Rho鸟嘌呤核苷酸交换因子家族及其在疾病发生中的作用 被引量：6

1

作者 刘明涛 杨军 王志钢 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期63-67,共5页

Rho GTP酶(Rho GTPase)家族在真核生物细胞中参与细胞骨架调节、基因转录、膜泡运输等过程,扮演着分子开关的角色。Rho型鸟嘌呤核苷酸交换因子(RhoGEF)是调节Rho GTPase活性的关键因子,在Rho GTPase信号调节、组织器官的生长发育及免疫... Rho GTP酶(Rho GTPase)家族在真核生物细胞中参与细胞骨架调节、基因转录、膜泡运输等过程,扮演着分子开关的角色。Rho型鸟嘌呤核苷酸交换因子(RhoGEF)是调节Rho GTPase活性的关键因子,在Rho GTPase信号调节、组织器官的生长发育及免疫应答中起着至关重要的作用。RhoGEF与肿瘤、发育及神经类疾病、病原微生物感染等也有密切关系,对其功能的深入了解有助于人们认识某些生理和病理现象的发生机制。 展开更多

关键词 RHO GTPase鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)疾病发生

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鸟嘌呤核苷交换因子Dock180与Elmo1在卵巢癌细胞中的共表达 被引量：4

2

作者 张瑜 高一萌 +4 位作者 李文燕 彭慧娟 刘斌 王辉 令狐华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第13期1277-1280,共4页

目的寻找卵巢癌细胞中鸟嘌呤核苷交换因子Dock180与Elmo1呈相互协同作用的依据。方法采用Western blot检测人卵巢癌组织、良性肿瘤组织及正常卵巢组织中的Dock180与Elmo1的表达水平;免疫组化检测卵巢癌组织中Dock180与Elmo1的分布;免疫... 目的寻找卵巢癌细胞中鸟嘌呤核苷交换因子Dock180与Elmo1呈相互协同作用的依据。方法采用Western blot检测人卵巢癌组织、良性肿瘤组织及正常卵巢组织中的Dock180与Elmo1的表达水平;免疫组化检测卵巢癌组织中Dock180与Elmo1的分布;免疫荧光检测Dock180与Elmo1在卵巢癌细胞SKOV3中的定位分布;检测Dock180表达缺失的SKOV3细胞中内源性Elmo1的表达水平。结果 Dock180与Elmo1在人卵巢癌组织中的表达水平呈明显正相关(r=0.829,P<0.05),在卵巢癌组织中二者的表达水平显著高于卵巢良性肿瘤组织组和卵巢正常组织组(P<0.05)[Dock180:(1.054±0.114)、(0.518±0.126)、(0.425±0.072);Elmo1:(0.864±0.114)、(0.374±0.076)、(0.300±0.105)]。免疫组化及细胞化学染色均显示二者在人卵巢癌组织和细胞内的分布具有一致性。而且在Dock180表达缺失细胞中,Elmo1的表达水平也同时降低。结论 Dock180与Elmo1在促进卵巢癌的癌变过程中可能具有相互协同作用。 展开更多

关键词 鸟嘌呤核苷交换因子 Dock180 Elmo1 卵巢癌

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鸟苷酸交换因子C3G对心肌细胞生存力的影响及其可能机制 被引量：3

