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激光扫描共聚焦显微技术在本科实验教学中的应用
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作者 张楚英 孙彩云 +2 位作者 许佳玲 陈笑霞 张雁 《实验室研究与探索》 北大核心 2025年第2期152-157,共6页
基于科教融合的教学理念,在本科生课程“生物科学综合实验”细胞培养单元中融入激光扫描共聚焦显微技术,进行不同细胞、不同培养条件设计,引导学生通过观察细胞形态,进一步分析在不同培养条件下细胞的变化。该实验教学改革不仅可以充分... 基于科教融合的教学理念,在本科生课程“生物科学综合实验”细胞培养单元中融入激光扫描共聚焦显微技术,进行不同细胞、不同培养条件设计,引导学生通过观察细胞形态,进一步分析在不同培养条件下细胞的变化。该实验教学改革不仅可以充分发挥学生主观能动性以及创新思维能力,还能拓宽学生科研视野,为开展课题研究提供更广泛的思路与方法。 展开更多
关键词 激光扫描聚焦显微镜 科教融合 生物科学 综合实验 细胞培养
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细胞凋亡过程中细胞骨架改变的激光共聚焦显微镜观察 被引量:10
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作者 吴波 高清 +2 位作者 刘琦 石群立 孟奎 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期361-366,共6页
目的:了解细胞凋亡过程中细胞骨架的形态学改变。方法:应用高浓度全反式维甲酸诱导卵巢癌细胞凋亡,激光共聚焦显微镜观察经荧光染色的细胞微管蛋白的形态学变化。结果:凋亡早期,微管蛋白在荧光相由正常按一定方向分布的丝网状结构变成... 目的:了解细胞凋亡过程中细胞骨架的形态学改变。方法:应用高浓度全反式维甲酸诱导卵巢癌细胞凋亡,激光共聚焦显微镜观察经荧光染色的细胞微管蛋白的形态学变化。结果:凋亡早期,微管蛋白在荧光相由正常按一定方向分布的丝网状结构变成杂乱分布的网状结构,晚期呈细颗粒状分布,荧光强度随凋亡发展而逐渐变弱。讨论:在凋亡过程中,细胞骨架随凋亡发展出现相应的形态学改变,凋亡早期,细胞骨架在分布上出现变化,伴随细胞形态出现变化,凋亡晚期,细胞骨架蛋白发生降解,此时的细胞形态改变是不可逆的。 展开更多
关键词 细胞凋亡 微管蛋白 激光聚焦显微镜 免疫荧光染色
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激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)在植物细胞学中的应用 被引量:8
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作者 张莹 谷巍 陈建伟 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期195-197,共3页
激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)有效地排除了非焦平面信息,提高了分辨率及对比度,使图像更为精确清晰。目前已广泛应用于植物细胞学研究,在植物药研究方面有着广阔的应用前景。综述近年来的相关研究以反映其最新进展。
关键词 激光聚焦显微镜(LSCM) 植物细胞 植物药 应用
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利用膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时系统观察心肌细胞浆内钙离子的释放 被引量:5
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作者 沈亚峰 梁文 +5 位作者 雷长海 汤莹 范小燕 羊富光 杨勇骥 祝建 《电子显微学报》 CAS CSCD 2008年第2期127-130,共4页
