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高效热不对称交互式PCR技术克隆地黄基因被引量：3: 1; 作者周延清王婉珅 +4 位作者张喻李静云陈娟娟苑璐璐魏俊《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2015年第1期100-105,共6页; 利用高效热不对称交互式PCR（hiTAIL-PCR）技术从地黄基因组中扩增出3个DNA片段,经过电泳检测、回收、纯化和测序获得2个片段的碱基序列.其中一个由578个bp组成,包含一个453bp的开放阅读框（ORF）,编码151个氨基酸,与一些已知纤维素合... 展开更多; 关键词地黄高效热不对称交互式pcr技术基因克隆启动子; 在线阅读下载PDF 职称材料

利用交错式热不对称PCR法获取多脊椎蒙古羊Hoxc8启动子序列的研究被引量：2: 2; 作者陈琦赵静 +1 位作者张立岭马月辉《安徽农业科学》 CAS 2012年第3期1511-1513,1516,共4页; [目的]探索获得蒙古羊Hoxc8基因启动子序列的方法。[方法]尝试利用交错式热不对称PCR法,获得蒙古羊Hoxc8启动子序列。[结果]通过PCR获得的序列不理想,测序结果无法与已知序列相匹配。虽然利用交错式热不对称PCR法未获得蒙古羊的Hoxc8的... 展开更多; 关键词 Hoxc8 exon-1 多脊椎蒙古羊染色体步移技术交错式热不对称pcr法启动子; 在线阅读下载PDF 职称材料

应用hiTAIL-PCR技术克隆Marinomonas sp.BSi20584菌株β-半乳糖苷酶基因被引量：3: 3; 作者周莉莉陈瑞琴 +2 位作者陈秀兰曾胤新陈波《极地研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期249-256,共8页; 实验使用hiTAIL-PCR(high-efficiency thermal asymmetric interlaced PCR,高效热不对称交错PCR)方法,从海单胞菌Marinomonas sp.BSi20584中克隆β-半乳糖苷酶基因。从GenBank注册的已知β-半乳糖苷酶氨基酸序列出发,设计引物克隆编码β... 展开更多; 关键词 Β-半乳糖苷酶高效热不对称交错pcr 染色体步移; 在线阅读下载PDF 职称材料

天山雪莲rbcS基因启动子的克隆及序列分析被引量：2: 4; 作者张亚敏杨晶 +1 位作者王爱英祝建波《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期146-152,共7页; 以天山雪莲(S.involucrata Kar.et Kir.)为材料,根据已获得的天山雪莲1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因组序列设计引物,采用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)和高效TAIL-PCR(hiTAIL-PCR)扩增到rbcS基因5′上游启动子序列,长为1 668bp。... 展开更多; 关键词天山雪莲 RBCS 热不对称交错pcr 高效TAIL-pcr 启动子序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

Bacillusa myloliquefaciens中性植酸酶基因的原核表达及蛋白纯化和性质被引量：6: 5; 作者陈艳孙建义 +2 位作者赵学新付石军翁晓燕《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期60-64,72,共6页; 淀粉液化芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens 是一种嗜热细菌,其产生的中性植酸酶具有很好的应用前景.通过TD PCR技术将Bacillus amyloliquefaciens 编码的中性植酸酶基因克隆至原核表达载体pET 30a(+)上,在大肠杆菌 BL21(DE3)中得到... 展开更多; 关键词 Bacillus 原核表达植酸酶基因蛋白纯化中性植酸酶性质基因表达产物大肠杆菌 pcr技术 NI^2+ 可溶性蛋白生物学功能芽孢杆菌淀粉液化嗜热细菌基因克隆高效表达亲和层析表达量; 在线阅读下载PDF 职称材料

裂殖壶菌pks2基因启动子序列扩增及其活性分析被引量：1: 6; 作者朱清臧晓南 +1 位作者王振东马帅《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期66-73,共8页; 针对目前裂殖壶菌(Aurantiochytrium limacinum)基因工程相关研究中,对内源启动子的了解和利用仍处在初步阶段的现状,本研究从裂殖壶菌中产多不饱和脂肪酸的主要途径聚酮合酶(PKS)途径出发,利用热不对称交错PCR技术(TAIL-PCR),针对pks2... 展开更多; 关键词启动子热不对称交错pcr技术裂殖壶菌 pks2基因绿色荧光蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

