鱼腥蓝细菌PCC 7120中sigC突变体的构建和表型分析 被引量：4

1

作者 苏波 陈雯莉 王莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期46-50,共5页

为明确鱼腥蓝细菌PCC 7120中sigC(all1692)基因与异形胞分化的关系,通过同源重组构建了sigC的缺失突变体MsigC和互补菌株,对其进行表型分析。结果表明,在缺乏化合态氮源时,MsigC的异形胞分化频率显著低于野生型,而在互补菌株CsigC中,异... 为明确鱼腥蓝细菌PCC 7120中sigC(all1692)基因与异形胞分化的关系,通过同源重组构建了sigC的缺失突变体MsigC和互补菌株,对其进行表型分析。结果表明,在缺乏化合态氮源时,MsigC的异形胞分化频率显著低于野生型,而在互补菌株CsigC中,异源表达的sigC可以互补突变体异形胞分化频率降低的表型。表明sigC参与异形胞分化的调控。 展开更多

关键词 鱼腥蓝细菌PCC 7120 sigC 异形胞分化

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单交换法构建鱼腥蓝细菌ftsZ的gfp原位标记菌株 被引量：2

2

作者 牛天彩 胡胜 +1 位作者 陈雯莉 王莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期30-36,共7页

利用单交换法将gfp整合到鱼腥蓝细菌PCC 7120基因组上,构建ftsZ-gfp的翻译融合菌株,并观察了FtsZ蛋白的亚细胞定位。结果表明:通过同源重组,gfp与基因组中唯一完整的ftsZ融合,既保证了ftsZ基因的正常表达又能准确反映ftsZ蛋白的亚细胞定... 利用单交换法将gfp整合到鱼腥蓝细菌PCC 7120基因组上,构建ftsZ-gfp的翻译融合菌株,并观察了FtsZ蛋白的亚细胞定位。结果表明:通过同源重组,gfp与基因组中唯一完整的ftsZ融合,既保证了ftsZ基因的正常表达又能准确反映ftsZ蛋白的亚细胞定位,并且实验周期短、操作方便,是研究蛋白质亚细胞定位的一种简单有效的方法。 展开更多

关键词 鱼腥蓝细菌PCC 7120 单交换 FTSZ GFP

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MreB在鱼腥蓝细菌PCC 7120细胞分裂过程中的功能 被引量：2

3

作者 李东霞 王莉 陈雯莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期672-678,共7页

为研究Anabaena sp. PCC 7120中的细胞形态决定蛋白MreB的亚细胞定位和功能,构建了由mreB自身启动子驱动的mreB-gfp融合载体,通过接合转移的方法将其转化到野生型Anabaena sp. PCC 7120中,获得绿色荧光蛋白标记的MreB的鱼腥蓝细菌菌株,... 为研究Anabaena sp. PCC 7120中的细胞形态决定蛋白MreB的亚细胞定位和功能,构建了由mreB自身启动子驱动的mreB-gfp融合载体,通过接合转移的方法将其转化到野生型Anabaena sp. PCC 7120中,获得绿色荧光蛋白标记的MreB的鱼腥蓝细菌菌株,同时用MreB的抑制剂A22处理菌株。结果显示,MreB的亚细胞定位随着细胞周期的进程而发生变化,A22处理可导致MreB无法正确聚合定位。 展开更多

关键词 鱼腥蓝细菌PCC 7120 MREB A22 细胞分裂

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鱼腥蓝细菌PCC 7120对Mn^(2+)的吸附 被引量：3

4

作者 李敏 徐韶足 +1 位作者 陈雯莉 王莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-6,共6页