目的:采用膜片钳和激光扫描共聚焦显微镜同步实时系统观察心肌细胞钙离子的释放。方法:在体外培养的单个心室肌细胞上进行全细胞模式膜片钳技术和共聚焦显微镜钙成像技术相结合,同步实时记录钙火花和钙离子浓度变化。结果:在全细胞模式... 目的:采用膜片钳和激光扫描共聚焦显微镜同步实时系统观察心肌细胞钙离子的释放。方法:在体外培养的单个心室肌细胞上进行全细胞模式膜片钳技术和共聚焦显微镜钙成像技术相结合,同步实时记录钙火花和钙离子浓度变化。结果:在全细胞模式膜片钳记录心肌细胞膜钙电流的同时,激光扫描共聚焦显微镜可准确记录到胞浆内出现的钙火花。此技术有可能对于明确钙火花的特征,准确理解兴奋-收缩偶联的微观机制有重要意义。 展开更多
关键词 膜片钳 激光扫描聚焦显微镜 钙火花 心肌细胞 钙电流
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应用共聚焦激光扫描显微镜对体外培养人脐静脉内皮细胞的研究 被引量:5
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作者 姚忠祥 蔡文琴 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期205-207,共3页
目的:研究内皮细胞内Ca2+。方法:应用共聚焦激光扫描显微镜术(CLSM)研究体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)胞浆内游离Ca2+变化。结果:5μmol/LFluo-3/AM恒温(37℃)孵育体外培养HU-VEC... 目的:研究内皮细胞内Ca2+。方法:应用共聚焦激光扫描显微镜术(CLSM)研究体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)胞浆内游离Ca2+变化。结果:5μmol/LFluo-3/AM恒温(37℃)孵育体外培养HU-VEC60min即可达到最佳负载效果,孵育时间的再延长只能增加背景染色,随着观察时间的延长荧光强度逐渐减弱,可能是荧光淬灭的结果。另外,胞浆内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)在整个细胞内的分布是不均匀的,其确切意义尚不清楚。结论:胞浆内游离Ca2+的标记需要适宜的条件,并尽早检测。Ca2+在细胞内的分布是不均匀的。 展开更多
关键词 内皮细胞 脐静脉 聚焦激光扫描显微镜 体外培养 钙离子
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TGF-β_1对人牙髓细胞内钙影响的激光共聚焦显微镜动态观察 被引量:2
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作者 王景杰 牛忠英 +1 位作者 倪龙兴 王春梅 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期192-195,共4页
目的 :探讨 TGF- β1 信号转导过程与人牙髓细胞内钙〔( Ca2 +) i〕的关系。方法 :体外培养人牙髓细胞经钙荧光指示剂 Fluo- 3负载后 ,用激光扫描共聚焦显微镜测定 TGF- β1 影响前后的人牙髓细胞内钙随时间变化情况。结果 :TGF- β1 ( ... 目的 :探讨 TGF- β1 信号转导过程与人牙髓细胞内钙〔( Ca2 +) i〕的关系。方法 :体外培养人牙髓细胞经钙荧光指示剂 Fluo- 3负载后 ,用激光扫描共聚焦显微镜测定 TGF- β1 影响前后的人牙髓细胞内钙随时间变化情况。结果 :TGF- β1 ( 0 .1ng/ L)使人牙髓细胞内钙先升高后降低 ,最后维持在比加药前稍高的静息钙水平上。结论 :通过 TGF-β可引起牙髓细胞内 Ca2 +水平的显著变化 ,证明 Ca2 +参与了人牙髓细胞 TGF-β1 展开更多
关键词 转化生长因子Β 牙髓细胞 激光扫描聚焦显微镜
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激光扫描共聚焦显微镜和Fluo-3/AM检测细胞内游离钙 被引量:3
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作者 霍霞 鲍永耀 +2 位作者 黄辉 黄行许 朴英杰 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期35-37,共3页
