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斑点叉尾鮰病毒ORF6基因的高效可溶表达及抗原性分析被引量：1: 1; 作者刘玉林王卫民 +1 位作者王敏李莉娟《湖北农业科学》北大核心 2011年第5期1001-1003,1048,共4页; 利用GST融合基因表达系统表达GST-GP6融合蛋白,以质粒pMD19-T-ORF6为模板,扩增出ORF6基因片段,将其克隆至大肠杆菌表达载体pGEX-4T-2,将所构建的重组质粒pGEX-4T-2-ORF6转化E.coli ER2566,并诱导表达,采用GST蛋白纯化系统进行纯化,所得... 展开更多; 关键词斑点叉尾鮰病毒 ORF6基因高效可溶表达抗原性; 在线阅读下载PDF 职称材料

H9N2禽流感病毒HA全长基因的高效可溶表达及免疫原性研究: 2; 作者谢青梅李少璃 +4 位作者陈丽周庆丰马静云毕英佐曹永长《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期93-96,共4页; 采用RT-PCR方法扩增了H9N2亚型禽流感病毒(AIV)广东株的血凝素基因HA.将HA基因克隆到笔者所设计的原核表达载体pMBX上,成功构建重组表达质粒pMBX-HA.将其转化到E.coliBL-21感受态细胞中表达,经SDS-PAGE可检测到相对分子质量约为96 200... 展开更多; 关键词禽流感病毒 HA基因高效可溶表达免疫原性; 在线阅读下载PDF 职称材料

利用SUMO表达系统高效可溶性表达鸡传染性法氏囊病病毒VP3基因被引量：5: 3; 作者曲栗尹杰超 +7 位作者李宁刘生伟傅俊华姚文兵谷学佳郝建权任桂萍李德山《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期199-202,共4页; 为评价SUMO原核表达系统(pHisSUMO Express)对病毒基因的可溶性表达,本研究从人工接种发病的鸡传染性法氏囊病(IBD)的病料组织样品中提取总RNA,通过RT-PCR扩增IBD病毒(IBDV)VP3基因,并将其克隆于pHisSUMO中构建了重组表达质粒pHisSUMO-V... 展开更多; 关键词 SUMO 高效可溶表达鸡传染性法氏囊病病毒 VP3基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组缩胆囊素融合蛋白制备及其免疫原性研究被引量：1: 4; 作者刘洁珠毕英佐 +1 位作者薛春宜曹永长《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期70-74,共5页; 成功扩增了猪缩胆囊素(CCK)基因C末端片段,并在大肠杆菌中成功表达,SDS-PAGE检测到相对分子质量约为45 000的融合蛋白,最高表达量占菌体总蛋白的40.21%,蛋白可溶性分析表明,融合蛋白主要是以可溶性形式表达.Western-blotting证实,可溶... 展开更多; 关键词缩胆囊素克隆高效可溶表达卵黄抗体生长性能; 在线阅读下载PDF 职称材料