为寻找新型生物吸附剂用于重金属污染环境的修复,本研究通过设置不同时间、质量浓度以及氮源缺乏等条件,检测了鱼腥蓝细菌PCC 7120对Mn^(2+)的吸附情况。结果表明:在Mn^(2+)质量浓度低于10mg/L时,PCC 7120对Mn^(2+)的去除率最高能达到8... 为寻找新型生物吸附剂用于重金属污染环境的修复,本研究通过设置不同时间、质量浓度以及氮源缺乏等条件,检测了鱼腥蓝细菌PCC 7120对Mn^(2+)的吸附情况。结果表明:在Mn^(2+)质量浓度低于10mg/L时,PCC 7120对Mn^(2+)的去除率最高能达到80%,并且PCC 7120对Mn^(2+)的吸附过程符合Freundlich等温吸附模型和准二级吸附动力学方程。缺氮后,PCC 7120对Mn^(2+)的耐受力降低且吸附能力大大减弱。 展开更多

关键词 鱼腥蓝细菌 MN^2+ 重金属污染 生物吸附

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鱼腥蓝细菌PCC 7120 all 3555基因超表达和缺失突变体的构建及表型 被引量：1

5

作者 李之萌 王莉 陈雯莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期21-26,共6页

在鱼腥蓝细菌PCC 7120中,all3555是一个乙酰羟酸合成酶的编码基因,为研究该基因在鱼腥蓝细菌PCC 7120的生长和环境适应过程中的作用,构建了该基因的超表达和缺失突变菌株,结果显示该基因缺失后鱼腥蓝细菌PCC 7120仍可继续生长,但对NaCl... 在鱼腥蓝细菌PCC 7120中,all3555是一个乙酰羟酸合成酶的编码基因,为研究该基因在鱼腥蓝细菌PCC 7120的生长和环境适应过程中的作用,构建了该基因的超表达和缺失突变菌株,结果显示该基因缺失后鱼腥蓝细菌PCC 7120仍可继续生长,但对NaCl胁迫的敏感性有一定程度提高,而超表达该基因则会提高鱼腥蓝细菌PCC 7120对氧化胁迫和NaCl胁迫的抗性,表明all3555对鱼腥蓝细菌PCC 7120的正常生长影响较小,但对菌株的抗氧化胁迫和抗NaCl胁迫等有重要作用。 展开更多

关键词 鱼腥蓝细菌 乙酰羟酸合成酶 all3555 氧化胁迫 NACL胁迫 基因超表达 缺失突变体

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鱼腥蓝细菌PCC 7120异形胞的分离 被引量：1

6

作者 樊贵安 张巨源 +1 位作者 陈雯莉 王莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期25-29,共5页

鱼腥蓝细菌PCC 7120是一种光合自养型丝状蓝细菌。缺氮条件下,菌丝上5%-10%的营养细胞分化为异形胞,发挥固氮作用。异形胞是研究生物固氮和细胞分化的理想材料。为研究异形胞生理功能及其发育过程中的基因表达变化,需要从菌丝中分离高... 鱼腥蓝细菌PCC 7120是一种光合自养型丝状蓝细菌。缺氮条件下,菌丝上5%-10%的营养细胞分化为异形胞,发挥固氮作用。异形胞是研究生物固氮和细胞分化的理想材料。为研究异形胞生理功能及其发育过程中的基因表达变化,需要从菌丝中分离高质量的异形胞。用2mg/mL溶菌酶与0.1%Triton X-100同时处理菌丝30min,得到了完整性好、纯度高的异形胞。 展开更多

关键词 鱼腥蓝细菌PCC 7120 异形胞 分离

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鱼腥蓝细菌PCC 7120中可控降解系统的构建

7

作者 王静 张巨源 +1 位作者 王莉 陈雯莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期17-23,共7页