3

作者 张旭 李刚 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1172-1177,共6页

目的探讨过表达鸟苷酸交换因子C3G(Crk SH3-domain-binding guanine-nucleotide-releasing factor)对心肌细胞生存力的影响及其机制。方法分别用pCXN2-Flag、pCXN2-Flag-hC3G(过表达人C3G mRNA)质粒瞬时转染H9C2心肌细胞,并进行缺氧/复... 目的探讨过表达鸟苷酸交换因子C3G(Crk SH3-domain-binding guanine-nucleotide-releasing factor)对心肌细胞生存力的影响及其机制。方法分别用pCXN2-Flag、pCXN2-Flag-hC3G(过表达人C3G mRNA)质粒瞬时转染H9C2心肌细胞,并进行缺氧/复氧(H/R)干预。实验分为空白组、空质粒组、C3G过表达组、空白+H/R组、空质粒+H/R组,C3G过表达+H/R组。用RT-PCR法检测心肌细胞C3G mRNA的表达,蛋白质印迹分析法检测心肌细胞C3G、p-ERK1/2蛋白的表达,MTT法检测细胞的增殖率,流式细胞术检测细胞的凋亡率。结果 C3G过表达组较空白组和空质粒组,C3G过表达+H/R组较空白+H/R组和空质粒+H/R组人C3GmRNA、C3G蛋白、p-ERK1蛋白、细胞增殖率均增加(P均<0.01),凋亡率均降低(P<0.05,P<0.01);C3G过表达+H/R组较空白+H/R组、空质粒+H/R组p-ERK2蛋白增加(P<0.01)。结论过表达C3G能促进心肌细胞的生存力,该过程可能是由p-ERK1/2蛋白表达增加和心肌细胞凋亡降低介导的。 展开更多

关键词 鸟嘌呤核苷酸交换因子类 C3G 心脏肌细胞 细胞存活

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环腺苷酸结合蛋白在心脏功能及相关心脏疾病中的作用研究进展 被引量：2

4

作者 王鑫 董六一 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2018年第7期764-768,共5页

3,5-环磷酸腺苷（cAMP）是心血管系统中细胞对于外界刺激反应的关键信号分子。它控制很多生物效应,如细胞增殖、变异和凋亡等。cAMP是ATP通过跨膜腺苷酸环化酶激活的G蛋白偶联受体^（[1]）。细胞内cAMP不仅由腺苷酸环化酶产生,而且由cAM... 3,5-环磷酸腺苷（cAMP）是心血管系统中细胞对于外界刺激反应的关键信号分子。它控制很多生物效应,如细胞增殖、变异和凋亡等。cAMP是ATP通过跨膜腺苷酸环化酶激活的G蛋白偶联受体^（[1]）。细胞内cAMP不仅由腺苷酸环化酶产生,而且由cAMP的磷酸二酯酶调控其降解,催化cAMP水解成5-AMP。 展开更多

关键词 心脏病 3′ 5′-环AMP磷酸二酯酶 环AMP依赖性蛋白激酶类 鸟嘌呤核苷酸交换因子类

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基于调节肠道菌群的疏风解毒胶囊改善甲型流感病毒肺炎小鼠肺损伤的机制研究

5

作者 吴义锟 郭红敏 +5 位作者 李艳 穆伟歌 黄淑芸 朱久玲 杨竹 钟树志 《中国临床药理学与治疗学》 北大核心 2025年第10期1351-1360,共10页

