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灵芝麦角硫因高通量检测方法研究 被引量:1
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作者 徐晴元 游俊健 +3 位作者 林俊芳 薛玲娜 余颖豪 郭丽琼 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2022年第1期114-120,共7页
麦角硫因(ergothioneine,EGT)基于其强抗氧化及体内消耗率低的特点,在人体内拥有多种重要的生理功能。但是在高产EGT微生物筛选和新菌株的选育研究中,现有的EGT检测方法因其步骤繁琐、使用的试剂和设备昂贵而亟待改进。本研究基于EGT的... 麦角硫因(ergothioneine,EGT)基于其强抗氧化及体内消耗率低的特点,在人体内拥有多种重要的生理功能。但是在高产EGT微生物筛选和新菌株的选育研究中,现有的EGT检测方法因其步骤繁琐、使用的试剂和设备昂贵而亟待改进。本研究基于EGT的理化性质,建立了EGT-硫氰酸铁高通量快速检测体系,同时选用不同EGT产量的灵芝菌株以及灵芝融合新菌株对该检测体系的准确性进行验证。结果表明该方法可以快速准确地比较出样本间EGT产量高低,使原本需3~4天的工作缩短至2~3 h,HPLC验证结果显示,EGT-硫氰酸铁高通量快速检测体系效果良好,体系稳定。本研究结果将为高产EGT微生物的高通量筛选及高产EGT新菌株的选育提供新的方法和思路。 展开更多
关键词 麦角硫因 高通量检测方法 高效液相色谱 灵芝
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一种5重real-time PCR筛查转基因水稻方法的建立 被引量:6
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作者 董立明 杨帆 +4 位作者 邢珍娟 李葱葱 闫伟 龙丽坤 李飞武 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第24期329-334,共6页
以转基因水稻中最常用的CaMV35S启动子、NOS终止子、Cry1Ab/Ac基因、HPT基因及SPS水稻内标基因为研究对象,利用5种不同的荧光信号(FAM、HEX、Taxas Red、Cy5、Cy5.5)进行多重实时聚合酶链式反应(realtime polymerase chain reaction,rea... 以转基因水稻中最常用的CaMV35S启动子、NOS终止子、Cry1Ab/Ac基因、HPT基因及SPS水稻内标基因为研究对象,利用5种不同的荧光信号(FAM、HEX、Taxas Red、Cy5、Cy5.5)进行多重实时聚合酶链式反应(realtime polymerase chain reaction,real-time PCR)检测方法的研究。通过引物组合筛选、反应体系优化、特异性测试、灵敏度测试、适用性测试等一系列实验,建立了5重real-time PCR方法,灵敏度可达0.032%。此方法具有灵敏度高、结果准确、通量大等优点,可实现水稻中转基因成分的快速、高效检测。 展开更多
关键词 转基因水稻 筛查元件 单一实时聚合酶链式反应 5重实时聚合酶链式反应 高通量检测方法
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双酶偶联法测定发酵液中L-高丝氨酸的含量 被引量:2
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作者 赵金花 魏亮 +2 位作者 徐宁 马振平 刘君 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期239-245,共7页
L-高丝氨酸是一种重要的非蛋白质氨基酸,在食品、饲料、医药和化工等领域具有非常广泛的应用。近年来通过环境友好的微生物发酵法生产L-高丝氨酸受到广泛关注。在工业菌种迭代选育过程中存在大量的L-高丝氨酸发酵样品分析检测工作,但目... L-高丝氨酸是一种重要的非蛋白质氨基酸,在食品、饲料、医药和化工等领域具有非常广泛的应用。近年来通过环境友好的微生物发酵法生产L-高丝氨酸受到广泛关注。在工业菌种迭代选育过程中存在大量的L-高丝氨酸发酵样品分析检测工作,但目前关于L-高丝氨酸检测方法的报道仍然较少。该研究将胱硫醚γ-裂解酶和乳酸脱氢酶偶联催化,建立了一种简单快速的L-高丝氨酸检测方法。通过对检测体系中各组分进行系统优化,确定了反应体系中最佳试剂浓度为胱硫醚γ-裂解酶12 U/mL,乳酸脱氢酶50 U/mL,NADH 0.5 mmol/L,磷酸吡哆醛(pyridoxal phosphate,PLP)0.1 mmol/L,检测温度为40℃,pH为7.5。该方法检测灵敏,在L-高丝氨酸质量浓度为0.005~0.1 g/L时具有良好的线性关系,R 2达到0.9982,能够满足发酵液中L-高丝氨酸产量的测定,为L-高丝氨酸高产菌种的选育提供了重要技术支撑。 展开更多
关键词 L-高丝氨酸 发酵 胱硫醚γ-裂解酶 乳酸脱氢酶 NADH 高通量检测方法
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牛遗传资源分子遗传多样性的研究进展 被引量:11
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作者 谷继承 刘丑生 +1 位作者 刘刚 韩旭 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第9期127-131,共5页
作者对牛遗传多样性的主要研究方法(主要包括线粒体DNA、微卫星DNA多态性、单核苷酸多态性、高通量SNP检测方法及全基因组选择方法)及其在牛分子遗传多样性研究方面的应用进行了介绍。
关键词 微卫星多态性 单核苷酸多态性 高通量SNP检测方法 全基因组选择
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