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蛋白质定向进化的高通量筛选方法 被引量:2
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作者 黄春晓 段学军 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2008年第4期653-656,共4页
定向进化是改造蛋白质分子的有效新策略。创建突变库的方法已经有很多而且比较通用,而建立有效的高通量的筛选方法是蛋白质定向进化成功的关键。本文综述了近几年发展起来的用于定向进化的高通量的文库筛选方法,介绍了各种展示技术及流... 定向进化是改造蛋白质分子的有效新策略。创建突变库的方法已经有很多而且比较通用,而建立有效的高通量的筛选方法是蛋白质定向进化成功的关键。本文综述了近几年发展起来的用于定向进化的高通量的文库筛选方法,介绍了各种展示技术及流式细胞分选技术的原理及其在文库筛选中的应用,分析了存在的问题及发展趋势。 展开更多
关键词 定向进化 高通量筛选方法 展示技术 流式细胞分选技术
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针对核质运输的高通量小分子筛选方法
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作者 罗敏 张全仓 卢智刚 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期927-934,共8页
核质运输是真核细胞的重大基本生命活动。核质运输小分子抑制剂不仅可以广泛应用并促进核质运输相关的基础研究,同时也为相关疾病、尤其是病毒性疾病的药物开发提供有利线索。然而,目前针对核质运输的商业化小分子仅有Leptomycin B一种... 核质运输是真核细胞的重大基本生命活动。核质运输小分子抑制剂不仅可以广泛应用并促进核质运输相关的基础研究,同时也为相关疾病、尤其是病毒性疾病的药物开发提供有利线索。然而,目前针对核质运输的商业化小分子仅有Leptomycin B一种。建立一个针对整个核质运输通路的小分子筛选平台,将有利于筛选与获得多种干扰核质运输的小分子。文章利用NZGFP和CZGFP可以重组为具有荧光GFP的特性,构建NZGFP-NES和CZGFP-NLS,将NZGFP和CZGFP分别定位在细胞质与细胞核中;当核内运或核外运通路被干扰,NZGFP和CZGFP定位发生改变并聚集重组为具有荧光的GFP。该方法可以有效检测核外运小分子抑制剂LeptomycinB的作用,为针对整个核质运输通路的高通量小分子筛选提供了一个有效平台。 展开更多
关键词 核质运输 高通量筛选方法 NZGFP/CZGFP LeptomycinB
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