目的:研究疏风解毒胶囊(SFJDC)对病毒性肺炎小鼠肺损伤的改善作用及可能机制。方法:48只BALB/c小鼠采用甲型流感病毒H1N1滴鼻建立病毒性肺炎模型后,随机分为4组,每组12只,除模型组外,给药组分别给予奥司他韦(OSTW)、疏风解毒胶囊低、高... 目的:研究疏风解毒胶囊(SFJDC)对病毒性肺炎小鼠肺损伤的改善作用及可能机制。方法:48只BALB/c小鼠采用甲型流感病毒H1N1滴鼻建立病毒性肺炎模型后,随机分为4组,每组12只,除模型组外,给药组分别给予奥司他韦(OSTW)、疏风解毒胶囊低、高剂量(SFJDC-L、SFJDC-H)灌胃,另取12只小鼠做为正常组。连续给药7 d,给药过程中计算体质量变化率及肺指数、疾病活动指数;给药结束后取肺、肠组织及肠道内容物,苏木素-伊红(HE)染色法检测小鼠肺组织的病理改变;RT-qPCR法检测小鼠肺组织甲型流感病毒(influenza A,infA)载量、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)mRNA的表达;16S rRNA高通量测序法检测小鼠肠道菌群;ELISA法检测小鼠血清中脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)水平;Western Blotting法检测小鼠肺组织环鸟嘌呤-腺嘌呤核苷酸合成酶(cyclic GMP-AMP synthase,cGAS)、干扰素基因刺激蛋白(stimulator of inter-feron genes,STING)、磷酸化干扰素基因刺激蛋白(phospho-STING,p-STING)、核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)、磷酸化核因子-κB(phos-pho-NF-κB,p-NF-κB)、紧密连接蛋白(zonula oc-cludens1,ZO-1;Occludin)。结果:与模型组比较,疏风解毒组小鼠肺指数、病毒载量显著降低(P<0.01)DAI评分显著降低;肺组织炎症明显减轻,伴肺组织TNF-α和IL-6 mRNA表达水平降低(P<0.01);肠道厚壁菌门、毛螺菌科丰度显著升高(P<0.01),拟杆菌门、拟杆菌科丰度显著降低(P<0.05、P<0.01);肠组织ZO-1、Occludin蛋白表达量显著增加(P<0.05),血清LPS水平显著减少(P<0.01);肺组织cGAS、p-STING、p-NF-κB蛋白表达量显著下降(P<0.05、P<0.01)。结论:疏风解毒胶囊减轻小鼠肺组织的炎症反应,其机制可能与其调节肠道菌群、保护肠黏膜屏障,从而减少肠道漏出的LPS对肺组织cGAS/STING/NF-κB信号通路活化有关。 展开更多

关键词 疏风解毒胶囊 甲型流感病毒 肠道菌群 环鸟嘌呤-腺嘌呤核苷酸合成酶/干扰素基因刺激蛋白/核因子-κB信号通路

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cGAS-STING信号通路在不同程度冠状动脉粥样硬化病变下的表达研究

6

作者 刘江金 张健 +5 位作者 王承飞 苟吉 乐翠云 夏冰 汪元河 张桥军 《重庆医科大学学报》 北大核心 2025年第8期1109-1114,共6页

目的:观察不同程度冠状动脉粥样硬化病变下心肌组织的病理改变,检测冠脉内环状鸟嘌呤核苷酸腺嘌呤核苷酸合成酶(cyclic gmp-amp synthase,cGAS)-干扰素基因刺激物(stimulator of interferon genes,STING)信号通路蛋白的表达水平,探讨cGA... 目的:观察不同程度冠状动脉粥样硬化病变下心肌组织的病理改变,检测冠脉内环状鸟嘌呤核苷酸腺嘌呤核苷酸合成酶(cyclic gmp-amp synthase,cGAS)-干扰素基因刺激物(stimulator of interferon genes,STING)信号通路蛋白的表达水平,探讨cGAS-STING在冠心病的发生发展过程中所发挥的作用。方法:筛选符合条件的冠心病案例及对照案例,分5组:冠状动脉正常为对照组,其余4组按照冠脉狭窄程度分别为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级分组,常规苏木精伊红染色观察和评估冠脉病理情况、免疫印迹检测冠脉组织内cGAS-STING通路下游蛋白表达水平,Elisa检测冠脉炎症因子水平,并利用相关性分析方法分析cGAS-STING信号通路下游蛋白和炎症因子的表达水平与冠心病发生发展的关系。结果:①与对照组相比,镜下观察到其余4组冠脉呈现不同程度的管壁增厚和管腔狭窄等病理改变且狭窄程度逐级递增;②Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级冠脉狭窄的冠脉组织中的cGAS-STING信号通路下游蛋白以及炎症因子表达情况较对照组增高且为逐级增高的趋势;③cGAS-STING信号通路下游蛋白在冠脉组织中的表达与冠心病发生发展呈现正相关(cGAS,r=0.927,P<0.001;p-Sting,r=0.889,P<0.001;p-TBK1,r=0.910,P<0.001;p-IRF3,r=0.936,P<0.001;IFN-1,r=0.936,P<0.001;肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α),r=0.945,P<0.001;白细胞介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β),r=0.962,P<0.001;白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),r=0.933,P<0.001)。结论:cGAS-STING信号通路下游蛋白以及炎症因子的表达水平差异有统计学意义,此信号通路可能可作为治疗冠心病的潜在靶点。 展开更多

