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高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)免疫后病毒血症和抗体消长规律 被引量:3
1
作者 魏园园 顾贵波 +4 位作者 申冠男 赵培 李井春 王冰 杨本勇 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第4期44-45,I0002,共3页
应用高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)对28-30日龄的仔猪进行免疫,前8周每周采血,8周后每2周采血进行疫苗毒核酸检测和抗体水平检测,直至免疫后第16周。结果表明,高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)在血清中存在的... 应用高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)对28-30日龄的仔猪进行免疫,前8周每周采血,8周后每2周采血进行疫苗毒核酸检测和抗体水平检测,直至免疫后第16周。结果表明,高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)在血清中存在的最长时间大约为6周;抗体从免疫后第2周开始转阳,至第3周时全部为阳性,并且抗体水平不断上升,至免疫后第10周时平均抗体水平达到最高。 展开更多
关键词 仔猪 致病猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R) 免疫 存在时间
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒JL株Nsp10基因生物信息学分析 被引量:3
2
作者 周思旋 徐健 +1 位作者 周碧君 王开功 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第1期6-10,共5页
本研究旨在对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)贵州JL株Nsp10基因(GenBank登录号:EU886322)进行生物信息学分析,了解其生物学特征,为下一步Nsp10的表达和ELISA检测方法的建... 本研究旨在对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)贵州JL株Nsp10基因(GenBank登录号:EU886322)进行生物信息学分析,了解其生物学特征,为下一步Nsp10的表达和ELISA检测方法的建立奠定基础。应用BioEdit、DNAStar、PsortⅡ、SignalP、TMHMM、ProtFun、Clustal_1.81、Mega等软件对Nsp10蛋白的理化参数、信号肽、跨膜区域、亲水性、表面可及性、抗原性、二级结构、亚细胞定位及与其他PRRSV毒株相应片段同源性等进行分析和预测。该蛋白理论分子质量为26.38ku,pI为8.93,为稳定蛋白,不含信号肽,无跨膜结构,具有良好的形成抗原表位的条件。亚细胞定位结果表明,该蛋白极有可能位于细胞质,其编码氨基酸序列与参考毒株同源性为97.4%~100%。该蛋白保守性较高,是可溶性蛋白,有良好的抗原性,具备作为靶蛋白建立免疫方法的条件。 展开更多
关键词 致病猪繁殖与呼吸综合征病毒JL Nsp10基因 生物信息学分析
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp1蛋白锌指结构1(ZF1)突变体的构建及活性鉴定
3
作者 赵鹏伟 吴家强 +8 位作者 杜以军 李俊 孙文博 丛晓燕 时建立 彭军 于江 刘月月 王金宝 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第6期1-6,共6页
本试验旨在构建高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)SX-1株非结构蛋白Nsp1的真核表达质粒,并对Nsp1蛋白锌指结构1(ZF1)进行定点突变,检测其在真核细胞中的表达活性。利用TRIzol法提取总RNA,RT-PCR扩增Nsp1目的基因,经双酶切构建pC... 本试验旨在构建高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)SX-1株非结构蛋白Nsp1的真核表达质粒,并对Nsp1蛋白锌指结构1(ZF1)进行定点突变,检测其在真核细胞中的表达活性。利用TRIzol法提取总RNA,RT-PCR扩增Nsp1目的基因,经双酶切构建pCI-neo-Nsp1真核表达质粒后对Nsp1蛋白锌指结构1的8C、10C、25C和28C的4个位点进行定点突变,成功获得分别突变为A和S的8个突变体。转染HeLa细胞,通过间接免疫荧光方法(IFA)和Western blotting检测Nsp1蛋白的活性。IFA结果显示,Flag抗体检测时蛋白质主要分布在细胞质和细胞核中,Myc抗体检测时蛋白质主要分布在细胞核中。Western blotting结果显示,Flag抗体检测时,S突变体出现大小约为44和20ku条带,A突变体出现约为44ku条带;Myc抗体检测时,S突变体出现大小约为44和27ku条带,A突变体出现大小约为44ku条带。试验结果表明,本试验成功构建了Nsp1突变体的真核表达质粒,证实其能在真核细胞中表达,为进一步研究Nsp1蛋白的锌指结构是否对机体Ⅰ型IFN产生起下调作用提供基础。 展开更多
关键词 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒sx-1株 Nsp1 突变体构建 鉴定