利用细胞培养技术,Ca2+敏感荧光探针Fluo-3/AM标记细胞,激光扫描共聚焦显微镜检测鸡胚胎巨噬细胞内游离钙浓度(〔Ca2+〕i)的变化。结果显示细菌脂多糖(LPS)可引起培养的鸡胚胎巨噬细胞内〔Ca2+〕i升高... 利用细胞培养技术,Ca2+敏感荧光探针Fluo-3/AM标记细胞,激光扫描共聚焦显微镜检测鸡胚胎巨噬细胞内游离钙浓度(〔Ca2+〕i)的变化。结果显示细菌脂多糖(LPS)可引起培养的鸡胚胎巨噬细胞内〔Ca2+〕i升高,LPS的作用可被维拉帕米部分抑制。本实验表明激光扫描共聚焦显微镜结合Fluo-3/AM能准确迅速地检测单个或多个贴壁粘附细胞胞内〔Ca2+〕i的动态变化,并同步观察细胞的形态及其荧光分布情况。 展开更多
关键词 激光扫描 聚焦显微镜 巨噬细胞 显微镜
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激光扫描共聚焦显微镜观察细胞在丝素纤维织物上的生长情况 被引量:2
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作者 李冰燕 洪承皎 +1 位作者 张保国 左保齐 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期70-71,共2页
利用激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)技术,用活细胞荧光示踪剂标记细胞,观察细胞在天然丝素纤维和再生丝素纤维上的生长情况。用含10μmol/L Cell-Tracker CM-DiI(Molecular Probes Company)的无血清RPM... 利用激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)技术,用活细胞荧光示踪剂标记细胞,观察细胞在天然丝素纤维和再生丝素纤维上的生长情况。用含10μmol/L Cell-Tracker CM-DiI(Molecular Probes Company)的无血清RPMIl640培养液,室温标记V79、3T3和原代心肌细胞30min,接种于Glass Bottom Dish中,将两种受试材料分别放入Glass Bottom Dish中,继续培养。在加入受试材料后1、2、3、4、5,7天,利用LSCM技术,采用双通道同时扫描的方式,一个通道的激发波长为534nm,发射波长为540-650nm,另一个通道使用微分干涉差成像技术,动态观察细胞在再生丝素纤维受试材料的生长情况。实验发现V79细胞和3T3细胞在天然丝素纤维上是接种后5天明显增多,在再生丝素纤维上生长数量是接种后4天明显增多,而且比在天然丝素纤维生长的数量多。原代心肌细胞在天然和再生丝素纤维上生长得非常少。 展开更多
关键词 激光扫描聚焦显微镜 天然和再生丝素纤维 细胞生长
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利用激光共聚焦显微镜对茉莉酸甲酯诱导后细胞形态学检测 被引量:3
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作者 齐凤慧 詹亚光 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2010年第8期54-55,62,共3页
通过PI-Hoechst两种荧光染料染色,利用激光共聚焦显微镜观察茉莉酸甲酯诱导后茶条槭细胞膜的通透性,通过红色和蓝色荧光颜色观察细胞核的变化。该方法在悬浮细胞培养后,直接用于实验,不受去除细胞壁、固定等的限制。叙述了具体的实验方... 通过PI-Hoechst两种荧光染料染色,利用激光共聚焦显微镜观察茉莉酸甲酯诱导后茶条槭细胞膜的通透性,通过红色和蓝色荧光颜色观察细胞核的变化。该方法在悬浮细胞培养后,直接用于实验,不受去除细胞壁、固定等的限制。叙述了具体的实验方法和实验结果。 展开更多
关键词 茉莉酸甲酯 悬浮细胞 激光聚焦显微镜
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激光扫描共聚焦显微镜在骨髓基质细胞移植中的应用 被引量:1
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作者 万建美 罗蔚锋 +4 位作者 李厚怀 包仕尧 刘春风 张志琳 李冰燕 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期52-53,共2页