关键词 冠状动脉 炎症因子 环状鸟嘌呤核苷酸腺嘌呤核苷酸合成酶

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6种禾本科植物GEF基因家族鉴定与抗旱性分析

7

作者 申晨 方远鹏 谢鑫 《山地农业生物学报》 2024年第4期1-10,共10页

小G蛋白介导的鸟嘌呤三核苷酸磷酸/鸟嘌呤二核苷酸磷酸(GTP/GDP)信号通路对于植物抗性十分重要,鸟嘌呤核苷酸交换因子(Guanine Nucleotide Exchange Factor, GEF)可对多种小G蛋白进行调节。植物基因组中包括BIG(Brefeldin A-inhibited G... 小G蛋白介导的鸟嘌呤三核苷酸磷酸/鸟嘌呤二核苷酸磷酸(GTP/GDP)信号通路对于植物抗性十分重要,鸟嘌呤核苷酸交换因子(Guanine Nucleotide Exchange Factor, GEF)可对多种小G蛋白进行调节。植物基因组中包括BIG(Brefeldin A-inhibited Guanine Nucleotide Exchange Protein)和GBF(Golgi Brefeldin A-Resistant Guanine Nucleotide Exchange Factor)两类GEF基因,目前,这些GEF基因的系统性鉴定与表达分析尚不明确。因此,本研究采用基因家族鉴定的方法,对禾本科GEF基因家族进行比较分析。结果表明:从6种禾本科(水稻Oryza sativa、小麦Triticum aestivum、节节麦Sorghum bicolor、高粱Aegilops tauschii、谷子Setaria italica、玉米Zea mays)基因组中获得58个GEF基因,分布于45条不同的染色体上。系统发育分析表明,禾本科GEF基因家族包含5个亚家族(BIG1/4、BIG2/3、BIG5、GNL2、GNON),并且存在单拷贝以及基因选择性保留特性。共线性分析进一步确定禾本科GEF基因存在复杂的演化历程。干旱表达结果显示,GEF基因家族在不同禾本科植物、不同亚家族以及拷贝水平上均已产生抗旱性分化。本研究结果将为禾本科作物的抗旱基因筛选提供基础。 展开更多

关键词 禾本科 鸟嘌呤核苷酸交换因子 基因家族 表达分析

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Epac/Rap1信号通路在急性肺损伤中作用的研究进展 被引量：9

8

作者 汪雪峰 陈思煜 陈锋 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期680-683,共4页

急性肺损伤(ALI)中炎症信号通路的失调控以及炎症因子平衡紊乱是其发生和发展的重要原因。能直接被cAMP活化的交换蛋白(Epac)在调节肺部气道炎症和细胞增殖方面是一个新的效应器,新的关于cAMP依赖性蛋白激酶A(PKA)非依赖性通路研究表明,... 急性肺损伤(ALI)中炎症信号通路的失调控以及炎症因子平衡紊乱是其发生和发展的重要原因。能直接被cAMP活化的交换蛋白(Epac)在调节肺部气道炎症和细胞增殖方面是一个新的效应器,新的关于cAMP依赖性蛋白激酶A(PKA)非依赖性通路研究表明,cAMP/Epac/Rap1信号通路参与并行使许多类型细胞的功能,包括细胞分泌、细胞间黏附和连接、细胞凋亡、细胞增殖和分化等。cAMP能通过Epac/Rap1信号通路参与ALI的发病过程,Epac/Rap1信号通路是ALI防治的潜在靶点。本文综述Epac/Rap1信号通路在肺部相关炎症及急性肺损伤中作用机制的国内外研究进展。 展开更多