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猪繁殖与呼吸综合征病毒三重纳米RT-PCR检测方法的建立 被引量:1
4
作者 茹敏 高洁 +3 位作者 赵治钤 郑丹阳 赵谜 穆杨 《动物医学进展》 北大核心 2025年第7期18-25,共8页
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在猪群中不断变异和传播,给世界养猪业造成严重的经济损失。将纳米颗粒与传统RT-PCR技术相结合,根据不同毒株Nsp2核苷酸序列,设计合成PRRSV特异性通用引物,在对退火温度、引物浓度、反应循环数等进行优化... 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在猪群中不断变异和传播,给世界养猪业造成严重的经济损失。将纳米颗粒与传统RT-PCR技术相结合,根据不同毒株Nsp2核苷酸序列,设计合成PRRSV特异性通用引物,在对退火温度、引物浓度、反应循环数等进行优化后,建立了能鉴别经典、高致病性和NADC30样PRRSV毒株的三重纳米RT-PCR(Nano RT-PCR)检测方法。特异性试验结果显示,使用该方法检测猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪圆环病毒2型、伪狂犬病病毒、猪细小病毒等病毒均无交叉反应。该方法对经典、高致病性和NADC30样PRRSV毒株的Nsp2重组质粒的检出限分别为3.32×10^(2)、6.18×10^(3)、3.26×10^(3)拷贝/μL,高于常规RT-PCR方法的灵敏度。对80份临床样本的检测结果显示,该方法可用于临床样品中PRRSV经典毒株、高致病性毒株和NADC30样毒株的鉴别检测,并可确定毒株类型,为猪繁殖与呼吸综合征病毒的快速检测提供了技术支撑。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 经典毒 致病 NADC30样毒 纳米RT-PCR
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株及其致弱过程中的不同代次病毒的分子特征分析 被引量:6
5
作者 周艳君 田志军 +6 位作者 郝晓芳 安同庆 于海 李国新 陈瑾 彭金美 童光志 《中国动物传染病学报》 CAS 2011年第1期1-10,共10页
为了追踪高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syn-drome virus,HP-PRRSV)毒力逐渐减弱的分子轨迹,我们以HP-PRRSV亲本毒HuN4株及其系列传代致弱毒株为研究对象,对HuN4株及其不同... 为了追踪高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syn-drome virus,HP-PRRSV)毒力逐渐减弱的分子轨迹,我们以HP-PRRSV亲本毒HuN4株及其系列传代致弱毒株为研究对象,对HuN4株及其不同代次毒株其全基因序列进行了序列比较分析。结果显示由高致病性的亲本毒HuN4株到无致病性的F112代的疫苗毒,共有65个核苷酸发生突变,其中导致41个氨基酸发生突变,这些突变的氨基酸分散性的存在于不同基因区域。与已经报道的高致病性JXA1株及其致弱毒株JXA80株相比较,可以看到两个强毒株毒力致弱的演变轨迹并不完全相同,二者之间不仅氨基酸突变数量不一致,而且突变氨基酸的位置也不完全相同,但其共同特点是由强毒株到弱毒株的变化过程中,突变率较高的结构蛋白相一致,突变率较高的非结构蛋白基本一致。分析结果提示我们决定高HP-PRRSV毒力强弱的因素可能不是由单个氨基酸的突变来决定的,推测是由一个基因或多个基因或多种因素共同造成的,同时也使我们认识到PRRSV的非结构蛋白区在病毒毒力变化中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 致病猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4 二疫苗毒HuN4-F112 突变
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株HLJ-09感染仔猪的组织病理学和电镜观察 被引量:3
6
作者 姜晓晨 刘业兵 +2 位作者 王晶钰 张磊 宁宜宝 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2011年第9期27-30,共4页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种猪的高度接触性传染病,不同年龄、品种和性别的猪均能感染,但以妊娠母猪和1月龄以内的仔猪最易感。该病以母猪流产、死胎、弱胎、木乃伊以及仔猪呼吸困难、
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 组织病理学 病毒分离 仔猪 电镜观察 致病 感染 接触传染病
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致弱过程中高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株部分生物学特性的研究 被引量:2
7
作者 田志军 安同庆 +5 位作者 周艳君 彭金美 陈谨 王瑜 童光志 刘娣 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期424-426,共3页
