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鳞头犬牙南极鱼atp6v0c基因在HeLa细胞中抗寒功能的研究
被引量：
3
1
作者
刘明丽
王金凤
+1 位作者
张东
陈良标
《大连海洋大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第1期7-12,共6页
为探求南极鱼ATP酶类在低温适应下的作用,从鳞头犬牙南极鱼Dissostichus mawsoni的c DNA文库中克隆atp6v0c基因(dmatp6v0c),并转染到He La细胞中,通过流式细胞仪检测细胞在低温胁迫下(10℃)的死亡率,获得了dmatp6v0c基因的全部编码序列...
为探求南极鱼ATP酶类在低温适应下的作用,从鳞头犬牙南极鱼Dissostichus mawsoni的c DNA文库中克隆atp6v0c基因(dmatp6v0c),并转染到He La细胞中,通过流式细胞仪检测细胞在低温胁迫下(10℃)的死亡率,获得了dmatp6v0c基因的全部编码序列,其长度为462 bp,并将其插入到真核表达载体pc DNA3.1(-)上用于体外表达。结果表明,与对照组相比,在低温胁迫下,过表达dmatp6v0c基因的He La细胞死亡率从(19.23±1.87)%显著降低到(8.13±0.04)%(P<0.05)。研究表明,在低温胁迫下dmatp6v0c基因过表达能显著降低He La细胞的死亡率,试验结果可为dmatp6v0c基因作为鱼类耐寒育种的候选基因提供理论依据。
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关键词
鳞头犬牙南极鱼
低温胁迫
dmatp6v0c基因
HELA细胞
细胞死亡率
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职称材料
鳞头犬牙南极鱼LeptinB基因在抵御低温应激中的作用
2
作者
万金铭
王映
陈良标
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2023年第6期97-106,共10页
为了探究瘦素基因(LeptinB,LepB)在斑马鱼肝脏细胞系(ZFL)低温应激中的作用,本研究根据鳞头犬牙南极鱼(Dissostichusmawsoni)LepB基因(DM-LepB)编码的氨基酸序列,克隆到构建的pTOL2-actin-EGFP质粒中(启动子为斑马鱼的β-actin)。选取Ec...
为了探究瘦素基因(LeptinB,LepB)在斑马鱼肝脏细胞系(ZFL)低温应激中的作用,本研究根据鳞头犬牙南极鱼(Dissostichusmawsoni)LepB基因(DM-LepB)编码的氨基酸序列,克隆到构建的pTOL2-actin-EGFP质粒中(启动子为斑马鱼的β-actin)。选取Eco RⅠ和Bam HⅠ为限制酶,设计构建了pTOL2-LepB+HIS-EGFP表达载体,并转染至ZFL细胞中。选择致死温度10℃进行实验,采用流式细胞术检测了低温胁迫下细胞的存活率,使用增强型CCK-8试剂盒检测了低温条件下细胞的生长增殖情况,使用荧光探针DHE检测了细胞活性氧(ROS)含量。结果显示,Lep B基因的过表达能有效减少细胞ROS的产生,减轻细胞凋亡以应对低温胁迫。分析还显示,DM-LepB的过表达也有利于维持低温刺激下的胞内ATP水平与线粒体状态,有效减轻低温刺激对细胞的凋亡和坏死作用,对细胞冷应激起到保护作用。采用油红O染色和甘油三酯(TG)实验检测发现,DM-LepB基因能减缓低温刺激时细胞脂质的消耗,较多的脂质保留可减弱低温刺激对细胞的伤害,使得细胞能更好地抵抗低温损害。研究结果为揭示南极鱼类的低温适应分子机制提供了基础资料。。
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关键词
鳞头犬牙南极鱼
LeptinB
低温应激
细胞凋亡
脂质代谢
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职称材料
题名
鳞头犬牙南极鱼atp6v0c基因在HeLa细胞中抗寒功能的研究
被引量：
3
1
作者
刘明丽
王金凤
张东
陈良标
机构
上海海洋大学水产与生命学院省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室
出处
《大连海洋大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第1期7-12,共6页
基金