目的:探讨激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)技术在骨髓基质细胞(Bone Marrow Stromal Cells,BMSCs)移植中的应用。方法:使用活细胞示踪剂CM-DiI、细胞核探针DAPI和DNA合成前体物BrdU体外标记BMSCs,移植... 目的:探讨激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)技术在骨髓基质细胞(Bone Marrow Stromal Cells,BMSCs)移植中的应用。方法:使用活细胞示踪剂CM-DiI、细胞核探针DAPI和DNA合成前体物BrdU体外标记BMSCs,移植到动物模型体内,利用LSCM技术,观察BMSCs在受体组织内的分布和分化。结果:体外标记BMSCs后再移植到受体,使用LSCM技术可以观察到BMSCs定位于受体心肌组织和脑组织,并有部分BMSCs表达相应的组织特异性蛋白Cx43和GFAP。结论:利用LSCM技术观察BMSCs在受体组织内分布和分化是一种简单可行的方法。 展开更多
关键词 激光扫描聚焦显微镜 骨髓基质干细胞 移植
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利用荧光探针和激光共聚焦显微镜显示玉米根冠细胞微丝分布与变化 被引量:1
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作者 陈颖 郝秋娟 +1 位作者 杨虹 王立安 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2007年第3期101-104,共4页
利用罗丹明标记的鬼笔环肽为荧光探针,通过激光共聚焦荧光显微镜,观察了玉米根冠细胞中微丝的分布与变化。结果显示:脱落的玉米根冠细胞中存在微丝网络,纤细的微丝相互交织,并与荧光颗粒交叉相连,其中在细胞核、质体等细胞器周围较密集... 利用罗丹明标记的鬼笔环肽为荧光探针,通过激光共聚焦荧光显微镜,观察了玉米根冠细胞中微丝的分布与变化。结果显示:脱落的玉米根冠细胞中存在微丝网络,纤细的微丝相互交织,并与荧光颗粒交叉相连,其中在细胞核、质体等细胞器周围较密集,可见放射状微丝束,暗示微丝的功能与细胞核、细胞器的活动相关。细胞松弛素B可破坏微丝分布;来自玉米小斑病菌C小种的致病毒素对微丝网络也有专化破坏作用,并且它们对微丝的破坏作用随着浓度的增大而加强。 展开更多
关键词 根冠细胞 微丝 玉米小斑病菌C小种致病毒素(HMC) 激光聚焦显微镜
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激光共聚焦显微镜样品制备方法(一)——细胞培养样品 被引量:10
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作者 余礼厚 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期185-188,共4页
随着激光共聚焦显微镜在生物学研究中的广泛应用,绿色荧光融合蛋白能够提供蛋白质在细胞体内的精确时空信息。因此免疫荧光样品的制备也成为基本的细胞生物学实验方法。本文主要介绍在培养细胞中表达绿色荧光融合蛋白及免疫荧光样品的... 随着激光共聚焦显微镜在生物学研究中的广泛应用,绿色荧光融合蛋白能够提供蛋白质在细胞体内的精确时空信息。因此免疫荧光样品的制备也成为基本的细胞生物学实验方法。本文主要介绍在培养细胞中表达绿色荧光融合蛋白及免疫荧光样品的制备过程。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 细胞培养 免疫荧光 激光聚焦显微镜
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口腔移植材料与成骨细胞相容性的激光共聚焦显微镜观察 被引量:1
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作者 李剑 龚苏俊 李瑞元 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期812-815,共4页