为了研制高致病性猪繁殖与呼吸综合征(HP-PRRS)弱毒疫苗,将高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)HuN4株进行了致弱驯化,在Marc-145细胞上对其进行了3次蚀斑克隆和连续传代。该毒株的病变速度随着代次增高逐渐加快,传至80代以后其... 为了研制高致病性猪繁殖与呼吸综合征(HP-PRRS)弱毒疫苗,将高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)HuN4株进行了致弱驯化,在Marc-145细胞上对其进行了3次蚀斑克隆和连续传代。该毒株的病变速度随着代次增高逐渐加快,传至80代以后其病毒滴度达到最高并保持稳定;电镜观察发现低代次病毒粒子形态以棒状为主,高代次病毒粒子形态以球形为主;蚀斑形态比较发现低代次病毒形成的蚀斑大小不一,而高代次病毒形成的蚀斑大小均一;序列分析和病毒抗原性分析表明HuN4株传代过程中GP5蛋白羧基端1个主要抗原表位(196QWGRL200)发生突变即196Q突变为196R,针对该表位的单克隆抗体只与HuN4株低代次病毒反应而不与高代次病毒反应。以上结果表明:在Marc-145细胞上经蚀斑克隆和连续传代致使HP-PRRSVHuN4株部分生物学特性发生改变,这些特性的改变在病毒弱化过程中的作用还有待进一步的研究。 展开更多
关键词 致病猪繁殖与呼吸综合征病毒 HuN4 生物学特
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4传代致弱株HuN4-F30感染性克隆的构建及拯救病毒致病性分析 被引量:1
8
作者 常亚飞 刘永刚 +5 位作者 李爱东 陶冶 王刚 张冲 李海 蔡雪辉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期532-536,共5页
为构建高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)Hu N4株传代致弱株Hu N4-F30感染性克隆,本研究利用高保真DNA聚合酶,分6个片段进行病毒全基因组序列扩增,并通过点突变在其基因组10 808位引入Mlu I作为分子标记。通过重叠延伸PCR在5&#... 为构建高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)Hu N4株传代致弱株Hu N4-F30感染性克隆,本研究利用高保真DNA聚合酶,分6个片段进行病毒全基因组序列扩增,并通过点突变在其基因组10 808位引入Mlu I作为分子标记。通过重叠延伸PCR在5'端上游引入CMV启动子,3'端引入丁型肝炎病毒(HDV)核酶基因和牛生长素多聚腺苷酸化信号(BGH)。将各片段依次连接克隆于改造的p Belo BAC11载体中,构建含有全长HP-PRRSV致弱株c DNA感染性克隆p Belo BAC11-Hu N4-F30,并将全长质粒直接转染Marc-145细胞拯救出病毒。通过核酸鉴定与测序、分子标记鉴定、间接免疫荧光试验和动物致病性试验等进行鉴定。结果表明,拯救的病毒能够通过Mlu I酶切与亲本鉴别,拯救病毒的间接免疫荧光与亲本病毒一致,拯救病毒表现出低致病性。HP-PRRSV Hu N4-F30感染性克隆的构建与病毒的拯救,为进一步研究HP-PRRSV传代致弱机制奠定了基础。 展开更多
关键词 致病猪繁殖与呼吸综合征病毒 HuN4-F30 感染克隆 致病
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)免疫后在血清中存在时间的报告 被引量:5
9
作者 杨本勇 曹东 +7 位作者 姜凤华 申贯男 李井春 李清竹 刘坤洋 魏澍 杨作丰 顾贵波 《现代畜牧兽医》 2014年第9期1-4,共4页
本研究应用高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)对28~30日龄的仔猪进行免疫,前8周每周采血,8周后每2周采血进行疫苗毒核酸检测,直至免疫后第16周。结果表明,高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)在血清中存在的最长时间... 本研究应用高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)对28~30日龄的仔猪进行免疫,前8周每周采血,8周后每2周采血进行疫苗毒核酸检测,直至免疫后第16周。结果表明,高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)在血清中存在的最长时间约为6周,但有的猪呈现间歇性携带疫苗毒。 展开更多
关键词 仔猪 致病猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R) 免疫 存在时间
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高致病性变异株引起的猪繁殖与呼吸综合征在我国的发生与流行 被引量:38
10
作者 郑杰 宁宜宝 +2 位作者 赵启祖 刘业兵 邱立新 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第6期48-48,49-50,I0001,共4页
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 致病 变异 接触传染病 北卡罗来纳州 妊娠母猪 母猪流产 呼吸困难
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猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株的致病性试验 被引量:4
