳杆菌,6.5... 灵芝(Ganoderma lucidum)是一种重要的食药用真菌,在化妆品领域有广泛的应用。本实验以红麻副产品栽培中华红芝子实体为研究对象,利用酿酒酵母和保加利亚乳杆菌进行发酵试验,即分别向灵芝浆液中接种6.5%酿酒酵母,6.5%保加利亚乳杆菌,6.5%酿酒酵母和6.5%保加利亚乳杆菌,并对三种接种方式的发酵液美白与抗氧化效果进行了评价。结果表明:酿酒酵母和保加利亚乳杆菌复合发酵中华红芝子实体,其发酵液抗氧化能力和美白功效最好,其总糖含量为369.6μg/mL,三萜含量为249.3μg/mL,DPPH自由基清除率为40.5%、超氧阴离子清除率为20.96%,酪氨酸酶抑制率为42.4%,显著高于中华红芝子实体水/醇提取液,具有良好的化妆品应用前景。此外,中华红芝子实体发酵液中灵芝三萜为其主要美白功效成分。 展开更多

关键词 中华红芝子实体 酿酒酵母 保加利亚乳杆菌 抗氧化 酪氨酸酶抑制率

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OAZI-1蛋白复合物在小鼠体内诱导特异性抗肿瘤效应的研究

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作者 吕亚丰 杨建林 +3 位作者 曹春雨 秦宇 王发玲 王艳林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1819-1823,共5页

目的:在实验动物的水平上分析来源于肿瘤细胞的鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1(Ornithine decarboxylase antizyme inhibitor-1,OAZI-1)蛋白复合物能否在小鼠体内诱导特异性抗肿瘤效应。方法:用包被有OAZI-1抗体的免疫磁珠从B16-F1小鼠黑... 目的:在实验动物的水平上分析来源于肿瘤细胞的鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1(Ornithine decarboxylase antizyme inhibitor-1,OAZI-1)蛋白复合物能否在小鼠体内诱导特异性抗肿瘤效应。方法:用包被有OAZI-1抗体的免疫磁珠从B16-F1小鼠黑色素瘤细胞中分离OAZI-1蛋白复合物,用此复合物免疫小鼠后,再在小鼠皮下接种B16-F1活细胞,然后观察接种瘤在小鼠体内的成瘤及生长状况。ELISA法用于检测免疫小鼠血清中IFN-γ含量。乳酸脱氢酶释放实验(LDH)检测免疫小鼠脾脏淋巴细胞对B16-F1细胞的杀伤效应。上述动物实验用原核表达纯化的OAZI-1蛋白和PBS免疫的小鼠作为对照。结果:与对照小鼠相比,接种OAZI-1蛋白复合物的小鼠脾淋巴细胞(效应细胞)对B16-F1黑素瘤细胞(靶细胞)具有更强的杀伤能力。在三种不同的效∶靶比下(10∶1、50∶1、100∶1),该组小鼠脾淋巴细胞对靶细胞的杀伤活性分别为46.2%、59.5%和92.5%,显著性高于接种纯化OAZI-1蛋白组(36.1%、26.8%和45.9%)和接种PBS组(24.6%、24.0%和27.2%)小鼠脾淋巴细胞。此外,接种OAZI-1蛋白复合物的小鼠血清中抗肿瘤细胞因子IFN-γ含量(538.3 pg/ml)也显著性高于接种纯化OAZI-1蛋白组(256.2 pg/ml)和接种PBS组(131.0 pg/ml)小鼠。上述方法免疫的小鼠在皮下再接种B16-F1活细胞后,免疫OAZI-1蛋白复合物组小鼠成瘤率为40%,而PBS组和纯化OAZI-1蛋白组小鼠成瘤率为100%,且接种瘤在OAZI-1蛋白复合物免疫小鼠体内生长更为缓慢。结论:从B16-F1肿瘤细胞中分离的OAZI-1蛋白复合物中可能含有肿瘤抗原,用此复合物接种小鼠能在实验动物体内诱导抗肿瘤免疫杀伤活性。 展开更多

关键词 鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子1(OAZI-1) 黑素瘤 免疫治疗 小鼠

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二葡糖基没食子酸的合成及其性能研究 被引量：2

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作者 张凯强 许虎君 《日用化学工业》 CAS 北大核心 2022年第2期140-146,共7页