关键词 急性肺损伤 鸟嘌呤核苷酸交换因子类 气道炎症 环磷酸腺苷

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融合蛋白TAT-RabGEF1原核表达载体的构建及蛋白表达 被引量：3

9

作者 方虹仪 郭娜 +1 位作者 邢纪斌 罗晨芳 《中山大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期61-67,共7页

【目的】构建PET28a-TAT-RabGEF1重组质粒载体,在E.coli Rosetta(DE3)菌株中高效表达并纯化融合蛋白,研究TAT-RabGEF1融合蛋白对肥大细胞的跨膜转导活性。【方法】以小鼠组织cDNA为模板,设计上游和下游含有限制性酶切位点和TAT序列的引... 【目的】构建PET28a-TAT-RabGEF1重组质粒载体,在E.coli Rosetta(DE3)菌株中高效表达并纯化融合蛋白,研究TAT-RabGEF1融合蛋白对肥大细胞的跨膜转导活性。【方法】以小鼠组织cDNA为模板,设计上游和下游含有限制性酶切位点和TAT序列的引物,PCR扩增目的片段TAT-RabGEF1,并通过双酶切构建PET28a-TAT-RabGEF1重组质粒载体,在E.coli Rosetta(DE3)大肠杆菌中诱导表达融合蛋白,产物用亲和层析柱纯化后测量浓度及鉴定。CCK-8检测融合蛋白的细胞毒性,并用荧光显微镜及荧光分光光度计定性定量观察其对小鼠肥大细胞瘤细胞P815的转导活性。【结果】成功构建了PET28a-TAT-RabGEF1重组载体,高效表达了具有较高特异性,相对分子质量约为57 ku的融合蛋白TAT-Rab GEF1,0.1、1、10μmol/L浓度的TAT-RabGEF1蛋白对细胞无明显毒性,荧光显微镜显示1μmol/L浓度的融合蛋白TAT-RabGEF1具有快速转导进入P815细胞内的能力,且为进入细胞的饱和浓度。【结论】通过TAT-RabGEF1的原核表达和蛋白纯化分析,证实了TAT-PTD的跨膜转导活性,为研究RabGEF1在肥大细胞激活途径中的作用提供了物质基础。 展开更多

关键词 鸟嘌呤核苷酸交换因子1 TAT蛋白 融合蛋白 载体构建

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大鼠非梗死区心肌C3G蛋白的表达及苯肾上腺素对其的干预 被引量：3

10

作者 牟杨 李刚 +1 位作者 张灿晶 王志华 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2010年第5期391-394,共4页

目的:探讨非梗死区心肌C3G蛋白的表达及苯肾上腺素对其的干预。方法:选择雄性SD大鼠32只。按Litwin方法建立心肌梗死(简称心梗)及假手术模型。术后3天仍存活的雄性SD大鼠分为假手术组、心梗组、假手术苯肾上腺素组和心梗苯肾上腺素组(各... 目的:探讨非梗死区心肌C3G蛋白的表达及苯肾上腺素对其的干预。方法:选择雄性SD大鼠32只。按Litwin方法建立心肌梗死(简称心梗)及假手术模型。术后3天仍存活的雄性SD大鼠分为假手术组、心梗组、假手术苯肾上腺素组和心梗苯肾上腺素组(各组n=8)。假手术组及心梗组给予生理盐水1ml/(kg.d),假手术苯肾上腺素组及心梗苯肾上腺素组给予苯肾上腺素0.65mg/(kg.d),腹腔注射,至干预后8周。干预后应用免疫印迹法检测非梗死区心肌C3G蛋白的表达。结果:干预后12周,非梗死区心肌C3G蛋白表达积分光密度值(免疫印迹)分别为:假手术组(0.33±0.06),心梗组(0.81±0.05),假手术苯肾上腺素组(0.40±0.06),心梗苯肾上腺素组(0.62±0.07)。与假手术组比较,心梗组、心梗苯肾上腺素组非梗死区心肌C3G蛋白表达均增加,差异均有统计学意义(P<0.05);心梗苯肾上腺素组较心梗组非梗死区心肌C3G蛋白的表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);而假手术苯肾上腺素组较假手术组非梗死区心肌C3G蛋白表达差异无统计学意义。结论:非梗死区心肌C3G蛋白的表达显著增加,而苯肾上腺素可显著调低其表达,提示C3G蛋白与梗死后心室重塑有关。 展开更多