目的:观察不同处理的钛金属表面与成骨细胞的生物相容性。方法:利用共聚焦显微镜荧光信号通过物镜返回光电倍增管成像的原理,获取不透光的钛金属表面图像,对钛金属表面(打磨、喷砂、喷砂酸蚀表面)接种的成骨细胞骨架进行荧光标记,并用... 目的:观察不同处理的钛金属表面与成骨细胞的生物相容性。方法:利用共聚焦显微镜荧光信号通过物镜返回光电倍增管成像的原理,获取不透光的钛金属表面图像,对钛金属表面(打磨、喷砂、喷砂酸蚀表面)接种的成骨细胞骨架进行荧光标记,并用共聚焦显微镜获取荧光图像,观察细胞和钛金属表面的生物相容性,并且通过逐渐深入的多层扫描,探索细胞和移植材料结合的进一步信息。结果:喷砂表面适合成骨细胞的贴附和生长。结论:钛金属与成骨细胞的结合情况主要与金属表面的物理形态有关。 展开更多
关键词 激光聚焦显微镜 成骨细胞
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肝细胞癌癌组织三维形态学观察——共聚焦激光扫描显微镜的应用
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作者 张王海 朱世能 +2 位作者 陆世伦 黄娅林 赵鹏 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 1998年第4期247-250,共4页
目的 应用CLSM对肝细胞癌标本的石蜡切片进行三维重建,显示立体形态特点,探讨CLSM在肿瘤病理学中的应用.方法 30μm石蜡切片,YOYO-1碘化物DNA荧光探针标记细胞核,CLSM连续光学切片、三维重建,观察肝细胞癌、不典型增生及正常肝组织的三... 目的 应用CLSM对肝细胞癌标本的石蜡切片进行三维重建,显示立体形态特点,探讨CLSM在肿瘤病理学中的应用.方法 30μm石蜡切片,YOYO-1碘化物DNA荧光探针标记细胞核,CLSM连续光学切片、三维重建,观察肝细胞癌、不典型增生及正常肝组织的三维形态特点.结果 肝癌细胞核排列紊乱、积堆,体积增大、大小不等、明显多形;核表面不规则、凹凸不平、荧光强度不均;核内染色质分布不均、结构粗糙、多浓集于核膜下.结论 CLSM的断层扫描和三维重建功能提供了高精密度的三维图象和丰富信息,有助于准确诊断. 展开更多
关键词 细胞 三维重建 聚焦 激光扫描显微镜
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激光扫描共聚焦显微镜技术应用于脑脊液淋巴细胞的系列研究
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作者 孔繁元 范学文 +2 位作者 陈桂生 岳建宁 吴若芬 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2007年第2期126-130,共5页
脑脊液(CSF)细胞学经过长期发展至今,已广泛用于多种神经系统疾病,特别是中枢神经系统感染、肿瘤、白血病、寄生虫病、血管病以及免疫性疾病等的诊断和鉴别诊断。近10年来,随着各种检测技术的发展。为脑脊液细胞检测研究提供了新... 脑脊液(CSF)细胞学经过长期发展至今,已广泛用于多种神经系统疾病,特别是中枢神经系统感染、肿瘤、白血病、寄生虫病、血管病以及免疫性疾病等的诊断和鉴别诊断。近10年来,随着各种检测技术的发展。为脑脊液细胞检测研究提供了新的技术和方法。使脑脊液细胞检测具有更大的发展前景和良好的临床应用价值。激光扫描共聚焦显微镜(confocal laser scaning microscope,CLSM)是20世纪80年代发展起来的先进的分子细胞生物学分析仪器,它在荧光显微镜成像等基础上增设了激光扫描装置,利用计算机进行图像处理,将光学成像的分辨力提高了30%~40%。这是光学显微镜发展史上的重大突破。通过其独特的成像原理和检测技术, 展开更多
关键词 激光扫描聚焦显微镜技术 脑脊液细胞 淋巴细胞 中枢神经系统感染 分子细胞生物学 神经系统疾病 临床应用价值 鉴别诊断
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应用共聚焦激光扫描显微镜对体外培养的骨骼肌细胞的研究
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作者 张旭 张超英 梅晓云 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 2002年第5期286-287,共2页