鱼腥蓝细菌PCC 7120中已有较为成熟的诱导表达系统,但缺乏可控的蛋白降解系统。本研究基于Mesoplasma florum中的Lon蛋白酶(mf-Lon),在蓝细菌中建立可诱导的蛋白降解系统,并通过该系统对关键基因编码产物进行可控降解以研究其生理功能... 鱼腥蓝细菌PCC 7120中已有较为成熟的诱导表达系统,但缺乏可控的蛋白降解系统。本研究基于Mesoplasma florum中的Lon蛋白酶(mf-Lon),在蓝细菌中建立可诱导的蛋白降解系统,并通过该系统对关键基因编码产物进行可控降解以研究其生理功能。结果发现降解系统并无预期作用,需进一步改进。 展开更多

关键词 鱼腥蓝细菌PCC 7120 可控蛋白降解系统 mf-Lon蛋白酶 RNASE

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鱼腥蓝细菌实时观察微型培养系统的建立和应用

8

作者 唐国芳 王婧蓝 +2 位作者 胡胜 陈雯莉 王莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期37-43,共7页

为克服传统方法不能实现对特定菌丝或细胞的连续定点观察的难题,利用低熔点琼脂糖培养基将菌丝包埋在玻底培养皿中,制备了鱼腥蓝细菌PCC 7120菌株实时观察的微型培养体系。结果表明:在该培养体系中,菌丝能进行正常的生长、分裂和分化;... 为克服传统方法不能实现对特定菌丝或细胞的连续定点观察的难题,利用低熔点琼脂糖培养基将菌丝包埋在玻底培养皿中,制备了鱼腥蓝细菌PCC 7120菌株实时观察的微型培养体系。结果表明:在该培养体系中,菌丝能进行正常的生长、分裂和分化;利用该系统可以观察细胞分裂蛋白FtsZ和DNA双链损伤修复蛋白RecN在细胞分裂过程中的动态变化,实现对同一菌丝进行长时间的连续定点观察。 展开更多

关键词 鱼腥蓝细菌PCC 7120 微型培养系统 连续观察

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鱼腥蓝细菌PCC 7120中两个磷酸酶N端结构域活性分析

9

作者 许兴俭 陈雯莉 王莉 《湖北农业科学》 北大核心 2012年第7期1474-1477,共4页

为了研究鱼腥蓝细菌(Anabaena sp.)PCC 7120中两个PP2C类蛋白磷酸酶PrpJ1和PrpJ2的磷酸酶活性,将编码两个蛋白N端至跨膜区的基因片段重组到质粒中,转化大肠杆菌进行原核表达,获得了可溶性的PrpJ1up和PrpJ2up蛋白。并且以pNPP为底物测定... 为了研究鱼腥蓝细菌(Anabaena sp.)PCC 7120中两个PP2C类蛋白磷酸酶PrpJ1和PrpJ2的磷酸酶活性,将编码两个蛋白N端至跨膜区的基因片段重组到质粒中,转化大肠杆菌进行原核表达,获得了可溶性的PrpJ1up和PrpJ2up蛋白。并且以pNPP为底物测定了所得蛋白的磷酸酶活性,双倒数作图法结果显示PrpJ1up蛋白的Km为0.30 mmol/L,Vmax为7.10 nmol/min;PrpJ2up蛋白的Km为0.24 mmol/L,Vmax为0.43 nmol/min。 展开更多

关键词 鱼腥蓝细菌(Anabaena sp.) PrpJ1 PrpJ2 N端结构域 磷酸酶活性

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鱼腥蓝细菌PCC 7120游离DnaA的增加降低异形胞频率

