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Rho鸟嘌呤核苷酸交换因子家族及其在疾病发生中的作用 被引量:6
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作者 刘明涛 杨军 王志钢 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期63-67,共5页
Rho GTP酶(Rho GTPase)家族在真核生物细胞中参与细胞骨架调节、基因转录、膜泡运输等过程,扮演着分子开关的角色。Rho型鸟嘌呤核苷酸交换因子(RhoGEF)是调节Rho GTPase活性的关键因子,在Rho GTPase信号调节、组织器官的生长发育及免疫... Rho GTP酶(Rho GTPase)家族在真核生物细胞中参与细胞骨架调节、基因转录、膜泡运输等过程,扮演着分子开关的角色。Rho型鸟嘌呤核苷酸交换因子(RhoGEF)是调节Rho GTPase活性的关键因子,在Rho GTPase信号调节、组织器官的生长发育及免疫应答中起着至关重要的作用。RhoGEF与肿瘤、发育及神经类疾病、病原微生物感染等也有密切关系,对其功能的深入了解有助于人们认识某些生理和病理现象的发生机制。 展开更多
关键词 RHO GTPase鸟嘌呤核苷交换因子(GEF)疾病发生
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鸟苷酸交换因子C3G对心肌细胞生存力的影响及其可能机制 被引量:3
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作者 张旭 李刚 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1172-1177,共6页
目的探讨过表达鸟苷酸交换因子C3G(Crk SH3-domain-binding guanine-nucleotide-releasing factor)对心肌细胞生存力的影响及其机制。方法分别用pCXN2-Flag、pCXN2-Flag-hC3G(过表达人C3G mRNA)质粒瞬时转染H9C2心肌细胞,并进行缺氧/复... 目的探讨过表达鸟苷酸交换因子C3G(Crk SH3-domain-binding guanine-nucleotide-releasing factor)对心肌细胞生存力的影响及其机制。方法分别用pCXN2-Flag、pCXN2-Flag-hC3G(过表达人C3G mRNA)质粒瞬时转染H9C2心肌细胞,并进行缺氧/复氧(H/R)干预。实验分为空白组、空质粒组、C3G过表达组、空白+H/R组、空质粒+H/R组,C3G过表达+H/R组。用RT-PCR法检测心肌细胞C3G mRNA的表达,蛋白质印迹分析法检测心肌细胞C3G、p-ERK1/2蛋白的表达,MTT法检测细胞的增殖率,流式细胞术检测细胞的凋亡率。结果 C3G过表达组较空白组和空质粒组,C3G过表达+H/R组较空白+H/R组和空质粒+H/R组人C3GmRNA、C3G蛋白、p-ERK1蛋白、细胞增殖率均增加(P均<0.01),凋亡率均降低(P<0.05,P<0.01);C3G过表达+H/R组较空白+H/R组、空质粒+H/R组p-ERK2蛋白增加(P<0.01)。结论过表达C3G能促进心肌细胞的生存力,该过程可能是由p-ERK1/2蛋白表达增加和心肌细胞凋亡降低介导的。 展开更多
关键词 鸟嘌呤核苷交换因子 C3G 心脏肌细胞 细胞存活
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环腺苷酸结合蛋白在心脏功能及相关心脏疾病中的作用研究进展 被引量:2
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作者 王鑫 董六一 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2018年第7期764-768,共5页
3,5-环磷酸腺苷(cAMP)是心血管系统中细胞对于外界刺激反应的关键信号分子。它控制很多生物效应,如细胞增殖、变异和凋亡等。cAMP是ATP通过跨膜腺苷酸环化酶激活的G蛋白偶联受体^([1])。细胞内cAMP不仅由腺苷酸环化酶产生,而且由cAM... 3,5-环磷酸腺苷(cAMP)是心血管系统中细胞对于外界刺激反应的关键信号分子。它控制很多生物效应,如细胞增殖、变异和凋亡等。cAMP是ATP通过跨膜腺苷酸环化酶激活的G蛋白偶联受体^([1])。细胞内cAMP不仅由腺苷酸环化酶产生,而且由cAMP的磷酸二酯酶调控其降解,催化cAMP水解成5-AMP。 展开更多