关键词 鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF) C3G蛋白 心肌梗塞 苯肾上腺素

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Vav1对T细胞的调控作用及其与相关疾病的关系 被引量：1

11

作者 张毓川 陈玮 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期75-81,共7页

Vav1作为T细胞受体下游的关键信号分子,拥有鸟苷酸交换因子功能的催化核心结构DH-PH-ZF和接头蛋白功能的SH3-SH2-SH3结构,因而在T细胞发育、活化、增殖和功能发挥等各个阶段,以及在自身免疫性疾病、移植排斥和肿瘤等发生、发展中具有不... Vav1作为T细胞受体下游的关键信号分子,拥有鸟苷酸交换因子功能的催化核心结构DH-PH-ZF和接头蛋白功能的SH3-SH2-SH3结构,因而在T细胞发育、活化、增殖和功能发挥等各个阶段,以及在自身免疫性疾病、移植排斥和肿瘤等发生、发展中具有不同的调控作用,可为临床治疗提供潜在靶点。本文综述了Vav1对T细胞的调控作用及其与相关疾病的关系。 展开更多

关键词 T淋巴细胞/生理学 鸟嘌呤核苷酸交换因子类/生理学 自身免疫疾病 移植物排斥 淋巴瘤 T细胞 综述

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C3G/Rap1和Dock180/Rac1信号通路在卵巢癌浸润中的作用 被引量：13

12

作者 高一萌 张瑜 +5 位作者 李文燕 车亚玲 王瑾 刘斌 王辉 令狐华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1031-1034,共4页

目的探讨鸟嘌呤核苷酸交换因子C3G/Rap1酶和鸟嘌呤核苷酸交换因子Dock180/Rac1酶信号通路在卵巢癌浸润中的可能作用。方法 Western blot检测Dock180沉默的卵巢癌细胞SKOV3中C3G的表达,验证上皮性卵巢癌组织中Dock180与C3G的表达相关性;... 目的探讨鸟嘌呤核苷酸交换因子C3G/Rap1酶和鸟嘌呤核苷酸交换因子Dock180/Rac1酶信号通路在卵巢癌浸润中的可能作用。方法 Western blot检测Dock180沉默的卵巢癌细胞SKOV3中C3G的表达,验证上皮性卵巢癌组织中Dock180与C3G的表达相关性;免疫组化比较卵巢癌组织中Dock180与C3G的表达趋势;免疫荧光观察SKOV3中Dock180与C3G及它们各自的下游蛋白Rac1/Rap1的定位。结果 Dock180基因沉默的细胞中C3G表达明显增强(P<0.05);Dock180与C3G在卵巢癌组织中的表达呈现相反趋势(P<0.05);C3G/Dock180均主要分布于细胞质,下游效应蛋白Rap1/Rac1在细胞膜和细胞质都有表达,但Rap1以细胞质为主,而Rac1可以伸展至细胞膜及细胞膜皱褶。结论卵巢癌细胞和组织中C3G与Dock180表达呈相反趋势,下游蛋白Rap1与Rac1在细胞内的定位分布差异,可能与C3G/Rap1和Dock180/Rac1信号通路在卵巢肿瘤浸润中的不同作用有关。 展开更多

