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雅致放射毛霉羧肽酶Y在毕赤酵母中的高效分泌表达
1
作者
张欢欢
陈昶旭
+1 位作者
刘中美
周哲敏
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第11期1-6,共6页
分别构建以2种启动子表达雅致放射毛霉羧肽酶Y的重组毕赤酵母菌株GS115,通过提高抗生素浓度筛选到具有不同拷贝数羧肽酶Y基因的重组菌株,通过对蛋白表达量的比较筛选出高效分泌表达菌株。在筛选得到的重组菌株中共表达伴侣蛋白binding p...
分别构建以2种启动子表达雅致放射毛霉羧肽酶Y的重组毕赤酵母菌株GS115,通过提高抗生素浓度筛选到具有不同拷贝数羧肽酶Y基因的重组菌株,通过对蛋白表达量的比较筛选出高效分泌表达菌株。在筛选得到的重组菌株中共表达伴侣蛋白binding protein(BIP)、protein disulfide isomerase(PDI)、endoplasmic oxidoreductin 1(ERO1),分别将羧肽酶Y酶原的分泌表达量提高到1. 87倍、1. 72倍和1. 26倍。体外羧肽酶Y酶原可以由胰蛋白酶激活。该研究实现了雅致放射毛霉羧肽酶Y在毕赤酵母中的高效分泌表达,为其工业化应用提供了技术支持。
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关键词
羧肽酶Y
毕赤酵母
共
表达
高效分泌表达
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职称材料
传染性法氏囊病毒免疫原基因在毕赤酵母中的高效分泌表达
被引量：
2
2
作者
蓝胜芝
徐素珍
+3 位作者
李宝臣
曹玉飞
赵艳敏
金顺福
《中国动物检疫》
CAS
2013年第9期50-55,共6页
从国内分离的鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)众多流行株中获得超强毒株(vvIBDV),应用RT-PCR方法,扩增得到IBDV主要保护性抗原VP2基因的开放编码框,克隆至巴斯德毕赤酵母表达载体pPICZαA,将该重组质粒pPICZαA-VP2以电转化方法转入毕赤酵母X...
从国内分离的鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)众多流行株中获得超强毒株(vvIBDV),应用RT-PCR方法,扩增得到IBDV主要保护性抗原VP2基因的开放编码框,克隆至巴斯德毕赤酵母表达载体pPICZαA,将该重组质粒pPICZαA-VP2以电转化方法转入毕赤酵母X-33感受态细胞中,通过PCR鉴定、表型筛选和抗生素浓度梯度筛选,获得高拷贝阳性重组酵母菌株X-33-pPICZαA-VP2。经摇瓶诱导表达试验获得稳定高效分泌表达的酵母工程菌,表达量为0.459mg/ml,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹(Western-blot)以及动物试验表明,重组酵母工程菌表达的目的蛋白具有鸡传染性法氏囊病病毒天然蛋白的生物活性和免疫原性。
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关键词
鸡传染性法氏囊病(IBD)
超强毒株VP2
巴斯德毕赤酵母
高效分泌表达
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职称材料
题名
雅致放射毛霉羧肽酶Y在毕赤酵母中的高效分泌表达
1
作者
张欢欢
陈昶旭
刘中美
周哲敏
机构
江南大学生物工程学院
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第11期1-6,共6页
基金
国家重点研发计划政府间国际科技创新合作重点专项(2016YFE0127400)
国家自然科学基金青年科学基金项目(31400078)。
文摘
分别构建以2种启动子表达雅致放射毛霉羧肽酶Y的重组毕赤酵母菌株GS115,通过提高抗生素浓度筛选到具有不同拷贝数羧肽酶Y基因的重组菌株,通过对蛋白表达量的比较筛选出高效分泌表达菌株。在筛选得到的重组菌株中共表达伴侣蛋白binding protein(BIP)、protein disulfide isomerase(PDI)、endoplasmic oxidoreductin 1(ERO1),分别将羧肽酶Y酶原的分泌表达量提高到1. 87倍、1. 72倍和1. 26倍。体外羧肽酶Y酶原可以由胰蛋白酶激活。该研究实现了雅致放射毛霉羧肽酶Y在毕赤酵母中的高效分泌表达,为其工业化应用提供了技术支持。
关键词
羧肽酶Y
毕赤酵母
共
表达
高效分泌表达
Keywords
carboxypeptidase Y
Pichia Pastoris
co-expression
high level expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
Q55 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
传染性法氏囊病毒免疫原基因在毕赤酵母中的高效分泌表达
被引量：
2
2
作者
蓝胜芝
徐素珍
李宝臣
曹玉飞
赵艳敏
金顺福
机构
浙江诺倍威生物技术有限公司
出处
《中国动物检疫》
CAS
2013年第9期50-55,共6页
文摘
从国内分离的鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)众多流行株中获得超强毒株(vvIBDV),应用RT-PCR方法,扩增得到IBDV主要保护性抗原VP2基因的开放编码框,克隆至巴斯德毕赤酵母表达载体pPICZαA,将该重组质粒pPICZαA-VP2以电转化方法转入毕赤酵母X-33感受态细胞中,通过PCR鉴定、表型筛选和抗生素浓度梯度筛选,获得高拷贝阳性重组酵母菌株X-33-pPICZαA-VP2。经摇瓶诱导表达试验获得稳定高效分泌表达的酵母工程菌,表达量为0.459mg/ml,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹(Western-blot)以及动物试验表明,重组酵母工程菌表达的目的蛋白具有鸡传染性法氏囊病病毒天然蛋白的生物活性和免疫原性。
关键词
鸡传染性法氏囊病(IBD)
超强毒株VP2
巴斯德毕赤酵母
高效分泌表达
Keywords
Infectious bursal disease（IBD）
Very virulent virusVP2
Pichia pastoris
Efficient Secretion expression
分类号
S852.659.4 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
雅致放射毛霉羧肽酶Y在毕赤酵母中的高效分泌表达
张欢欢
陈昶旭
刘中美
周哲敏
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
传染性法氏囊病毒免疫原基因在毕赤酵母中的高效分泌表达
蓝胜芝
徐素珍
李宝臣
曹玉飞
赵艳敏
金顺福
《中国动物检疫》
CAS
2013
2
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