关键词 心脏病 3′ 5′-环AMP磷二酯酶 环AMP依赖性蛋白激酶 鸟嘌呤核苷交换因子
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6种禾本科植物GEF基因家族鉴定与抗旱性分析
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作者 申晨 方远鹏 谢鑫 《山地农业生物学报》 2024年第4期1-10,共10页
小G蛋白介导的鸟嘌呤三核苷酸磷酸/鸟嘌呤二核苷酸磷酸(GTP/GDP)信号通路对于植物抗性十分重要,鸟嘌呤核苷酸交换因子(Guanine Nucleotide Exchange Factor, GEF)可对多种小G蛋白进行调节。植物基因组中包括BIG(Brefeldin A-inhibited G... 小G蛋白介导的鸟嘌呤三核苷酸磷酸/鸟嘌呤二核苷酸磷酸(GTP/GDP)信号通路对于植物抗性十分重要,鸟嘌呤核苷酸交换因子(Guanine Nucleotide Exchange Factor, GEF)可对多种小G蛋白进行调节。植物基因组中包括BIG(Brefeldin A-inhibited Guanine Nucleotide Exchange Protein)和GBF(Golgi Brefeldin A-Resistant Guanine Nucleotide Exchange Factor)两类GEF基因,目前,这些GEF基因的系统性鉴定与表达分析尚不明确。因此,本研究采用基因家族鉴定的方法,对禾本科GEF基因家族进行比较分析。结果表明:从6种禾本科(水稻Oryza sativa、小麦Triticum aestivum、节节麦Sorghum bicolor、高粱Aegilops tauschii、谷子Setaria italica、玉米Zea mays)基因组中获得58个GEF基因,分布于45条不同的染色体上。系统发育分析表明,禾本科GEF基因家族包含5个亚家族(BIG1/4、BIG2/3、BIG5、GNL2、GNON),并且存在单拷贝以及基因选择性保留特性。共线性分析进一步确定禾本科GEF基因存在复杂的演化历程。干旱表达结果显示,GEF基因家族在不同禾本科植物、不同亚家族以及拷贝水平上均已产生抗旱性分化。本研究结果将为禾本科作物的抗旱基因筛选提供基础。 展开更多
关键词 禾本科 鸟嘌呤核苷交换因子 基因家族 表达分析
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Vav1对T细胞的调控作用及其与相关疾病的关系 被引量:1
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作者 张毓川 陈玮 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期75-81,共7页
Vav1作为T细胞受体下游的关键信号分子,拥有鸟苷酸交换因子功能的催化核心结构DH-PH-ZF和接头蛋白功能的SH3-SH2-SH3结构,因而在T细胞发育、活化、增殖和功能发挥等各个阶段,以及在自身免疫性疾病、移植排斥和肿瘤等发生、发展中具有不... Vav1作为T细胞受体下游的关键信号分子,拥有鸟苷酸交换因子功能的催化核心结构DH-PH-ZF和接头蛋白功能的SH3-SH2-SH3结构,因而在T细胞发育、活化、增殖和功能发挥等各个阶段,以及在自身免疫性疾病、移植排斥和肿瘤等发生、发展中具有不同的调控作用,可为临床治疗提供潜在靶点。本文综述了Vav1对T细胞的调控作用及其与相关疾病的关系。 展开更多
关键词 T淋巴细胞/生理学 鸟嘌呤核苷酸交换因子类/生理学 自身免疫疾病 移植物排斥 淋巴瘤 T细胞 综述
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C3G/Rap1和Dock180/Rac1信号通路在卵巢癌浸润中的作用 被引量:13
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作者 高一萌 张瑜 +5 位作者 李文燕 车亚玲 王瑾 刘斌 王辉 令狐华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1031-1034,共4页