sikFBA4基因启动子的克隆及低温表达模式分析: 7; 作者张尧李忠晴 +1 位作者王爱英祝建波《草业学报》 CSCD 北大核心 2018年第12期199-207,共9页; 天山雪莲生长于常年积雪覆盖高海拔处的高山区域,具有很强的极端低温生境适应能力,属于研究植物低温适应的良好模式植物。前期的研究表明,sikFBA4基因可以显著提高番茄的抗寒能力。为进一步研究sikFBA4基因的耐寒响应模式,以天山雪莲为... 展开更多; 关键词天山雪莲 sikFBA4 高效热不对称pcr 启动子 GUS; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名高效热不对称交互式PCR技术克隆地黄基因被引量：3: 1; 作者周延清王婉珅张喻李静云陈娟娟苑璐璐魏俊; 机构河南师范大学生命科学学院周口市科学技术局; 出处《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2015年第1期100-105,共6页; 基金河南省基础与前沿技术研究计划项目(092300410009) 河南省教育厅科学技术研究重点项目(14B180028) 国家大学生创新创业训练计划项目(201310476102); 文摘利用高效热不对称交互式PCR（hiTAIL-PCR）技术从地黄基因组中扩增出3个DNA片段,经过电泳检测、回收、纯化和测序获得2个片段的碱基序列.其中一个由578个bp组成,包含一个453bp的开放阅读框（ORF）,编码151个氨基酸,与一些已知纤维素合酶基因在DNA水平和氨基酸水平的同源性分别高达81%~91%和83%~99%,而且推测蛋白质具有纤维素合酶的结构域;另一个由385个bp组成,没有ORF,不编码蛋白质,但是,预测其包含启动子元件.这些结果表明使用hiTAIL-PCR技术可以克隆地黄基因,克隆的基因将为地黄基因分子作用机制和分子育种研究奠定基础.; 关键词地黄高效热不对称交互式pcr技术基因克隆启动子; Keywords Rehmannia glutinosa high-efficient thermal asymmetric interlaced pcr gene cloning promoter; 分类号 Q754 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用交错式热不对称PCR法获取多脊椎蒙古羊Hoxc8启动子序列的研究被引量：2: 2; 作者陈琦赵静张立岭马月辉; 机构内蒙古医学院分子生物学研究中心包头医学院职业技术学院海南大学农学院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所; 出处《安徽农业科学》 CAS 2012年第3期1511-1513,1516,共4页; 基金国家"十一五"科技支撑项目(2006BDA13B08) 国家自然科学基金项目(30960245); 文摘 [目的]探索获得蒙古羊Hoxc8基因启动子序列的方法。[方法]尝试利用交错式热不对称PCR法,获得蒙古羊Hoxc8启动子序列。[结果]通过PCR获得的序列不理想,测序结果无法与已知序列相匹配。虽然利用交错式热不对称PCR法未获得蒙古羊的Hoxc8的启动子序列,但可为今后的相关研究提供借鉴。[结论]该研究为进一步分析蒙古羊Hoxc8的启动子区域的甲基化状态奠定了基础。; 关键词 Hoxc8 exon-1 多脊椎蒙古羊染色体步移技术交错式热不对称pcr法启动子; Keywords Hoxc8 exon-1 Multi-vertebrae Mongolian Sheep Genome walking Thermal asymmetric interlaced pcr Promoter; 分类号 S826.82 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名应用hiTAIL-PCR技术克隆Marinomonas sp.BSi20584菌株β-半乳糖苷酶基因被引量：3: 3; 作者周莉莉陈瑞琴陈秀兰曾胤新陈波; 机构华东理工大学生物工程学院国家海洋局极地科学重点实验室山东大学微生物技术国家重点实验室; 出处《极地研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期249-256,共8页; 基金海洋公益性行业科研专项经费项目(201005032-3) 国家高技术研究发展计划(863计划)(2012AA092105) 南北极环境综合考察与评估专项(CHINARE2012-01-06)资助; 文摘实验使用hiTAIL-PCR(high-efficiency thermal asymmetric interlaced PCR,高效热不对称交错PCR)方法,从海单胞菌Marinomonas sp.BSi20584中克隆β-半乳糖苷酶基因。