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高效疏水相互作用色谱法复性与同时纯化重组人Flt3配体的包涵体蛋白质
被引量：
2
1
作者
贾佳
王骊丽
+1 位作者
高栋
耿信笃
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期535-540,共6页
Flt3配体(FL)是一类具有促进早期造血功能的细胞因子,在促进造血细胞生长发育及造血动员方面具有重要的临床应用价值。为了用基因工程方法获得大量用于临床和研究的重组人FL(rhFL)蛋白质,本文对在大肠杆菌(E.coli)中表达得到的Flt3配体...
Flt3配体(FL)是一类具有促进早期造血功能的细胞因子,在促进造血细胞生长发育及造血动员方面具有重要的临床应用价值。为了用基因工程方法获得大量用于临床和研究的重组人FL(rhFL)蛋白质,本文对在大肠杆菌(E.coli)中表达得到的Flt3配体的包涵体进行回收、洗涤,溶解于8mol/L脲后在高效疏水相互作用色谱(HPHIC)柱上进行rhFL包涵体的复性与同时纯化,并对其保留特征和复性规律进行了研究。结果表明,在连续进样、变性蛋白质质量浓度为8.51g/L、固定相选用端基为PEG800、流动相添加4mol/L脲、1.8mmol/L还原型谷胱甘肽(GSH)和0.3mmol/L氧化型谷胱甘肽(GSSH)、pH7.0的优化条件下,复性与同时纯化rhFL包涵体的质量回收率为36.9%,纯度达94.5%以上。本文仅用一步HPHIC法成功地复性与同时纯化了rhFL蛋白质,为获得高活性的rhFL产品奠定了一定的工作基础。
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关键词
高效
疏水
相互
作用
色谱法
复性
纯化
重组人Flt3配体
包涵体
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职称材料
蛋白折叠液相色谱法中流动相对重组人干扰素-γ质量回收率的影响
被引量：
2
2
作者
吴丹
王超展
耿信笃
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期197-202,共6页
蛋白折叠液相色谱法(PFLC)用于变性蛋白质复性并同时纯化时对流动相组成及其洗脱条件的要求远较通常的液相色谱法高。用端基为PEG-200的高效疏水作用色谱固定相对重组人干扰素-γ(rhIFN-γ)进行纯化并同时复性,详细研究了流动相组成、...
蛋白折叠液相色谱法(PFLC)用于变性蛋白质复性并同时纯化时对流动相组成及其洗脱条件的要求远较通常的液相色谱法高。用端基为PEG-200的高效疏水作用色谱固定相对重组人干扰素-γ(rhIFN-γ)进行纯化并同时复性,详细研究了流动相组成、梯度洗脱模式和流速对rhIFN-γ质量回收率和活性的影响。分别以3.0mol/L(NH4)2SO4+0.05mol/L KH2PO4(pH7.0)和0.05mol/L KH2PO4(pH7.0)为流动相A和B,采用35min非线性梯度洗脱时,所得rhIFN-γ的质量回收率最高。
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关键词
高效疏水作用色谱法
流动相组成
梯度洗脱模式
纯化
复性
质量回收率
重组人干扰素-γ
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职称材料
题名
高效疏水相互作用色谱法复性与同时纯化重组人Flt3配体的包涵体蛋白质
被引量：
2
1
作者
贾佳
王骊丽
高栋
耿信笃
机构
合成及天然功能性分子化学教育部重点实验室
出处
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期535-540,共6页
基金
国家自然科学基金项目(No.20705028)
陕西省重点实验室项目(05JS60)
文摘
Flt3配体(FL)是一类具有促进早期造血功能的细胞因子,在促进造血细胞生长发育及造血动员方面具有重要的临床应用价值。为了用基因工程方法获得大量用于临床和研究的重组人FL(rhFL)蛋白质,本文对在大肠杆菌(E.coli)中表达得到的Flt3配体的包涵体进行回收、洗涤,溶解于8mol/L脲后在高效疏水相互作用色谱(HPHIC)柱上进行rhFL包涵体的复性与同时纯化,并对其保留特征和复性规律进行了研究。结果表明,在连续进样、变性蛋白质质量浓度为8.51g/L、固定相选用端基为PEG800、流动相添加4mol/L脲、1.8mmol/L还原型谷胱甘肽(GSH)和0.3mmol/L氧化型谷胱甘肽(GSSH)、pH7.0的优化条件下,复性与同时纯化rhFL包涵体的质量回收率为36.9%,纯度达94.5%以上。本文仅用一步HPHIC法成功地复性与同时纯化了rhFL蛋白质,为获得高活性的rhFL产品奠定了一定的工作基础。
关键词
高效
疏水
相互
作用
色谱法
复性
纯化
重组人Flt3配体
包涵体
Keywords
high performance hydrophobic interaction chromatography（HPHIC）
renaturation
purification
recombinant human Fms-like tyrosine kinase ligand 3（rhFL）
inclusion bodies
分类号
O658 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
蛋白折叠液相色谱法中流动相对重组人干扰素-γ质量回收率的影响
被引量：
2
2
作者
吴丹
王超展
耿信笃
机构
陕西西大科林基因药业有限公司
西北大学现代分离科学研究所现代分离科学陕西省重点实验室
出处
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期197-202,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.20175016
20475042)
文摘
蛋白折叠液相色谱法(PFLC)用于变性蛋白质复性并同时纯化时对流动相组成及其洗脱条件的要求远较通常的液相色谱法高。用端基为PEG-200的高效疏水作用色谱固定相对重组人干扰素-γ(rhIFN-γ)进行纯化并同时复性,详细研究了流动相组成、梯度洗脱模式和流速对rhIFN-γ质量回收率和活性的影响。分别以3.0mol/L(NH4)2SO4+0.05mol/L KH2PO4(pH7.0)和0.05mol/L KH2PO4(pH7.0)为流动相A和B,采用35min非线性梯度洗脱时,所得rhIFN-γ的质量回收率最高。
关键词
高效疏水作用色谱法
流动相组成
梯度洗脱模式
纯化
复性
质量回收率
重组人干扰素-γ
Keywords
high performance hydrophobic interaction chromatography （HPHIC）
mobile phase composition
gradient elution mode
purification
renaturation
mass recovery
recombinant human interferon-γ （rhIFN-γ）
分类号
O658 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高效疏水相互作用色谱法复性与同时纯化重组人Flt3配体的包涵体蛋白质
贾佳
王骊丽
高栋
耿信笃
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
蛋白折叠液相色谱法中流动相对重组人干扰素-γ质量回收率的影响
吴丹
王超展
耿信笃
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
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