以没食子酸甲酯和五乙酰基葡萄糖为原料,经过乙酰化反应、成盐、酸化等过程合成了美白剂二葡糖基没食子酸,并通过IR,MS,^(1)H NMR和^(13)C NMR确认了最终产物的结构。同时考察了美白剂二葡糖基没食子酸对酪氨酸酶活性的影响、酪氨酸二... 以没食子酸甲酯和五乙酰基葡萄糖为原料,经过乙酰化反应、成盐、酸化等过程合成了美白剂二葡糖基没食子酸,并通过IR,MS,^(1)H NMR和^(13)C NMR确认了最终产物的结构。同时考察了美白剂二葡糖基没食子酸对酪氨酸酶活性的影响、酪氨酸二酚酶的抑制作用机制以及抗氧化能力。研究表明:以L-酪氨酸为底物时,二葡糖基没食子酸对酪氨酸单酚酶的半抑制浓度IC_(50)为1.46 mg/mL,以L-多巴为底物时,二葡糖基没食子酸对酪氨酸二酚酶的半抑制浓度IC_(50)为2.68 mg/mL,而且从Lineweaver-Burk图获得的抑制机理表明二葡糖基没食子酸对酪氨酸二酚酶的抑制作用表现为竞争性抑制,抑制常数K_(m)为2.43 mg/mL。没食子酸相比于同质量浓度下的V_(max)对DPPH自由基的清除效果更好,而二葡糖基没食子酸相比于同质量浓度下的V_(c),其对DPPH自由基仍存在一定的清除作用。 展开更多

关键词 二葡糖基没食子酸 酪氨酸酶活性抑制 动力学 竞争抑制 抗氧化

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产蛋前期和产蛋期鹅HPG轴OAZ1和OAZ2基因表达的研究 被引量：5

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作者 马容 康波 +1 位作者 姜冬梅 何珲 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2015年第2期44-48,共5页

【目的】探讨产蛋前期和产蛋期鹅HPG轴中OAZ1和OAZ2基因表达的差异。【方法】选取健康的产蛋前期和产蛋期四川白鹅母鹅各3只,采集下丘脑、垂体和卵巢组织样品,提取总RNA并反转录合成cDNA,应用实时荧光定量PCR检测产蛋前期和产蛋期四川... 【目的】探讨产蛋前期和产蛋期鹅HPG轴中OAZ1和OAZ2基因表达的差异。【方法】选取健康的产蛋前期和产蛋期四川白鹅母鹅各3只,采集下丘脑、垂体和卵巢组织样品,提取总RNA并反转录合成cDNA,应用实时荧光定量PCR检测产蛋前期和产蛋期四川白鹅下丘脑、垂体、卵巢组织中OAZ1和OAZ2基因的相对表达量。【结果】在产蛋前期和产蛋期四川白鹅下丘脑、垂体和卵巢组织中,OAZ1和OAZ2基因均有表达,并且产蛋期OAZ1和OAZ2表达量均极显著高于产蛋前期(P<0.01),产蛋期四川白鹅下丘脑、垂体和卵巢中OAZ1的表达量分别是产蛋前期的1.79倍(P<0.01)、2.96倍(P<0.01)和3.48倍(P<0.01);产蛋期四川白鹅下丘脑、垂体和卵巢中OAZ2的表达量分别是产蛋前期的2.66倍(P<0.01)、1.38倍(P<0.01)和2.03倍(P<0.01)。【结论】OAZ1和OAZ2可在HPG轴的各级水平发挥其调控鹅繁殖过程的功能,OAZ1主要参与卵巢功能的调控,而OAZ2主要参与下丘脑功能的调控。 展开更多

关键词 四川白鹅 鸟氨酸脱羧酶抗酶1(OAZ1) 鸟氨酸脱羧酶抗酶2(OAZ2) 多胺 下丘脑-垂体-性腺轴 实时荧光定量PCR

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人OAZ-ORF2基因真核表达载体的构建及在Hela细胞中的表达 被引量：1

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作者 姜立 马文丽 +4 位作者 柯杰兵 彭翼飞 李晋 徐兵 郑文岭 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期743-744,共2页

目的克隆人鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白OAZ-ORF2基因,重组至真核表达载体,并在Hela细胞中表达。方法以pET32a-OAZ质粒为模板,PCR法扩增OAZ-ORF2序列,测序鉴定后重组入真核表达载体pEGFP-N1,转染Hela细胞,表达重组蛋白。结果PCR产物经琼脂糖电... 目的克隆人鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白OAZ-ORF2基因,重组至真核表达载体,并在Hela细胞中表达。方法以pET32a-OAZ质粒为模板,PCR法扩增OAZ-ORF2序列,测序鉴定后重组入真核表达载体pEGFP-N1,转染Hela细胞,表达重组蛋白。结果PCR产物经琼脂糖电泳证实与目的基因长度一致,测序结果与GenBank公布的OAZ基因的ORF2序列一致。重组载体在Hela细胞中表达OAZ-ORF2蛋白,Western blotting分析在相对分子质量44.5×103左右出现新的蛋白条带。结论成功构建人OAZ-ORF2基因真核表达载体,并获得表达。 展开更多

关键词 鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白 真核表达 HELA细胞

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精胺对Nup98基因的调控研究

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作者 张磊 万涛 +5 位作者 田圆圆 王李英 李凯 秦栋栋 曲嘉琳 汤华 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期144-147,152,共5页