关键词 鸟嘌呤核苷酸释放因子2 rap1 GTP结合蛋白质类 卵巢肿瘤 肿瘤细胞 培养的 肿瘤浸润

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GEP100基因沉默抑制胰腺癌细胞AsPC-1的侵袭能力 被引量：4

13

作者 谢传高 魏树梅 +2 位作者 陈清宇 陈佳敏 蔡建庭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1348-1351,共4页

目的:研究鸟嘌呤核苷酸交换蛋白100(GEP100)基因沉默对胰腺癌细胞体外侵袭能力的影响。方法:将质粒pSuper-retro-puro-GEP100转染入胰腺癌AsPC-1细胞株,通过RNA干扰建立GEP100基因稳定沉默的细胞克隆。以基质侵润实验检测细胞体外侵袭能... 目的:研究鸟嘌呤核苷酸交换蛋白100(GEP100)基因沉默对胰腺癌细胞体外侵袭能力的影响。方法:将质粒pSuper-retro-puro-GEP100转染入胰腺癌AsPC-1细胞株,通过RNA干扰建立GEP100基因稳定沉默的细胞克隆。以基质侵润实验检测细胞体外侵袭能力,以过河实验检测细胞移动能力,以Western blotting检测细胞上皮型钙黏连蛋白(E-cadherin)的表达。结果:沉默GEP100表达后,细胞体外侵袭能力明显受抑,基质侵润实验显示,GEP100干扰组、空载体对照组、未转染组的穿膜细胞分别为每视野46.62±5.25、115.40±12.46、111.82±10.82,干扰组与空载体对照组、未转染组间均存在明显差异(P<0.01);细胞的移动能力仅受到轻微影响,GEP100干扰组、空载体对照组、未转染组细胞的过河时间分别为(52.68±4.12)h、(47.56±3.42)h、(48.60±5.24)h,各组间无明显差异;沉默GEP100促使细胞从间皮形态向上皮形态转化,并显著增加了E-cadherin蛋白表达(P<0.05)。结论:沉默GEP100可明显抑制胰腺癌细胞的侵袭能力,而对细胞的移动能力无明显影响,E-cad-herin表达上调,细胞表现出间皮向上皮形态转化倾向,提示GEP100可能通过调节E-cadherin的表达来影响细胞间黏附连接的功能,从而在胰腺癌的侵润转移中发挥重要作用。 展开更多

关键词 胰腺肿瘤 E—cadherin 肿瘤侵润 肿瘤转移 鸟嘌呤核苷酸交换蛋白100

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VAV2蛋白DH结构域与CDC42蛋白相互作用的亲和力和热力学参数研究

14

作者 何诗雨 串俊兰 杨正林 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1492-1496,共5页

目的:利用等温滴定量热技术研究VAV2蛋白的DH结构域(VAV2-DH)与CDC42的相互作用。方法 :首先分别将VAV2-DH和CDC42蛋白的编码基因克隆至pGEX-6p-1和pET28a载体上,构建VAV2-DH和CDC42蛋白的重组表达载体。再将重组表达载体转入大肠杆菌... 目的:利用等温滴定量热技术研究VAV2蛋白的DH结构域(VAV2-DH)与CDC42的相互作用。方法 :首先分别将VAV2-DH和CDC42蛋白的编码基因克隆至pGEX-6p-1和pET28a载体上,构建VAV2-DH和CDC42蛋白的重组表达载体。再将重组表达载体转入大肠杆菌中诱导表达蛋白,并亲和层析、凝胶过滤层析纯化得到VAV2-DH和CDC42蛋白,最后利用鸟嘌呤核苷酸交换试验来验证VAV2-DH的鸟苷酸交换活性,并采用等温滴定量热技术检测这2种蛋白质相互作用的亲和力和热力学参数。结果:VAV2-DH和CDC42蛋白的平衡解离常数K_(D)=(11.44±2.12)μmol/L,其中摩尔结合焓DH=(-224.33±95.48) kJ/mol、-TDS=(195.97±95.95) kJ/mol、吉布斯自由能DG=(-28.30±0.49) kJ/mol。结论:VAV2-DH和CDC42蛋白属于中等强度的相互作用,是一个焓驱动的结合过程。 展开更多