目的 研究骨骼肌细胞内的Ca2 + 。方法 应用共聚焦激光扫描显微镜 (CLSM)研究体外培养骨骼肌细胞 (SMC)胞浆内游离Ca2 + 变化。结果  5 0 μmol/LFluo - 3/AM恒温 (37℃ )孵育体外培养SMC 30min即可达到最佳负载效果 ,孵育时间的再... 目的 研究骨骼肌细胞内的Ca2 + 。方法 应用共聚焦激光扫描显微镜 (CLSM)研究体外培养骨骼肌细胞 (SMC)胞浆内游离Ca2 + 变化。结果  5 0 μmol/LFluo - 3/AM恒温 (37℃ )孵育体外培养SMC 30min即可达到最佳负载效果 ,孵育时间的再延长或荧光染料浓度的提高均可能对细胞造成毒性 ,导致荧光淬灭。结论 胞浆内游离Ca2 + 的标记需要适宜的条件 ,并尽早检测。 展开更多
关键词 体外培养 骨骼肌细胞 聚焦激光扫描显微镜 CA^2+
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大鼠肝组织细胞核基质的激光共聚焦显微镜观察
17
作者 温博贵 吴健宜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第5期458-460,共3页
目的 观察大鼠肝组织细胞核基质的分布,并进行细胞核基质的三维重建。方法 应用间接免疫荧光染色显示核基质的基本形态,在激光共聚劁为微镜下观察,并进行细胞偌质的三维生建。结果 大鼠肝组织细胞核基质仍保持细胞核的形态,呈粗... 目的 观察大鼠肝组织细胞核基质的分布,并进行细胞核基质的三维重建。方法 应用间接免疫荧光染色显示核基质的基本形态,在激光共聚劁为微镜下观察,并进行细胞偌质的三维生建。结果 大鼠肝组织细胞核基质仍保持细胞核的形态,呈粗大的黄绿色点片状 光,细胞核基质的三维重建图显示核基质出现在分裂晚期的肝细胞胞浆中,结论 成功地显示了大鼠肝组织细胞核基质的图像,并进行了核基质的三维重建。 展开更多
关键词 肝组织细胞 核基质 激光聚焦显微镜
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高内涵分析系统联合激光扫描共聚焦显微镜观察细胞间隧道纳米管 被引量:1
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作者 潘鹏宇 赵秋宇 +4 位作者 王英 王建波 李想 刘春英 王淳 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1742-1754,共13页
目的隧道纳米管(tunneling nanotubes,TNTs)是存在于细胞间的膜管样结构,具有直接且远距离的生物信息交换功能。TNTs因结构易破坏、存在时间短以及形成后不稳定,故观察其动态形成与功能存在一定难度。而本研究采用高内涵分析系统(HCA)... 目的隧道纳米管(tunneling nanotubes,TNTs)是存在于细胞间的膜管样结构,具有直接且远距离的生物信息交换功能。TNTs因结构易破坏、存在时间短以及形成后不稳定,故观察其动态形成与功能存在一定难度。而本研究采用高内涵分析系统(HCA)联合激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)尝试观察TNTs形成的动态过程及其对囊泡物质的转运功能。方法荧光探针标记人肺腺癌A549及顺铂耐药A549/DDP细胞,分别利用HCA观察TNTs形成过程、LSCM观察TNTs三维结构、HCA联合LSCM分析TNTs囊泡物质转运功能。结果同种肿瘤细胞(A549或A549/DDP)间、不同亚型肿瘤细胞(A549与A549/DDP)间均可形成TNTs结构;与A549细胞相比,A549/DDP细胞间TNTs结构长且粗、形成指数高(A549和A549/DDP细胞TNTs长度、直径和形成指数分别为14.71μm、2.27μm、4和25.44μm、2.59μm、11);肿瘤细胞间通过细胞接触-膜融合-细胞反向易位-胞膜融合区拉长变细,以及细胞膜凸起-膜凸起丝状伪足样拉长-膜凸起与其他细胞膜/膜凸起融合两种方式形成TNTs;TNTs囊泡转运功能具有双向性,囊泡转运速率及数量因转运阶段和供体细胞不同而存在差异,A549/DDP细胞向A549细胞进行囊泡转运过程中表现为囊泡转运速率初始快、末期慢,A549作为供体细胞向受体A549/DDP细胞转运的囊泡数量和比例高于A549/DDP作为供体细胞的反向转运。结论HCA联合LSCM可有效观察、分析TNTs动态形成过程及囊泡物质转运功能。 展开更多
关键词 高内涵分析 激光扫描聚焦显微镜 隧道纳米管 细胞间交流 细胞间转运 肿瘤
