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高敏荧光免疫层析法的原理及在布鲁氏杆菌病检测中的应用与展望
被引量:
1
1
作者
马晓菁
钟远军
+7 位作者
薛晓波
叶锋
张家瑞
刘丽娅
章健
谷文喜
李岩
易新萍
《新疆畜牧业》
2025年第2期12-15,共4页
高敏荧光免疫层析法是在时间分辨荧光免疫分析技术基础上建立的,以镧系元素作为抗原(或抗体)示踪标记物的一种超微量快速检测技术,解决了时间分辨荧光免疫分析技术因延迟检测导致荧光弱的缺点,增大了荧光信号强度,从而大大提高了检测灵...
高敏荧光免疫层析法是在时间分辨荧光免疫分析技术基础上建立的,以镧系元素作为抗原(或抗体)示踪标记物的一种超微量快速检测技术,解决了时间分辨荧光免疫分析技术因延迟检测导致荧光弱的缺点,增大了荧光信号强度,从而大大提高了检测灵敏度。布鲁氏杆菌抗体高敏荧光免疫层析法采用免疫竞争原理,以镧系元素铕(Eu)作为荧光标记物,测定免疫反应产物的荧光强度,检测动物血清中的布鲁氏杆菌抗体。该技术具有灵敏度高、特异性强、稳定性好、操作简单和无放射性等优点,适合在条件有限的实验室及现场开展动物布鲁氏杆菌病快速检测。本文作者介绍了高敏荧光免疫层析法的原理、在动物疫病检测中的应用现状以及在布鲁氏杆菌病快速诊断中的应用前景,旨在为布鲁氏杆菌病现场快速诊断提供快捷实用的方法。
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关键词
高敏荧光
免疫层析
布鲁氏杆菌病
检测
应用
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职称材料
高敏荧光层析法在骆驼布鲁氏菌病流行病学调查中的应用
被引量:
4
2
作者
马晓菁
努尔巴哈提·努尔旦
+6 位作者
刘丽娅
李威
剡文亮
叶锋
谷文喜
章健
易新萍
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期466-470,共5页
目的了解新疆部分地区骆驼布鲁氏菌病(简称布病)流行情况,探索高敏荧光层析法在骆驼布病流行病学调查中的应用。方法分别在新疆阿勒泰地区、塔城地区、和田地区、伊犁地区、博尔塔拉蒙古自治州采集骆驼血清2000份,骆驼乳307份。应用布...
目的了解新疆部分地区骆驼布鲁氏菌病(简称布病)流行情况,探索高敏荧光层析法在骆驼布病流行病学调查中的应用。方法分别在新疆阿勒泰地区、塔城地区、和田地区、伊犁地区、博尔塔拉蒙古自治州采集骆驼血清2000份,骆驼乳307份。应用布病虎红平板凝集试验(RBT)和试管凝集试验(SAT)进行骆驼布病血清学调查。提取骆驼乳基因组DNA,应用实时荧光PCR(Realtime-PCR)和AMOS-PCR方法进行病原学检测并分型。同时应用高敏荧光层析法对200份骆驼血清和100份骆驼乳样进行布病符合率检测。结果新疆5个地区骆驼血清SAT确诊阳性31份,布病血清学阳性率为1.55%(31/2000)。307份骆驼乳经Realtime-PCR检测,5份骆驼乳出现扩增曲线且Ct值在29.65~33.68,骆驼乳布鲁氏菌核酸阳性率为1.63%(5/307)。其中2份骆驼乳提取基因组DNA经AMOS-PCR扩增获得498 bp目的条带,测序并在NCBI进行BLAST比对分析,结果与牛种生物I型布鲁氏菌序列同源性在99.8%~100%。高敏荧光层析法检出骆驼布病阳性血清33份,阴性血清167份,该方法敏感性为96.77%,特异性为98.22%,与SAT检测方法总体符合率为98%,两种方法的Kappa值为0.925。高敏荧光层析法对100份骆驼乳检出布病抗体阳性乳7份,阴性乳93份,该方法与病原学检测方法(Realtime-PCR)总体符合率为98%。结论布鲁氏菌高敏荧光层析法具有灵敏度和特异度高的优点,且与布病常规检测方法符合率较好,可用于骆驼布病现场快速检测。骆驼布病流行病学调查数据提示应加强骆驼布病防控,同时加强骆驼乳的食品安全监管。
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关键词
布鲁氏菌
骆驼
高敏荧光
流行病学
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职称材料
高敏荧光免疫层析分析法检测牛分枝杆菌抗体
被引量:
5
3
作者
张家瑞
屈勇刚
+6 位作者
樊晓旭
张力
剡文亮
孙淑芳
李敏
岳建国
李岩
《中国动物检疫》
CAS
2022年第11期121-125,共5页
为探究高敏荧光免疫层析分析法检测牛分枝杆菌(M. bovis)抗体的可行性,对该方法的特异性、灵敏性、稳定性及临床适用性进行了分析。特异性试验结果显示,该方法能够检出M. bovis抗体阳性血清参考品,而对布鲁氏菌阳性血清、O型口蹄疫阳性...