目的探讨鸟嘌呤核苷酸交换因子C3G/Rap1酶和鸟嘌呤核苷酸交换因子Dock180/Rac1酶信号通路在卵巢癌浸润中的可能作用。方法 Western blot检测Dock180沉默的卵巢癌细胞SKOV3中C3G的表达,验证上皮性卵巢癌组织中Dock180与C3G的表达相关性;... 目的探讨鸟嘌呤核苷酸交换因子C3G/Rap1酶和鸟嘌呤核苷酸交换因子Dock180/Rac1酶信号通路在卵巢癌浸润中的可能作用。方法 Western blot检测Dock180沉默的卵巢癌细胞SKOV3中C3G的表达,验证上皮性卵巢癌组织中Dock180与C3G的表达相关性;免疫组化比较卵巢癌组织中Dock180与C3G的表达趋势;免疫荧光观察SKOV3中Dock180与C3G及它们各自的下游蛋白Rac1/Rap1的定位。结果 Dock180基因沉默的细胞中C3G表达明显增强(P<0.05);Dock180与C3G在卵巢癌组织中的表达呈现相反趋势(P<0.05);C3G/Dock180均主要分布于细胞质,下游效应蛋白Rap1/Rac1在细胞膜和细胞质都有表达,但Rap1以细胞质为主,而Rac1可以伸展至细胞膜及细胞膜皱褶。结论卵巢癌细胞和组织中C3G与Dock180表达呈相反趋势,下游蛋白Rap1与Rac1在细胞内的定位分布差异,可能与C3G/Rap1和Dock180/Rac1信号通路在卵巢肿瘤浸润中的不同作用有关。 展开更多
关键词 鸟嘌呤核苷释放因子2 rap1 GTP结合蛋白质 卵巢肿瘤 肿瘤细胞 培养的 肿瘤浸润
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Epac/Rap1信号通路在急性肺损伤中作用的研究进展 被引量:9
7
作者 汪雪峰 陈思煜 陈锋 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期680-683,共4页
急性肺损伤(ALI)中炎症信号通路的失调控以及炎症因子平衡紊乱是其发生和发展的重要原因。能直接被cAMP活化的交换蛋白(Epac)在调节肺部气道炎症和细胞增殖方面是一个新的效应器,新的关于cAMP依赖性蛋白激酶A(PKA)非依赖性通路研究表明,... 急性肺损伤(ALI)中炎症信号通路的失调控以及炎症因子平衡紊乱是其发生和发展的重要原因。能直接被cAMP活化的交换蛋白(Epac)在调节肺部气道炎症和细胞增殖方面是一个新的效应器,新的关于cAMP依赖性蛋白激酶A(PKA)非依赖性通路研究表明,cAMP/Epac/Rap1信号通路参与并行使许多类型细胞的功能,包括细胞分泌、细胞间黏附和连接、细胞凋亡、细胞增殖和分化等。cAMP能通过Epac/Rap1信号通路参与ALI的发病过程,Epac/Rap1信号通路是ALI防治的潜在靶点。本文综述Epac/Rap1信号通路在肺部相关炎症及急性肺损伤中作用机制的国内外研究进展。 展开更多
关键词 急性肺损伤 鸟嘌呤核苷交换因子 气道炎症 环磷腺苷
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融合蛋白TAT-RabGEF1原核表达载体的构建及蛋白表达 被引量:3
8
作者 方虹仪 郭娜 +1 位作者 邢纪斌 罗晨芳 《中山大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期61-67,共7页
【目的】构建PET28a-TAT-RabGEF1重组质粒载体,在E.coli Rosetta(DE3)菌株中高效表达并纯化融合蛋白,研究TAT-RabGEF1融合蛋白对肥大细胞的跨膜转导活性。【方法】以小鼠组织cDNA为模板,设计上游和下游含有限制性酶切位点和TAT序列的引... 【目的】构建PET28a-TAT-RabGEF1重组质粒载体,在E.coli Rosetta(DE3)菌株中高效表达并纯化融合蛋白,研究TAT-RabGEF1融合蛋白对肥大细胞的跨膜转导活性。【方法】以小鼠组织cDNA为模板,设计上游和下游含有限制性酶切位点和TAT序列的引物,PCR扩增目的片段TAT-RabGEF1,并通过双酶切构建PET28a-TAT-RabGEF1重组质粒载体,在E.coli Rosetta(DE3)大肠杆菌中诱导表达融合蛋白,产物用亲和层析柱纯化后测量浓度及鉴定。CCK-8检测融合蛋白的细胞毒性,并用荧光显微镜及荧光分光光度计定性定量观察其对小鼠肥大细胞瘤细胞P815的转导活性。【结果】成功构建了PET28a-TAT-RabGEF1重组载体,高效表达了具有较高特异性,相对分子质量约为57 ku的融合蛋白TAT-Rab GEF1,0.1、1、10μmol/L浓度的TAT-RabGEF1蛋白对细胞无明显毒性,荧光显微镜显示1μmol/L浓度的融合蛋白TAT-RabGEF1具有快速转导进入P815细胞内的能力,且为进入细胞的饱和浓度。【结论】通过TAT-RabGEF1的原核表达和蛋白纯化分析,证实了TAT-PTD的跨膜转导活性,为研究RabGEF1在肥大细胞激活途径中的作用提供了物质基础。 展开更多