11
作者 王旭荣 张彩勤 +5 位作者 张春红 赵炳武 祝卫国 杨增岐 王建华 宋长绪 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2009年第2期27-32,共6页
【目的】研究从江西、湖南发生持续高热的病猪体内分离的4株NSP2基因缺失的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)Jiangxi-3、Jiangxi-4、Hunan-1、Hunan-2的致病力。【方法】通过Reed... 【目的】研究从江西、湖南发生持续高热的病猪体内分离的4株NSP2基因缺失的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)Jiangxi-3、Jiangxi-4、Hunan-1、Hunan-2的致病力。【方法】通过Reed—Muench法,测定4株PRRSV(第3代)的TCID50,将毒株分别接种PRRSV和猪圆环病毒2型(PCV2)抗原与抗体均为阴性的健康猪,各设同居试验猪,通过检测体温、临床症状观察、RT—PCR、ELISA、病理切片等方法检测病毒的致病性。【结果】4株病毒的TCID50为10^-3.75~10^-4.5/mL。攻毒试验猪和同居试验猪均表现典型猪繁殖与呼吸综合征临床症状,最后试验猪均死亡。病理切片也显示典型的猪繁殖与呼吸综合征病理变化,并在脑组织内检测到PRRSV核酸。【结论】4株PRRSV分离株的致病力增强。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 变异 热病 致病
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(GDr180株)对断奶仔猪的免疫效力研究 被引量:6
12
作者 刘欢欢 李嘉爱 《广东畜牧兽医科技》 2018年第5期43-45,共3页
30日龄猪繁殖与呼吸综合征抗原和抗体阴性的仔猪,免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(GDr180株)(WINSUN BIO),28天后连同非免疫对照组接种HP-PRRSV强毒,连续观察21天,监控仔猪临床症状和一周采集一次血液样本进行检测。结果显示,攻... 30日龄猪繁殖与呼吸综合征抗原和抗体阴性的仔猪,免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(GDr180株)(WINSUN BIO),28天后连同非免疫对照组接种HP-PRRSV强毒,连续观察21天,监控仔猪临床症状和一周采集一次血液样本进行检测。结果显示,攻毒后免疫组精神、食欲、体温正常,PRRSV的基因载量减少和病毒血症持续时间缩短,非免疫对照组精神沉郁、减食和废食,体温升高,并有咳嗽甚至死亡等临床症状,病毒血症持续至攻毒后21天。结果表明,PRRS GDr180株活疫苗接种可减少PRRSV传播和使仔猪产生对HP-PRRS的保护。 展开更多
关键词 致病猪繁殖与呼吸综合征 GDr180 抗原 病毒血症
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株致弱毒株特异性抗原表位的鉴定
13
《今日畜牧兽医》 2010年第2期68-68,共1页
通过对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株亲本毒及其不同代次传代毒株Nsp2蛋白氨基酸序列比较分析,发现不同代次的Nsp2蛋白存在4处氨基酸点突变,针对每个突变点分别人工合成编码短肽的核苷酸序列,经原核表达后进行Westernblot分析。
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 致弱毒 致病 抗原表位 蛋白氨基酸 鉴定 BLOT分析
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广西部分地市高致病性猪繁殖与呼吸综合征的流行病学研究 被引量:8
14
作者 冯淑萍 何丹 +3 位作者 易春华 熊毅 付薇 刘棋 《现代农业科技》 2009年第1期229-230,238,共3页
参照GenBank中已发表的PRRSV的序列设计了1对特异性引物,从广西部分地市发病猪场送检的65份病料中,检出14株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。对14个出现阳性的扩增产物进行克隆、序列测定,基因序列全长均为427bp,与国内部分流... 参照GenBank中已发表的PRRSV的序列设计了1对特异性引物,从广西部分地市发病猪场送检的65份病料中,检出14株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。对14个出现阳性的扩增产物进行克隆、序列测定,基因序列全长均为427bp,与国内部分流行毒株核衣壳蛋白基因的同源性均为96.2%以上,14份阳性样品之间同源性为97.2%以上,证实扩增的产物为高致病性猪繁殖与呼吸综合征。遗传进化分析表明,广西流行毒株均属于一个亚群,与江西、广州流行毒株高度同源。 展开更多
关键词 致病猪繁殖与呼吸综合征病毒 流行毒 分离鉴定 遗传进化分析 广西壮族自治区
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猪繁殖与呼吸综合征病毒GX1001株和GX1002株全基因组分子特征分析
15
作者 林昌华 施开创 +3 位作者 陶春爱 钟诚 莫胜兰 李刚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第4期1-9,共9页