为探究高敏荧光免疫层析分析法检测牛分枝杆菌(M. bovis)抗体的可行性,对该方法的特异性、灵敏性、稳定性及临床适用性进行了分析。特异性试验结果显示,该方法能够检出M. bovis抗体阳性血清参考品,而对布鲁氏菌阳性血清、O型口蹄疫阳性血清、A型口蹄疫阳性血清、样品稀释液、结核菌素皮内变态反应(TST)阴性牛血清样品等均为阴性;灵敏性试验结果显示,该方法最低可检测到3 200倍稀释的牛结核(bTB)强阳性血清参考品;稳定性试验结果显示,该方法检测bTB强阳性血清和阳性血清的变异系数分别为5.48%和5.83%;临床样本检测结果显示,该方法与IDEXX M bovis ELISA抗体检测试剂盒的符合率为86.36%,具有较高的一致性,且差异不显著。以上结果表明,高敏荧光免疫层析分析法特异性强、灵敏度高、结果可靠,可作为TST检疫的补充抗体检测方法,用于bTB的诊断、检疫和净化。
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关键词
牛结核病
牛分枝杆菌
高敏荧光
免疫层析分析法
抗体检测
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职称材料
快速检测方法在牛结核病监测净化中的应用及效果分析
4
作者
张学虎
朱潇鹏
+1 位作者
齐明
赵永虎
《中国牛业科学》
2025年第4期33-38,共6页
为验证快速检测方法在牛结核病净化过程中的使用效果,对选定的368头成年牛在使用结核菌素皮内变态反应试验(TST)和γ-干扰素体外检测法(IFN-γ)进行结核病检测的同时,另使用胶体金免疫层析试验(GICA)和高敏荧光免疫层析法(HFIA)进行同...
为验证快速检测方法在牛结核病净化过程中的使用效果,对选定的368头成年牛在使用结核菌素皮内变态反应试验(TST)和γ-干扰素体外检测法(IFN-γ)进行结核病检测的同时,另使用胶体金免疫层析试验(GICA)和高敏荧光免疫层析法(HFIA)进行同步检测,比较这2种快速检测方法(GICA和HFIA)的阳性检出率及其与国标方法间的符合程度。结果显示,TST、IFN-γ、GICA和HFIA的阳性检出率分别为3.81%、5.16%、2.99%和4.62%,其中IFN-γ的阳性检出率显著(P≤0.05)高于其他3种方法;HFIA的阳性检出率是TST的1.21倍、是GICA的1.54倍;若以TST检测结果为标准,GICA和HFIA的阳性检测结果符合率分别为57.14%和71.43%,符合程度均达到高度符合(K值为0.62~0.63);若以IFN-γ检测结果为标准,GICA和HFIA的阳性检测结果符合率分别为52.63%和78.95%,符合程度分别达到高度符合(K值为0.65)和极为符合(K值为0.82)。不同方法组合检测结果显示,只有HFIA+IFN-γ的检测结果高于标准值,但差异不显著(P>0.05)。可见,HFIA作为一种新兴的牛结核病快速检测方法,其检测效能与国标方法接近,且优于常规快速检测方法GICA,可用于田间对牛结核病开展大范围筛查。
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关键词
牛结核病
检测方法
胶体金免疫层析
高敏荧光
免疫层析
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职称材料
禽流感病毒三种病原学检测方法的比较研究
被引量:
1
5
作者
陈弟诗
陈斌
+3 位作者
章健
邱明双
邓飞
王泽洲
《四川畜牧兽医》
2019年第4期27-30,共4页
为了分析比较不同的商品化检测方法在禽流感病毒快速诊断中的实用性,本试验运用禽流感高敏快速荧光免疫法、胶体金免疫层析纸条法和实时荧光RT-PCR三种方法同时对禽流感病毒H5、H7和H9三个亚型抗原各12个稀释度的样本进行检测。结果表明...