利用基因芯片比较鸟氨酸脱羧酶抑制子基因敲除小鼠和正常小鼠肝组织的表达差异;高效液相色谱法测定鸟氨酸脱羧酶抑制子基因敲除小鼠和正常小鼠肝组织中的精胺含量;构建Nup98的启动子-虫荧光素酶报告基因质粒;脂质体Lipofectamine 2000T... 利用基因芯片比较鸟氨酸脱羧酶抑制子基因敲除小鼠和正常小鼠肝组织的表达差异;高效液相色谱法测定鸟氨酸脱羧酶抑制子基因敲除小鼠和正常小鼠肝组织中的精胺含量;构建Nup98的启动子-虫荧光素酶报告基因质粒;脂质体Lipofectamine 2000TM转染小鼠细胞(NIH3T3),在含有精胺或正常培养条件下,测定虫荧光素酶活性。结果显示,Nup98基因在鸟氨酸脱羧酶抑制子基因敲除小鼠肝组织表达增强;鸟氨酸脱羧酶抑制子基因敲除小鼠肝组织中,精胺含量增高;成功构建Nup98的启动子-虫荧光素酶报告基因质粒pGL3-Nup98-P;精胺能在体外培养的条件下,增强虫荧光素酶的活性。这些结果证明精胺能激活Nup98基因的启动子活性,增强其在NIH3T3细胞中的表达。 展开更多

关键词 精胺 Nup98 鸟氨酸脱羧酶抑制子基因敲除小鼠 表达

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多胺跨膜物质转运的机制 被引量：3

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作者 王贵鸿 马容 +2 位作者 康波 姜冬梅 何珲 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期3245-3250,共6页

多胺具有调控细胞增殖、分化和凋亡的功能,可参与动物繁殖、胚胎发育以及癌症发生发展等多种生物学过程。在动物机体中,多胺稳态是通过多胺跨膜物质转运和多胺代谢途径共同维持的。溶质转运蛋白(SLC)基因家族中的SLC3A2、SLC7A1、SLC12A... 多胺具有调控细胞增殖、分化和凋亡的功能,可参与动物繁殖、胚胎发育以及癌症发生发展等多种生物学过程。在动物机体中,多胺稳态是通过多胺跨膜物质转运和多胺代谢途径共同维持的。溶质转运蛋白(SLC)基因家族中的SLC3A2、SLC7A1、SLC12A8、SLC22A16、SLC22A 1、SLC22A 2、SLC22A 3基因及其编码的蛋白质可参与多胺的跨膜物质转运;多胺代谢关键调控基因鸟氨酸脱羧酶(ODC)、鸟氨酸脱羧酶抗酶(OAZ)和鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制剂(AZIN)对多胺跨膜物质转运也具有重要的调控功能;此外,金属阳离子、细胞膜跨膜电位和p H等内环境因素也可参与多胺转运的调节。因此,本文就多胺转运蛋白、多胺代谢相关基因和蛋白质以及内环境因素调控多胺跨膜物质转运的分子调控机制作一综述,以期为阐明多胺转运调控机制的研究奠定理论基础。 展开更多

关键词 多胺 多胺转运蛋白 鸟氨酸脱羧酶 鸟氨酸脱羧酶抗酶 内环境因素

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OAZ1基因诱导慢粒白血病K562细胞向成熟红系方向分化 被引量：1

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作者 吴兵平 王星 +3 位作者 马文丽 张思毅 郑文岭 姜立 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期361-367,共7页

近年来,鸟氨酸脱羧酶抗酶(OAZ)作为肿瘤治疗的潜在靶点备受关注.本文研究了OAZ1基因过表达对慢粒白血病K562细胞红系分化的作用.构建框移位点突变的OAZ1过表达慢病毒载体pLVX-Neo-OAZ1-IRES-ZsGreen,包装病毒并感染K562细胞,Western印... 近年来,鸟氨酸脱羧酶抗酶(OAZ)作为肿瘤治疗的潜在靶点备受关注.本文研究了OAZ1基因过表达对慢粒白血病K562细胞红系分化的作用.构建框移位点突变的OAZ1过表达慢病毒载体pLVX-Neo-OAZ1-IRES-ZsGreen,包装病毒并感染K562细胞,Western印迹验证其过表达效果.FACS检测细胞分化标志物CD71和GPA,结合联苯胺染色分析细胞红系分化情况.对比氯化高铁血红素(hemin)诱导组,实时RT-PCR检测与K562细胞红系分化、癌变的关键基因(GATA1、BCR/ABL、TGFβ)转录水平,对OAZ1诱导分化的机制进行初步探索.结果表明,慢病毒过表达载体及K562细胞过表达体系构建成功.OAZ1过表达后细胞红系分化标志物CD71+/GPA+为(11.22±2.09)%,与对照组(4.07±1.04)%、空病毒组(1.79±2.36)%相比差异极显著(P<0.01);联苯胺蓝染阳性率为(14.037±0.083)%,与对照组、空病毒组比较,差异也极显著(P<0.01).定量分析结果提示,相对于GATA1、BCR/ABL基因mRNA转录水平的影响,OAZ1对TGFβ基因的作用更为明显.为此推断,OAZ1基因可诱导白血病K562细胞向成熟红系方向分化,其作用机制可能与TGFβ信号转导通路相关. 展开更多

关键词 鸟氨酸脱羧酶抗酶-1(OAZ1) 慢粒白血病 红系分化

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