国家"973"重点基础研究发展计划项目(2010CB126304)
国家基金委重点项目(31130049)
上海市一流学科水产基础生物学项目
文摘
为探求南极鱼ATP酶类在低温适应下的作用,从鳞头犬牙南极鱼Dissostichus mawsoni的c DNA文库中克隆atp6v0c基因(dmatp6v0c),并转染到He La细胞中,通过流式细胞仪检测细胞在低温胁迫下(10℃)的死亡率,获得了dmatp6v0c基因的全部编码序列,其长度为462 bp,并将其插入到真核表达载体pc DNA3.1(-)上用于体外表达。结果表明,与对照组相比,在低温胁迫下,过表达dmatp6v0c基因的He La细胞死亡率从(19.23±1.87)%显著降低到(8.13±0.04)%(P<0.05)。研究表明,在低温胁迫下dmatp6v0c基因过表达能显著降低He La细胞的死亡率,试验结果可为dmatp6v0c基因作为鱼类耐寒育种的候选基因提供理论依据。
关键词
鳞头犬牙南极鱼
低温胁迫
dmatp6v0c基因
HELA细胞
细胞死亡率
Keywords
Dissostichus mawsoni
cold stress
dmatp6vOc gene
HeLa cell
cell mortality
分类号
Q291 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
鳞头犬牙南极鱼LeptinB基因在抵御低温应激中的作用
2
作者
万金铭
王映
陈良标
机构
上海海洋大学国家海洋生物科学国际联合研究中心水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室
上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心
出处
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2023年第6期97-106,共10页
基金
国家重点研发计划项目(2018YFD0900600)
上海市科委“一带一路”国际联合实验室项目(19590750500)
上海市教委研创新计划项目(2017-01-07-00-10-E00060)共同资助。
文摘
为了探究瘦素基因(LeptinB,LepB)在斑马鱼肝脏细胞系(ZFL)低温应激中的作用,本研究根据鳞头犬牙南极鱼(Dissostichusmawsoni)LepB基因(DM-LepB)编码的氨基酸序列,克隆到构建的pTOL2-actin-EGFP质粒中(启动子为斑马鱼的β-actin)。选取Eco RⅠ和Bam HⅠ为限制酶,设计构建了pTOL2-LepB+HIS-EGFP表达载体,并转染至ZFL细胞中。选择致死温度10℃进行实验,采用流式细胞术检测了低温胁迫下细胞的存活率,使用增强型CCK-8试剂盒检测了低温条件下细胞的生长增殖情况,使用荧光探针DHE检测了细胞活性氧(ROS)含量。结果显示,Lep B基因的过表达能有效减少细胞ROS的产生,减轻细胞凋亡以应对低温胁迫。分析还显示,DM-LepB的过表达也有利于维持低温刺激下的胞内ATP水平与线粒体状态,有效减轻低温刺激对细胞的凋亡和坏死作用,对细胞冷应激起到保护作用。采用油红O染色和甘油三酯(TG)实验检测发现,DM-LepB基因能减缓低温刺激时细胞脂质的消耗,较多的脂质保留可减弱低温刺激对细胞的伤害,使得细胞能更好地抵抗低温损害。研究结果为揭示南极鱼类的低温适应分子机制提供了基础资料。。
关键词
鳞头犬牙南极鱼
LeptinB
低温应激
细胞凋亡
脂质代谢
Keywords
Dissostichus mawsoni
LeptinB
Low-temperature stress
Apoptosis
Lipid metabolism.
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
S917.4 [农业科学—水产科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鳞头犬牙南极鱼atp6v0c基因在HeLa细胞中抗寒功能的研究
刘明丽
王金凤
张东
陈良标
《大连海洋大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
鳞头犬牙南极鱼LeptinB基因在抵御低温应激中的作用
万金铭
王映
陈良标
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2023
0
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