为了分析比较不同的商品化检测方法在禽流感病毒快速诊断中的实用性,本试验运用禽流感高敏快速荧光免疫法、胶体金免疫层析纸条法和实时荧光RT-PCR三种方法同时对禽流感病毒H5、H7和H9三个亚型抗原各12个稀释度的样本进行检测。结果表明,禽流感高敏快速荧光免疫法对三种亚型抗原的灵敏度较高,各亚型检出最低稀释度分别为H5:1∶2 560,H7:1∶1 280,H9:1∶640,该方法快捷简便,且设备便携,通过云平台处理数据,适用于现场即时检测(POCT)等;进口胶体金免疫层析纸条法对H5、H9亚型抗原的灵敏度高,对H7亚型抗原的灵敏度较低,且国内产品存在假阳性、准确性较低等缺点,但均操作简单,适用于基层初筛;实时荧光RT-PCR法对三种亚型抗原的灵敏度高,稀释度均可达1∶40 960以上,但耗时长,设备和技术要求相对较高,更适用于实验室确诊。
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关键词
禽流感病毒
高敏
快速
荧光
免疫法
胶体金免疫层析纸条法
实时
荧光
RT-PCR法
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职称材料
题名
高敏荧光免疫层析法的原理及在布鲁氏杆菌病检测中的应用与展望
被引量:
1
1
作者
马晓菁
钟远军
薛晓波
叶锋
张家瑞
刘丽娅
章健
谷文喜
李岩
易新萍
机构
新疆畜牧科学院兽医研究所(新疆动物疫病研究重点实验室)
成都微瑞生物科技有限公司
新疆畜牧科学院畜牧业经济与信息研究所
新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站
出处
《新疆畜牧业》
2025年第2期12-15,共4页
文摘
高敏荧光免疫层析法是在时间分辨荧光免疫分析技术基础上建立的,以镧系元素作为抗原(或抗体)示踪标记物的一种超微量快速检测技术,解决了时间分辨荧光免疫分析技术因延迟检测导致荧光弱的缺点,增大了荧光信号强度,从而大大提高了检测灵敏度。布鲁氏杆菌抗体高敏荧光免疫层析法采用免疫竞争原理,以镧系元素铕(Eu)作为荧光标记物,测定免疫反应产物的荧光强度,检测动物血清中的布鲁氏杆菌抗体。该技术具有灵敏度高、特异性强、稳定性好、操作简单和无放射性等优点,适合在条件有限的实验室及现场开展动物布鲁氏杆菌病快速检测。本文作者介绍了高敏荧光免疫层析法的原理、在动物疫病检测中的应用现状以及在布鲁氏杆菌病快速诊断中的应用前景,旨在为布鲁氏杆菌病现场快速诊断提供快捷实用的方法。
关键词
高敏荧光
免疫层析
布鲁氏杆菌病
检测
应用
分类号
S851.34 [农业科学—预防兽医学]
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职称材料
题名
高敏荧光层析法在骆驼布鲁氏菌病流行病学调查中的应用
被引量:
4
2
作者
马晓菁
努尔巴哈提·努尔旦
刘丽娅
李威
剡文亮
叶锋
谷文喜
章健
易新萍
机构
新疆畜牧科学院兽医研究所
新疆维吾尔自治区动物疾病预防控制中心
新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站
成都微瑞生物科技有限公司
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期466-470,共5页
基金
新疆动物疫情监测与防治项目(No.XMSY-DWFY-2022-9)。
文摘
目的了解新疆部分地区骆驼布鲁氏菌病(简称布病)流行情况,探索高敏荧光层析法在骆驼布病流行病学调查中的应用。方法分别在新疆阿勒泰地区、塔城地区、和田地区、伊犁地区、博尔塔拉蒙古自治州采集骆驼血清2000份,骆驼乳307份。应用布病虎红平板凝集试验(RBT)和试管凝集试验(SAT)进行骆驼布病血清学调查。提取骆驼乳基因组DNA,应用实时荧光PCR(Realtime-PCR)和AMOS-PCR方法进行病原学检测并分型。同时应用高敏荧光层析法对200份骆驼血清和100份骆驼乳样进行布病符合率检测。结果新疆5个地区骆驼血清SAT确诊阳性31份,布病血清学阳性率为1.55%(31/2000)。