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题名高灵敏度焦磷酸测序平台的建立及应用研究
被引量：2
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作者
宋沁馨
刘云龙
周国华
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机构
中国药科大学药物分析教研室
中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室
南京军区南京总医院药理科
华东医学生物技术研究所
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出处
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期481-489,共9页
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基金
国家自然科学基金资助项目(No.20975113
No.21005088)
+1 种基金
中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(No.JKQ2009027)
农业部转基因生物新品种培育科技重大专项资助项目(No.2011ZX08012-005-1)~~
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文摘
焦测序技术是一种基于生物发光法测定焦磷酸盐的测序技术,在进行DNA序列分析时不需要电泳和荧光标记,定量性能好,结果准确,可实现自动化。但其应用过程中存在3个技术瓶颈:一是测序试剂灵敏度低、成本高;二是测定仪器价格昂贵;三是测序模板制备过程繁琐。本课题组针对这些技术瓶颈,提出了一整套解决方案,包括高灵敏度焦测序反应试剂的研制、小型便携式焦测序仪的研制、测序模板的制备方法研究等。建立的高灵敏度微型化焦测序平台在分子诊断的各个领域得到了充分的应用,如细菌病毒转基因成分等的序列测定、单核苷酸多态性测定、拷贝数变异测定、基因突变位点测定、microRNA测定、基因表达量测定和药物基因组学研究,具有测序灵敏度高、仪器体积小、成本低、操作简便快速等优点,应用前景广阔。本文详细介绍了本课题组在提高焦磷酸测序反应灵敏度、简化测序过程、改进测序仪器和拓展焦磷酸测序应用范畴所做的系列创新性工作。
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关键词
焦磷酸测序
分子诊断
测序模板的制备
高灵敏度焦测序反应试剂
药物基因组学
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Keywords
pyrosequencing
molecular diagnosis
preparation of pyrosequencing templates
highly sensitive pyrosequencing reagents
pharmacogenomics
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分类号
Q503
[生物学—生物化学]
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题名微滴式数字PCR技术进展
被引量：17
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作者
王琦
范颖
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机构
首都医科大学附属北京地坛医院肝病中心
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出处
《中国医学前沿杂志（电子版）》
2016年第11期15-19,共5页
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基金
国家自然科学基金青年基金项目(81500439)
首都医科大学基础-临床科研合作基金(15JL80)
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文摘
1985年,美国科学家Kary Mullis发明了聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）。PCR是现代生命科学研究中最常规的实验方法之一,其发展经历了3个主要阶段：1操作烦琐、只适用于定性研究的琼脂糖电泳PCR;2实时荧光定量PCR,也是目前应用最广泛的PCR技术;3数字PCR（digital PCR,d PCR）,属于第3代PCR,
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关键词
实时荧光定量
微滴
PCR技术
聚合酶链反应
琼脂糖电泳
核酸提取试剂盒
DNA
定性研究
拷贝数
测序技术
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分类号
R440
[医药卫生—诊断学]
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