从GenBank注册的已知β-半乳糖苷酶氨基酸序列出发,设计引物克隆编码β-半乳糖苷酶保守片段的DAN序列;根据Marinomonas sp.BSi20584天然酶N端氨基酸残基测序结果,设计上游引物,保守DNA片段5'端设计下游引物,克隆N端到保守序列之间的DNA片段;将所得的2个DNA片段拼接并命名拼接后的片段为nbs。根据hiTAIL-PCR方法设计引物,染色体步移克隆nbs上下游片段,拼接上下游片段得到全长序列,设计引物扩增全长片段并测序。本文成功克隆了Marinomonas sp.BSi20584菌株β-半乳糖苷酶的编码基因,全长1 971 bp,NCBI比对表明其编码产物为GH-42家族的一个新成员。; 关键词 Β-半乳糖苷酶高效热不对称交错pcr 染色体步移; Keywords β-galactosidase, hiTAIL-pcr, gene walking; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名天山雪莲rbcS基因启动子的克隆及序列分析被引量：2: 4; 作者张亚敏杨晶王爱英祝建波; 机构石河子大学生命科学学院; 出处《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期146-152,共7页; 基金国家自然科学基金资助项目(31160049); 文摘以天山雪莲(S.involucrata Kar.et Kir.)为材料,根据已获得的天山雪莲1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因组序列设计引物,采用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)和高效TAIL-PCR(hiTAIL-PCR)扩增到rbcS基因5′上游启动子序列,长为1 668bp。用PlantCare和PLACE软件序列分析表明,该序列具有启动子的基本元件TATA-box、CA AT-box,包含多个胁迫诱导元件,如光诱导元件、赤霉素、低温诱导元件,昼夜节律调控元件等。构建pBI-PsikrbcS-GUS植物表达载体,并成功将其转化进入农杆菌。sikrbcS基因启动子的克隆与分析为进一步研究雪莲1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因的表达调控奠定了基础。; 关键词天山雪莲 RBCS 热不对称交错pcr 高效TAIL-pcr 启动子序列分析; Keywords Saussurea involucrata Kar.et Kir rbcS TAIL-pcr HiTAIL-pcr Promoter Sequence analysis; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Bacillusa myloliquefaciens中性植酸酶基因的原核表达及蛋白纯化和性质被引量：6: 5; 作者陈艳孙建义赵学新付石军翁晓燕; 机构浙江大学教育部动物分子营养学重点实验室山东省潍坊市畜牧技术推广站浙江大学生命科学学院; 出处《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期60-64,72,共6页; 文摘淀粉液化芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens 是一种嗜热细菌,其产生的中性植酸酶具有很好的应用前景.通过TD PCR技术将Bacillus amyloliquefaciens 编码的中性植酸酶基因克隆至原核表达载体pET 30a(+)上,在大肠杆菌 BL21(DE3)中得到了高效表达,表达量占大肠杆菌可溶性蛋白的33.5%.采用金属Ni2+亲和层析对基因表达产物进行纯化,表达产物具有正常的生物学功能.; 关键词 Bacillus 原核表达植酸酶基因蛋白纯化中性植酸酶性质基因表达产物大肠杆菌 pcr技术 NI^2+ 可溶性蛋白生物学功能芽孢杆菌淀粉液化嗜热细菌基因克隆高效表达亲和层析表达量; Keywords Bacillus amyloliquefaciens neutral phytase overexpression purification; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名裂殖壶菌pks2基因启动子序列扩增及其活性分析被引量：1: 6; 作者朱清臧晓南王振东马帅; 机构中国海洋大学海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室; 出处《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期66-73,共8页; 基金国家自然科学基金项目(31872555)资助。