10

作者 李静 杨毅玲 张承才 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1214-1221,共8页

研究在模式生物鱼腥蓝细菌Anabaena sp.PCC 7120中,以DnaA为研究对象,探究蓝细菌细胞周期中复制起始和异形胞分化之间的关系。结果显示:在有氮环境中,DnaA蛋白缺失或过表达并不影响细胞增殖和异形胞的分化。在缺氮环境下,DnaA缺失突变株... 研究在模式生物鱼腥蓝细菌Anabaena sp.PCC 7120中,以DnaA为研究对象,探究蓝细菌细胞周期中复制起始和异形胞分化之间的关系。结果显示:在有氮环境中,DnaA蛋白缺失或过表达并不影响细胞增殖和异形胞的分化。在缺氮环境下,DnaA缺失突变株Malr2009的异形胞分化频率(8.57%)与野生型(8.64%)间无显著差别,且该菌株增殖速率与野生型相比也无显著差异,DnaA蛋白缺失没有影响蓝细菌突变株(Malr2009)的异形胞分化频率和增殖速率。但DnaA蛋白过表达菌株Oalr2009的异形胞分化频率降低了20%,其在第12天A750约为1.2,细胞增殖速率快于野生型(第12天时A750约为0.9),增殖速率提高了30%。综上结果表明在鱼腥蓝细菌PCC 7120中,虽然DnaA不是细胞生长过程所必需的,但在缺氮条件下,游离DnaA增加会抑制异形胞分化频率。 展开更多

关键词 鱼腥蓝细菌PCC 7120 DNAA DnaA box ORIC 异形胞

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钙化裂须蓝细菌schetR基因超表达菌株的构建及表型分析 被引量：1

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作者 胡璠 王莉 陈雯莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期460-464,共5页

为研究在不分化异形胞的钙化裂须蓝细菌Schizothrixcalcicola中schetR基因的功能,本研究构建由强启动子petE驱动的schetR基因的表达质粒,通过三亲本接合转移的方法将此表达质粒转入模式生物鱼腥蓝细菌AnabaenaPCC 7120的hetR突变体中进... 为研究在不分化异形胞的钙化裂须蓝细菌Schizothrixcalcicola中schetR基因的功能,本研究构建由强启动子petE驱动的schetR基因的表达质粒,通过三亲本接合转移的方法将此表达质粒转入模式生物鱼腥蓝细菌AnabaenaPCC 7120的hetR突变体中进行功能验证。结果显示:超表达schetR能够互补鱼腥蓝细菌hetR突变体的表型,这说明schetR能够促进异形胞的发育。 展开更多

关键词 钙化裂须蓝细菌 鱼腥蓝细菌 异形胞发育 hetR schetR基因

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培养基中几种重要营养元素对Anabaena sp.strain PCC 7120及Synechocystis sp.strain PCC 6803生长的影响 被引量：6

12

作者 高良春 张巨源 +1 位作者 王莉 陈雯莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期17-24,共8页

配制KNO3、KHCO3、NaHCO3、FeNa2-EDTA及Na2S2O3营养盐培养液,并按一定浓度添加至液体或固体培养基中,获得含有不同营养素、不同浓度的液体及固体培养基,检测无机氮(NO-3)、无机碳(HCO-3)、Fe及Na2S2O3对集胞蓝细菌Synechocystis sp.str... 配制KNO3、KHCO3、NaHCO3、FeNa2-EDTA及Na2S2O3营养盐培养液,并按一定浓度添加至液体或固体培养基中,获得含有不同营养素、不同浓度的液体及固体培养基,检测无机氮(NO-3)、无机碳(HCO-3)、Fe及Na2S2O3对集胞蓝细菌Synechocystis sp.strain PCC 6803和鱼腥蓝细菌Anabaenasp.strain PCC 7120细胞生长的影响。结果显示,集胞蓝细菌Synechocystis sp.strain PCC 6803在10mmol/L硝酸盐生长较好,鱼腥蓝细菌Anabaena sp.strain PCC 7120在2mmol/L硝酸盐生长较好。不同浓度KHCO3及NaHCO3都会对蓝细菌的生长产生影响,可能是因为盐离子发挥了主要作用。此外,2种蓝细菌在10mmol/L Na2S2O3中生长较好,不同浓度的铁盐对蓝细菌的生长产生较大影响,在10μmol/L铁盐中生长最佳。 展开更多

关键词 蓝细菌 培养基 营养元素 鱼腥蓝细菌 集胞蓝细菌

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