缩胆囊素主动免疫对猪生产性能的影响被引量：1: 5; 作者刘洁珠《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第21期12868-12870,12930,共4页; [目的]利用分子生物学技术扩增猪CCK基因活性片段,检验主动免疫CCK融合蛋白对肉猪生长是否有促进作用。[方法]采用RT-PCR技术成功扩增猪缩胆囊素基因C-端活性片段,并在大肠杆菌中进行表达。[结果]主动免疫0.5和1.5mg/mlCCK疫苗处理组肉... 展开更多; 关键词缩胆囊素克隆高效可溶表达肉猪生长性能; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名斑点叉尾鮰病毒ORF6基因的高效可溶表达及抗原性分析被引量：1: 1; 作者刘玉林王卫民王敏李莉娟; 机构华中农业大学水产学院长江大学动物科学学院; 出处《湖北农业科学》北大核心 2011年第5期1001-1003,1048,共4页; 基金国家自然科学基金项目(30700624); 文摘利用GST融合基因表达系统表达GST-GP6融合蛋白,以质粒pMD19-T-ORF6为模板,扩增出ORF6基因片段,将其克隆至大肠杆菌表达载体pGEX-4T-2,将所构建的重组质粒pGEX-4T-2-ORF6转化E.coli ER2566,并诱导表达,采用GST蛋白纯化系统进行纯化,所得产物进行10%SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果表明,大肠杆菌细胞经诱导高效表达出约42kD蛋白,其分子量与GST-GP6融合蛋白相符,表达产物以可溶的形式存在。Western blot分析表明,融合蛋白能够与斑点叉尾鮰病毒(Channel catfish virus,CCV)阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性。; 关键词斑点叉尾鮰病毒 ORF6基因高效可溶表达抗原性; Keywords channel catfish virus gene ORF6 high soluble expression antigenicity; 分类号 S941.41 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名H9N2禽流感病毒HA全长基因的高效可溶表达及免疫原性研究: 2; 作者谢青梅李少璃陈丽周庆丰马静云毕英佐曹永长; 机构华南农业大学动物科学学院; 出处《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期93-96,共4页; 基金广东省科技计划项目(2004A2090102); 文摘采用RT-PCR方法扩增了H9N2亚型禽流感病毒(AIV)广东株的血凝素基因HA.将HA基因克隆到笔者所设计的原核表达载体pMBX上,成功构建重组表达质粒pMBX-HA.将其转化到E.coliBL-21感受态细胞中表达,经SDS-PAGE可检测到相对分子质量约为96 200的融合蛋白,表达产物占菌体总蛋白的29.5%.经蛋白可溶性分析看出,融合蛋白90%以上是以可溶形式表达的.W estern-b lot证实,可溶表达的融合蛋白与H9N2 AIV阳性血清具有良好的免疫反应性.将可溶表达的融合蛋白用体积分数为50%的N i-NTA树脂过柱纯化,用融合蛋白作抗原,通过ELISA方法,能特异性地检测出禽流感阳性血清.; 关键词禽流感病毒 HA基因高效可溶表达免疫原性; Keywords avian influenza virus HA gene high soluble expression immunogenicity; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用SUMO表达系统高效可溶性表达鸡传染性法氏囊病病毒VP3基因被引量：5: 3; 作者曲栗尹杰超李宁刘生伟傅俊华姚文兵谷学佳郝建权任桂萍李德山; 机构东北农业大学生命科学学院/生物制药教研室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期199-202,共4页; 基金国家自然基金(30700591) 黑龙江省青年科学技术专项资金(QC07C32); 文摘为评价SUMO原核表达系统(pHisSUMO Express)对病毒基因的可溶性表达,本研究从人工接种发病的鸡传染性法氏囊病(IBD)的病料组织样品中提取总RNA,通过RT-PCR扩增IBD病毒(IBDV)VP3基因,并将其克隆于pHisSUMO中构建了重组表达质粒pHisSUMO-VP3,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)PlysS,经IPTG诱导,得到可溶性表达的融合蛋白SUMO-VP3。结果表明,该融合蛋白表达量占细菌总蛋白35%,经HisTrapTMFF crude column层析柱纯化后的SUMO-VP3蛋白可被SUMO蛋白酶Ⅰ有效切割,获得无标签的VP3蛋白,经western blot鉴定表明该VP3蛋白具有良好的抗原性。本研究表明pHisSUMO Express表达系统是高效可溶表达外源蛋白的有效工具,所表达的病毒蛋白具有良好的抗原性,为病原诊断抗原的研究和制备提供有效表达系统。; 关键词 SUMO 高效可溶表达鸡传染性法氏囊病病毒 VP3基因; Keywords SUMO highly soluble expression infectious bursal disease virus VP3 gene; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组缩胆囊素融合蛋白制备及其免疫原性研究被引量：1: 4; 作者刘洁珠毕英佐薛春宜曹永长; 机构华南农业大学动物科学学院中山大学生命科学学院; 出处《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期70-74,共5页; 基金广东省科技计划项目(2006A20403002) 广东省自然科学基金团队项目(04205804); 文摘成功扩增了猪缩胆囊素(CCK)基因C末端片段,并在大肠杆菌中成功表达,SDS-PAGE检测到相对分子质量约为45 000的融合蛋白,最高表达量占菌体总蛋白的40.21%,蛋白可溶性分析表明,融合蛋白主要是以可溶性形式表达.Western-blotting证实,可溶表达的融合蛋白能与CCK-8阳性血清具有良好的免疫反应性.以纯化后的蛋白为免疫原制备油乳剂疫苗免疫蛋鸡,结果表明,CCK蛋白可在鸡体内引起免疫反应,加强免疫后蛋鸡血清和卵黄中CCK抗体可维持在较高水平.为了研究含有CCK抗体的蛋黄粉对鸡生长性能的影响,将其作为添加剂饲喂20日龄肉鸡,试验结果表明,饲喂添加100和300 g/t含CCK抗体蛋黄粉的肉鸡与阴性对照组相比,试验全期体增质量分别提高2.34%、3.80%,采食量分别提高0.91%、2.65%,且对饲料体增质量比无显著影响.; 关键词缩胆囊素克隆高效可溶表达卵黄抗体生长性能; Keywords cholecystoinin clone high soluble expression yolk antibody growth performance; 分类号 S856.65 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名缩胆囊素主动免疫对猪生产性能的影响被引量：1: 5; 作者刘洁珠; 机构佛山科学技术学院; 出处《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第21期12868-12870,12930,共4页; 文摘 [目的]利用分子生物学技术扩增猪CCK基因活性片段,检验主动免疫CCK融合蛋白对肉猪生长是否有促进作用。[方法]采用RT-PCR技术成功扩增猪缩胆囊素基因C-端活性片段,并在大肠杆菌中进行表达。[结果]主动免疫0.5和1.5mg/mlCCK疫苗处理组肉猪,试验期肉猪平均日增重较空白对照组分别提高5.81%和7.36%(P<0.05),采食量分别提高4.04%和2.53%。利用SDS-PAGE可获得相对分子质量45000的融合蛋白。融合蛋白主要以可溶形式表达。Wesrtern Blot证实融合蛋白与CCK-8阳性血清具有良好的免疫反应性。[结论]主动免疫CCK对肉猪生长具有一定促进作用。; 关键词缩胆囊素克隆高效可溶表达肉猪生长性能; Keywords Cholecystoinin Cloning High soluble expression Meat pigs Growth performance; 分类号 S828 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	斑点叉尾鮰病毒ORF6基因的高效可溶表达及抗原性分析	刘玉林王卫民王敏李莉娟	《湖北农业科学》北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	H9N2禽流感病毒HA全长基因的高效可溶表达及免疫原性研究	谢青梅李少璃陈丽周庆丰马静云毕英佐曹永长	《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	利用SUMO表达系统高效可溶性表达鸡传染性法氏囊病病毒VP3基因	曲栗尹杰超李宁刘生伟傅俊华姚文兵谷学佳郝建权任桂萍李德山	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	重组缩胆囊素融合蛋白制备及其免疫原性研究	刘洁珠毕英佐薛春宜曹永长	《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	缩胆囊素主动免疫对猪生产性能的影响	刘洁珠	《安徽农业科学》 CAS 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料