307份骆驼乳经Realtime-PCR检测,5份骆驼乳出现扩增曲线且Ct值在29.65~33.68,骆驼乳布鲁氏菌核酸阳性率为1.63%(5/307)。其中2份骆驼乳提取基因组DNA经AMOS-PCR扩增获得498 bp目的条带,测序并在NCBI进行BLAST比对分析,结果与牛种生物I型布鲁氏菌序列同源性在99.8%~100%。高敏荧光层析法检出骆驼布病阳性血清33份,阴性血清167份,该方法敏感性为96.77%,特异性为98.22%,与SAT检测方法总体符合率为98%,两种方法的Kappa值为0.925。高敏荧光层析法对100份骆驼乳检出布病抗体阳性乳7份,阴性乳93份,该方法与病原学检测方法(Realtime-PCR)总体符合率为98%。结论布鲁氏菌高敏荧光层析法具有灵敏度和特异度高的优点,且与布病常规检测方法符合率较好,可用于骆驼布病现场快速检测。骆驼布病流行病学调查数据提示应加强骆驼布病防控,同时加强骆驼乳的食品安全监管。
关键词
布鲁氏菌
骆驼
高敏荧光
流行病学
Keywords
Brucella
camel
high-sensitivity fluorescence chromatography
epidemiological
分类号
R378.5 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
高敏荧光免疫层析分析法检测牛分枝杆菌抗体
被引量:
5
3
作者
张家瑞
屈勇刚
樊晓旭
张力
剡文亮
孙淑芳
李敏
岳建国
李岩
机构
新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站
石河子大学动物科技学院
中国动物卫生与流行病学中心
成都市动物疫病预防控制中心
出处
《中国动物检疫》
CAS
2022年第11期121-125,共5页
基金
新疆生产建设兵团重点领域科技攻关计划项目(2020AB015)。
文摘
为探究高敏荧光免疫层析分析法检测牛分枝杆菌(M. bovis)抗体的可行性,对该方法的特异性、灵敏性、稳定性及临床适用性进行了分析。特异性试验结果显示,该方法能够检出M. bovis抗体阳性血清参考品,而对布鲁氏菌阳性血清、O型口蹄疫阳性血清、A型口蹄疫阳性血清、样品稀释液、结核菌素皮内变态反应(TST)阴性牛血清样品等均为阴性;灵敏性试验结果显示,该方法最低可检测到3 200倍稀释的牛结核(bTB)强阳性血清参考品;稳定性试验结果显示,该方法检测bTB强阳性血清和阳性血清的变异系数分别为5.48%和5.83%;临床样本检测结果显示,该方法与IDEXX M bovis ELISA抗体检测试剂盒的符合率为86.36%,具有较高的一致性,且差异不显著。以上结果表明,高敏荧光免疫层析分析法特异性强、灵敏度高、结果可靠,可作为TST检疫的补充抗体检测方法,用于bTB的诊断、检疫和净化。
关键词
牛结核病
牛分枝杆菌
高敏荧光
免疫层析分析法
抗体检测
Keywords
bovine tuberculosis
Mycobacterium bovis
hypersensitive fluorescence immunoassay
antibody detection
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
快速检测方法在牛结核病监测净化中的应用及效果分析
4
作者
张学虎
朱潇鹏
齐明
赵永虎
机构
张掖市动物卫生监督所
国家肉牛牦牛产业技术体系张掖综合试验站
张掖市甘州区畜牧兽医工作站
出处
《中国牛业科学》
2025年第4期33-38,共6页
基金
国家肉牛牦牛产业技术体系项目(CARS-37)
甘州区奶牛主要疫病防控技术研究与示范推广项目(ZY2024BJ47)。
文摘