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激光扫描共聚焦显微镜观察近紫外线辐射对兔晶体上皮细胞通讯功能的影响 被引量:1
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作者 王真艳 李立 汤永强 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期82-83,共2页
目的:通过激光扫描共聚焦显微镜荧光漂白恢复技术观察近紫外线对兔晶状体上皮细胞缝隙连接通讯功能的影响。方法:体外培养兔晶状体上皮细胞,设置空白阴性对照,分为对照组和实验组,分别以近紫外线辐射5分钟,10分钟和15分钟,用荧光光漂白... 目的:通过激光扫描共聚焦显微镜荧光漂白恢复技术观察近紫外线对兔晶状体上皮细胞缝隙连接通讯功能的影响。方法:体外培养兔晶状体上皮细胞,设置空白阴性对照,分为对照组和实验组,分别以近紫外线辐射5分钟,10分钟和15分钟,用荧光光漂白恢复技术检测细胞的荧光恢复率。结果:空白对照组荧光恢复率为57.357±5.610,照射5分钟,10分钟和15分钟近紫外线辐射后的荧光恢复率分别为(%)34.205±3.652,18.909±3.017,7.129±2.917。结论:近紫外线损伤可以导致晶状体上皮细胞间通讯功能的受损。 展开更多
关键词 体上皮细胞 荧光漂白后恢复技术 胞间通讯 近紫外线 激光扫描聚焦显微镜
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激光扫描共聚焦显微镜对涡状区和中央区角膜上皮基底神经丛检测一致性比较 被引量:2
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作者 于花 苗英彬 赵少贞 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2020年第5期461-465,共5页
目的比较激光扫描共聚焦显微镜测量中央区和涡状区角膜上皮基底神经丛结果的一致性,从而筛选出更加合理可靠的检查部位。方法前瞻性研究。2018年11月至2019年2月募集年龄在20~40岁的健康志愿者30人作为研究对象,所有受试者经过筛查排除... 目的比较激光扫描共聚焦显微镜测量中央区和涡状区角膜上皮基底神经丛结果的一致性,从而筛选出更加合理可靠的检查部位。方法前瞻性研究。2018年11月至2019年2月募集年龄在20~40岁的健康志愿者30人作为研究对象,所有受试者经过筛查排除影响神经功能的全身和局部病变后纳入本研究。入组受试者均选择右眼为受检眼,由2名经验丰富的医师完成3次激光扫描共聚焦显微镜检查。首先于受试当天由操作者A和操作者B各完成1次检查,1周后再由操作者A重复检查1次。所得图像用Adobe Photoshop图像处理软件拼接后,再用Neuron J图像分析软件进行定量分析,得到神经纤维长度(nerve fiber length,NFL)(mm·mm^-2)。然后分别根据涡状区和中央区NFL值绘制Bland-Altman散点图,并计算重复性系数(coefficient of repeatability,CoR)和95%一致性区间(limit of agreement,LOA),用于评估两个部位观察者内和观察者间一致性。结果所有受检眼均可于角膜中央偏鼻下方查见涡状结构,重复检查获得的涡状区图像显示角膜神经形态稳定,中央区图像显示角膜神经形态变异较大。涡状区一致性分析观察者内CoR值为6.6%,观察者间CoR值为6.1%,一致性很高;而中央区一致性分析观察者内CoR值为44.1%,观察者间CoR值为31.8%,一致性较差。Bland-Altman散点图涡状区观察者内和观察者间测量差值均聚集于“0”刻度线附近,且95%LOA较窄,均在平均NFL的1个标准差的区间内,一致性良好;中央区观察者内和观察者间测量差值分布较分散,95%LOA较宽,约为两次检查平均NFL标准差的2~3倍,一致性较差。结论涡状结构在健康人角膜上皮基底神经丛普遍存在,其形态特殊,位置固定,在图像采集时能够作为明确的角膜标记物;涡状区图像重复测量一致性良好,可以应用于角膜上皮基底神经丛的定量分析。 展开更多
关键词 结构 角膜上皮基底神经丛 激光扫描聚焦显微镜 重复测量一致性
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