为了解广西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的变异情况及分子遗传特征,采用RT-PCR分段扩增2010年PRRSV广西地方分离株GX1001株和GX1002株基因片段,经克隆、测序、拼接,获得2个分离株的全基因序列。结果显示,不包括Poly(A)尾,GX1001株... 为了解广西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的变异情况及分子遗传特征,采用RT-PCR分段扩增2010年PRRSV广西地方分离株GX1001株和GX1002株基因片段,经克隆、测序、拼接,获得2个分离株的全基因序列。结果显示,不包括Poly(A)尾,GX1001株、GX1002株基因组全长分别为15329和15318bp。同源性分析结果表明,2个分离株间全基因组核苷酸序列同源性为99.3%,与国内外北美洲型代表毒株间的全基因组核苷酸序列同源性为84.9%~99.5%,与欧洲型代表毒株间的同源性为61.5%~61.9%。序列分析结果表明,2个分离株的NSP2编码区均存在第481和533-561位,共30个氨基酸的不连续缺失,具有PRRSV高致病性变异毒株(HP-PRRSV)的遗传特征,但分别在不同区域出现新的突变、缺失及插入等变异现象。遗传进化分析结果表明,所有美洲型毒株可分为4个亚群,GX1001株和GX1002株均属于以高致病性JXA1株为代表的第4亚群。上述结果表明,本研究获得的PRRSV广西地方分离株GX1001株和GX1002株均属于HP-PRRSV,但其基因组在不同区域发生了新的遗传变异现象。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 致病分离 全基因组特征 变异分析
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5 B抗原区并非中和抗原区
16
作者 Leng C L 刘丹 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第11期139-139,共1页
2006年,高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)在中国造成了巨大的经济损失,并一直威胁养猪业。PRRSV经典株GP5的B抗原区(AR)(37)SHL/FQLIYNL(45)被认为是一个主要的线性中和抗原区。然而最近研究结果发现,抗AR的多肽纯化抗体并不... 2006年,高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)在中国造成了巨大的经济损失,并一直威胁养猪业。PRRSV经典株GP5的B抗原区(AR)(37)SHL/FQLIYNL(45)被认为是一个主要的线性中和抗原区。然而最近研究结果发现,抗AR的多肽纯化抗体并不能中和PRRSV。与经典PRRSV相比,HP-PRRSV的B AR发生了一个氨基酸突变(L/F(39)→I(39))。为了研究HP-PRRSV的B AR在体外和体内诱导中和抗体(NA)的能力,本试验制备了抗有突变、无突变B AR的兔抗血清和具有高滴度NAs的猪高免血清。免疫荧光检测(IFA)结果显示,两种兔抗血清均能与经典PRRSV CH-1a株和HP-PRRSV HuN4株发生反应,且在IFA滴度上没有差异。而抗血清对经典PRRSV CH-1a株和HP-PRRSV HuN4没有中和活性。间接ELISA和病毒中和试验结果表明,抗B AR多肽抗体水平和猪高免血清中NAs水平之间没有相关性。B AR肽特异性血清抗体没有中和活性,GST-B融合蛋白不能抑制猪高免血清NAs的中和能力。基于这些发现,HP-PRRSVGP5的B AR不是中和AR。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 中和抗体 致病 抗原区 GP5 PRRSV CH-1A 病毒中和试验
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6种商品化PRRSV美洲经典毒株和高致病性毒株双重实时荧光定量PCR检测试剂盒性能比对
17
作者 高晓龙 栗云鹏 +5 位作者 李志军 张启龙 傅彩霞 高敏 雷琪莉 王林 《中国动物检疫》 2025年第2期80-86,共7页
为评价不同品牌猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲经典毒株和高致病性毒株双重实时荧光定量PCR检测试剂盒的性能,选择6种市售商品化试剂盒,对其敏感性、特异性、重复性以及临床样品检测符合率等指标进行比对分析。结果显示:对于PRRSV... 为评价不同品牌猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲经典毒株和高致病性毒株双重实时荧光定量PCR检测试剂盒的性能,选择6种市售商品化试剂盒,对其敏感性、特异性、重复性以及临床样品检测符合率等指标进行比对分析。结果显示:对于PRRSV美洲经典毒株VR2332和高致病性毒株JXA1,A品牌试剂盒最低检测限均可达到1 copy/μL,D品牌试剂盒最低检测限分别为100和1000 copies/μL,其他品牌试剂盒最低检测限为1~10 copies/μL;6种试剂盒对猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪细小病毒(PPV)的检测均为阴性,特异性良好;对不同浓度模板进行检测,除1个变异系数为6.5%以外,其余均小于5.0%,重复性较好。临床样品检测结果显示,F品牌试剂盒阴性样品检测符合率为95%,其余试剂盒为100%;D品牌试剂盒阳性样品检测符合率为50%,其余试剂盒为100%。综上所述,6种试剂盒的特异性、重复性均较好,但其敏感性及临床检测性能存在一定差异。建议在使用荧光定量PCR试剂盒检测PRRSV前,对其性能进行科学评估,选用性能良好的试剂盒以满足检测需求。本研究为检测机构和养殖场选择PRRSV检测试剂盒提供了依据。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 美洲经典毒 致病 PCR检测试剂盒 能对比