为验证快速检测方法在牛结核病净化过程中的使用效果,对选定的368头成年牛在使用结核菌素皮内变态反应试验(TST)和γ-干扰素体外检测法(IFN-γ)进行结核病检测的同时,另使用胶体金免疫层析试验(GICA)和高敏荧光免疫层析法(HFIA)进行同步检测,比较这2种快速检测方法(GICA和HFIA)的阳性检出率及其与国标方法间的符合程度。结果显示,TST、IFN-γ、GICA和HFIA的阳性检出率分别为3.81%、5.16%、2.99%和4.62%,其中IFN-γ的阳性检出率显著(P≤0.05)高于其他3种方法;HFIA的阳性检出率是TST的1.21倍、是GICA的1.54倍;若以TST检测结果为标准,GICA和HFIA的阳性检测结果符合率分别为57.14%和71.43%,符合程度均达到高度符合(K值为0.62~0.63);若以IFN-γ检测结果为标准,GICA和HFIA的阳性检测结果符合率分别为52.63%和78.95%,符合程度分别达到高度符合(K值为0.65)和极为符合(K值为0.82)。不同方法组合检测结果显示,只有HFIA+IFN-γ的检测结果高于标准值,但差异不显著(P>0.05)。可见,HFIA作为一种新兴的牛结核病快速检测方法,其检测效能与国标方法接近,且优于常规快速检测方法GICA,可用于田间对牛结核病开展大范围筛查。
关键词
牛结核病
检测方法
胶体金免疫层析
高敏荧光
免疫层析
Keywords
bovine tuberculosis
detection method
GICA
HFIA
分类号
S858.234.4 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
禽流感病毒三种病原学检测方法的比较研究
被引量:
1
5
作者
陈弟诗
陈斌
章健
邱明双
邓飞
王泽洲
机构
四川省动物疫病预防控制中心
成都微瑞生物科技有限公司
出处
《四川畜牧兽医》
2019年第4期27-30,共4页
文摘
为了分析比较不同的商品化检测方法在禽流感病毒快速诊断中的实用性,本试验运用禽流感高敏快速荧光免疫法、胶体金免疫层析纸条法和实时荧光RT-PCR三种方法同时对禽流感病毒H5、H7和H9三个亚型抗原各12个稀释度的样本进行检测。结果表明,禽流感高敏快速荧光免疫法对三种亚型抗原的灵敏度较高,各亚型检出最低稀释度分别为H5:1∶2 560,H7:1∶1 280,H9:1∶640,该方法快捷简便,且设备便携,通过云平台处理数据,适用于现场即时检测(POCT)等;进口胶体金免疫层析纸条法对H5、H9亚型抗原的灵敏度高,对H7亚型抗原的灵敏度较低,且国内产品存在假阳性、准确性较低等缺点,但均操作简单,适用于基层初筛;实时荧光RT-PCR法对三种亚型抗原的灵敏度高,稀释度均可达1∶40 960以上,但耗时长,设备和技术要求相对较高,更适用于实验室确诊。
关键词
禽流感病毒
高敏
快速
荧光
免疫法
胶体金免疫层析纸条法
实时
荧光
RT-PCR法
分类号
S854.43 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高敏荧光免疫层析法的原理及在布鲁氏杆菌病检测中的应用与展望
马晓菁
钟远军
薛晓波
叶锋
张家瑞
刘丽娅
章健
谷文喜
李岩
易新萍
《新疆畜牧业》
2025
1
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职称材料
2
高敏荧光层析法在骆驼布鲁氏菌病流行病学调查中的应用
马晓菁
努尔巴哈提·努尔旦
刘丽娅
李威
剡文亮
叶锋
谷文喜
章健
易新萍
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
4
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职称材料
3
高敏荧光免疫层析分析法检测牛分枝杆菌抗体
张家瑞
屈勇刚
樊晓旭
张力
剡文亮
孙淑芳
李敏
岳建国
李岩
《中国动物检疫》
CAS
2022
5
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职称材料
4
快速检测方法在牛结核病监测净化中的应用及效果分析
张学虎
朱潇鹏
齐明
赵永虎
《中国牛业科学》
2025
0
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职称材料
5
禽流感病毒三种病原学检测方法的比较研究
陈弟诗
陈斌
章健
邱明双
邓飞
王泽洲
《四川畜牧兽医》
2019
1
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职称材料
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