关键词 VAV2 CDC42 鸟嘌呤核苷酸交换因子 蛋白相互作用 等温滴定量热法

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动物免疫增强剂的研究进展 被引量：5

15

作者 王思芦 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期195-199,共5页

免疫增强剂可促进动物对抗原的免疫应答反应,显著增强疫苗的免疫效果。文章综述了动物疫苗研究领域中的免疫增强剂,如免疫刺激复合物、脂质体、细胞因子、胞嘧啶-鸟嘌呤寡脱氧核苷酸和天然产物对动物疫苗免疫效果的影响,并对免疫增强剂... 免疫增强剂可促进动物对抗原的免疫应答反应,显著增强疫苗的免疫效果。文章综述了动物疫苗研究领域中的免疫增强剂,如免疫刺激复合物、脂质体、细胞因子、胞嘧啶-鸟嘌呤寡脱氧核苷酸和天然产物对动物疫苗免疫效果的影响,并对免疫增强剂的发展趋势作了展望。 展开更多

关键词 免疫增强剂 免疫刺激复合物 脂质体 细胞因子 胞嘧啶-鸟嘌呤寡脱氧核苷酸 天然产物

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心肌梗死模型大鼠梗死区周围心肌C3G蛋白的表达变化及其意义 被引量：2

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作者 王丽平 李刚 +2 位作者 王志华 刘小兰 赵文菊 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期770-773,共4页

目的观察心肌梗死模型大鼠梗死区周围心肌C3G蛋白表达的改变及其意义。方法健康雄性SD大鼠随机分为心肌梗死组和假手术组,按照Litwin方法建立实验性大鼠心肌梗死及假手术模型。于术后24h和12周处死两组大鼠,收集心肌标本。取心尖部心肌... 目的观察心肌梗死模型大鼠梗死区周围心肌C3G蛋白表达的改变及其意义。方法健康雄性SD大鼠随机分为心肌梗死组和假手术组,按照Litwin方法建立实验性大鼠心肌梗死及假手术模型。于术后24h和12周处死两组大鼠,收集心肌标本。取心尖部心肌(心肌梗死组取含梗死区的心肌组织),采用苦味酸天狼星及免疫组化方法检测心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原容积(CVFⅠ、Ⅲ)及C3G蛋白表达情况;取心底部心肌(心肌梗死组取非梗死区的心肌组织),采用Western blotting检测C3G蛋白的相对表达量。结果苦味酸天狼星染色结果显示,心肌梗死后12周组心肌细胞中CVFⅠ、Ⅲ分别为14.01±2.73、4.80±0.64,明显高于假手术后24h组(3.15±0.70、1.42±0.48),心肌梗死后24h组(3.68±0.95、1.53±0.61)以及假手术后12周组(3.27±0.65、1.47±0.52),差异有统计学意义(P<0.05),而后3组间差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化检测显示,心肌梗死后12周组心肌中C3G蛋白表达较其他3组均显著增加(P<0.05),而后3组间比较无明显差异(P>0.05)。Western blotting检测显示,与假手术后12周组(0.22±0.04)、假手术后24h组(0.22±0.04)、心肌梗死后24h组(0.29±0.02)比较,心肌梗死后12周组梗死区周围心肌C3G蛋白表达(0.56±0.06)显著增加(P<0.05)。结论心肌中存在C3G蛋白表达。发生心肌梗死后,梗死区周围心肌C3G蛋白表达水平显著增加,提示C3G蛋白参与了梗死后的心肌重塑。 展开更多

关键词 鸟嘌呤核苷酸释放因子2 心肌梗死 大鼠

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