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猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30毒株流行现状
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作者 本刊编辑部 王亚辉 《中国猪业》 2017年第11期19-19,共1页
类NADC30毒株是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的一个新亚型毒株,近年来在我国不少地区被分离发现。不同于经典毒株和高致病性变异株,类NADC30毒株的出现增加了PRRSV流行毒株的复杂性,给猪场生物安全防控带来了新的挑战。
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 流行毒 流行现状 病毒 PRRSV 致病 生物安全 变异
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猪繁殖与呼吸综合征病毒双重荧光RT-PCR检测方法的建立 被引量:1
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作者 张靖飞 张园 +3 位作者 李志辉 王慧煜 曹达江 梅琳 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第4期74-77,共4页
为了建立一种快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒并且能够区分普通毒株和高致病性毒株的荧光PCR方法,根据GenBank已经公布的国内发表的高致病性PRRSV NSP2基因序列,针对Nsp2缺失区设计一对引物和探针,在结合PRRSV通用检测引物探针进行荧光... 为了建立一种快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒并且能够区分普通毒株和高致病性毒株的荧光PCR方法,根据GenBank已经公布的国内发表的高致病性PRRSV NSP2基因序列,针对Nsp2缺失区设计一对引物和探针,在结合PRRSV通用检测引物探针进行荧光定量PCR,对反应条件进行优化,用已知PRRSV普通株和高致病性株及其他病毒进行试验。结果表明,该方法可以特异检测并区分高致病性株和普通株。将该方法用于临床标本的检测,通过对32份样本检测,通用阳性为28份,阳性率为87.5%。高致病性株为17份,阳性率为59.38%。表明建立的方法可以用于PRRSV的快速检测,并且可以区分普通株和高致病性株。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 致病 双重荧光RT—PCR
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高致病性PRRSV HuN4株不同代次病毒对仔猪胸腺损伤的研究 被引量:2
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作者 陶冶 王刚 +7 位作者 刘永刚 李莉 李爱东 于颖 涂亚斌 王淑杰 姜成刚 蔡雪辉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期343-345,382,共4页
为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)不同致弱代次病毒对断奶仔猪胸腺的损伤,本研究选用HP-PRRSV HuN4株在Marc-145细胞中传代致弱的F5、F15、F23、F30代及弱毒疫苗HuN4 F112代分别接种30日龄的PRRSV抗原及抗体阴性健康断... 为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)不同致弱代次病毒对断奶仔猪胸腺的损伤,本研究选用HP-PRRSV HuN4株在Marc-145细胞中传代致弱的F5、F15、F23、F30代及弱毒疫苗HuN4 F112代分别接种30日龄的PRRSV抗原及抗体阴性健康断奶仔猪。实验结果显示:HuN4 F30感染组胸腺的眼观病变、胸腺重量、病理组织学变化、病毒载量及胸腺细胞凋亡比例均与F23感染组有显著差别(p<0.05)。本实验结果表明,HuN4 F23代仍然能够引起仔猪胸腺萎缩并导致机体免疫抑制,而F30代已不能引起断奶仔猪胸腺萎缩现象。因此,HP-PRRSV HuN4 F23、F30代可以作为研究HP-PRRSV HuN4致胸腺萎缩的分子机制的关键代次。本研究为进一步研究HP-PRRSV感染诱导仔猪胸腺萎缩和胸腺细胞凋亡的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 致病猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4 致弱病毒 胸腺萎缩 细胞凋亡
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