; 文摘针对目前裂殖壶菌(Aurantiochytrium limacinum)基因工程相关研究中,对内源启动子的了解和利用仍处在初步阶段的现状,本研究从裂殖壶菌中产多不饱和脂肪酸的主要途径聚酮合酶(PKS)途径出发,利用热不对称交错PCR技术(TAIL-PCR),针对pks2基因扩增出了未知的5’端侧翼序列,初步分析得到pks2基因启动子序列,并分别在原核宿主大肠杆菌(Escherichia coli)与真核宿主酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中对启动子活性做进一步研究,发现了pks2基因启动子可以在大肠杆菌和酿酒酵母中有效启动绿色荧光蛋白的表达,而且pks2基因启动子相较于pks1、pks3基因启动子具有更高的启动活性,显现出了其作为启动子用于基因工程研究的可操作性。; 关键词启动子热不对称交错pcr技术裂殖壶菌 pks2基因绿色荧光蛋白; Keywords promoter TAIL-pcr Aurantiochytrium limacinum pks2 gene green fluorescent protein; 分类号 Q784 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名sikFBA4基因启动子的克隆及低温表达模式分析: 7; 作者张尧李忠晴王爱英祝建波; 机构农业生物技术重点实验室; 出处《草业学报》 CSCD 北大核心 2018年第12期199-207,共9页; 基金国家自然基金项目(31360053)资助。; 文摘天山雪莲生长于常年积雪覆盖高海拔处的高山区域,具有很强的极端低温生境适应能力,属于研究植物低温适应的良好模式植物。前期的研究表明,sikFBA4基因可以显著提高番茄的抗寒能力。为进一步研究sikFBA4基因的耐寒响应模式,以天山雪莲为材料,采用实时荧光定量PCR分析sikFBA4在低温胁迫下的表达模式;利用高效热不对称PCR法(Hi-Tail PCR)克隆sikFBA4启动子序列并进行生物信息学分析。为分析PsikFBA4序列克隆的完整性及转录表达特性,将PsikFBA4与GUS基因融合在烟草中进行瞬时表达。结果表明,sikFBA4在低温胁迫条件下的表达发生瞬时显著上调,并在1h达到峰值,而后表达下调。通过启动子克隆分析,在PsikFBA4序列-1648bp位置处具有冷响应元件LTRE;进一步的GUS染色和酶活力测定结果表明,低温能够显著提高GUS基因的表达活性,说明sikFBA4属于低温诱导型基因。SikFBA4基因启动子的克隆、序列分析以及表达分析,为进一步探究雪莲果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(sikFBAs)基因的表达与调控机制奠定了基础。; 关键词天山雪莲 sikFBA4 高效热不对称pcr 启动子 GUS; Keywords Saussurea involucrata sikFBA4 Hi-Tail pcr promoter GUS; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	高效热不对称交互式PCR技术克隆地黄基因	周延清王婉珅张喻李静云陈娟娟苑璐璐魏俊	《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心	2015	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	利用交错式热不对称PCR法获取多脊椎蒙古羊Hoxc8启动子序列的研究	陈琦赵静张立岭马月辉	《安徽农业科学》 CAS	2012	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	应用hiTAIL-PCR技术克隆Marinomonas sp.BSi20584菌株β-半乳糖苷酶基因	周莉莉陈瑞琴陈秀兰曾胤新陈波	《极地研究》 CAS CSCD 北大核心	2013	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	天山雪莲rbcS基因启动子的克隆及序列分析	张亚敏杨晶王爱英祝建波	《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	Bacillusa myloliquefaciens中性植酸酶基因的原核表达及蛋白纯化和性质	陈艳孙建义赵学新付石军翁晓燕	《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心	2005	6	在线阅读下载PDF 职称材料
6	裂殖壶菌pks2基因启动子序列扩增及其活性分析	朱清臧晓南王振东马帅	《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2023	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	sikFBA4基因启动子的克隆及低温表达模式分析	张尧李忠晴王爱英祝建波	《草业学报》 CSCD 北大核心	2018	0	在线阅读下载PDF 职称材料