关键词 鸟嘌呤核苷交换因子1 TAT蛋白 融合蛋白 载体构建
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大鼠非梗死区心肌C3G蛋白的表达及苯肾上腺素对其的干预 被引量:3
9
作者 牟杨 李刚 +1 位作者 张灿晶 王志华 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2010年第5期391-394,共4页
目的:探讨非梗死区心肌C3G蛋白的表达及苯肾上腺素对其的干预。方法:选择雄性SD大鼠32只。按Litwin方法建立心肌梗死(简称心梗)及假手术模型。术后3天仍存活的雄性SD大鼠分为假手术组、心梗组、假手术苯肾上腺素组和心梗苯肾上腺素组(各... 目的:探讨非梗死区心肌C3G蛋白的表达及苯肾上腺素对其的干预。方法:选择雄性SD大鼠32只。按Litwin方法建立心肌梗死(简称心梗)及假手术模型。术后3天仍存活的雄性SD大鼠分为假手术组、心梗组、假手术苯肾上腺素组和心梗苯肾上腺素组(各组n=8)。假手术组及心梗组给予生理盐水1ml/(kg.d),假手术苯肾上腺素组及心梗苯肾上腺素组给予苯肾上腺素0.65mg/(kg.d),腹腔注射,至干预后8周。干预后应用免疫印迹法检测非梗死区心肌C3G蛋白的表达。结果:干预后12周,非梗死区心肌C3G蛋白表达积分光密度值(免疫印迹)分别为:假手术组(0.33±0.06),心梗组(0.81±0.05),假手术苯肾上腺素组(0.40±0.06),心梗苯肾上腺素组(0.62±0.07)。与假手术组比较,心梗组、心梗苯肾上腺素组非梗死区心肌C3G蛋白表达均增加,差异均有统计学意义(P<0.05);心梗苯肾上腺素组较心梗组非梗死区心肌C3G蛋白的表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);而假手术苯肾上腺素组较假手术组非梗死区心肌C3G蛋白表达差异无统计学意义。结论:非梗死区心肌C3G蛋白的表达显著增加,而苯肾上腺素可显著调低其表达,提示C3G蛋白与梗死后心室重塑有关。 展开更多
关键词 鸟嘌呤核苷交换因子(GEF) C3G蛋白 心肌梗塞 苯肾上腺素
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VAV2蛋白DH结构域与CDC42蛋白相互作用的亲和力和热力学参数研究
10
作者 何诗雨 串俊兰 杨正林 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1492-1496,共5页
目的:利用等温滴定量热技术研究VAV2蛋白的DH结构域(VAV2-DH)与CDC42的相互作用。方法 :首先分别将VAV2-DH和CDC42蛋白的编码基因克隆至pGEX-6p-1和pET28a载体上,构建VAV2-DH和CDC42蛋白的重组表达载体。再将重组表达载体转入大肠杆菌... 目的:利用等温滴定量热技术研究VAV2蛋白的DH结构域(VAV2-DH)与CDC42的相互作用。方法 :首先分别将VAV2-DH和CDC42蛋白的编码基因克隆至pGEX-6p-1和pET28a载体上,构建VAV2-DH和CDC42蛋白的重组表达载体。再将重组表达载体转入大肠杆菌中诱导表达蛋白,并亲和层析、凝胶过滤层析纯化得到VAV2-DH和CDC42蛋白,最后利用鸟嘌呤核苷酸交换试验来验证VAV2-DH的鸟苷酸交换活性,并采用等温滴定量热技术检测这2种蛋白质相互作用的亲和力和热力学参数。结果:VAV2-DH和CDC42蛋白的平衡解离常数K_(D)=(11.44±2.12)μmol/L,其中摩尔结合焓DH=(-224.33±95.48) kJ/mol、-TDS=(195.97±95.95) kJ/mol、吉布斯自由能DG=(-28.30±0.49) kJ/mol。结论:VAV2-DH和CDC42蛋白属于中等强度的相互作用,是一个焓驱动的结合过程。 展开更多
关键词 VAV2 CDC42 鸟嘌呤核苷交换因子 蛋白相互作用 等温滴定量热法
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