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高压冷冻-冷冻替代技术在神经组织超微结构中的应用 被引量:5
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作者 张宾 吴亮亮 +3 位作者 吴莹莹 潘立君 娄森森 孔妤 《电子显微学报》 CAS CSCD 2017年第1期45-50,共6页
采用高压冷冻-冷冻替代技术对小鼠和线虫这两种模式生物的神经组织进行了样品制备、超薄切片和电镜观察,并在取材方式上进行了摸索,旨在比较化学固定法(CF)、高压冷冻固定法(HPF)和化学-高压冷冻联合固定法(CF+HPF)三种不同方式对神经... 采用高压冷冻-冷冻替代技术对小鼠和线虫这两种模式生物的神经组织进行了样品制备、超薄切片和电镜观察,并在取材方式上进行了摸索,旨在比较化学固定法(CF)、高压冷冻固定法(HPF)和化学-高压冷冻联合固定法(CF+HPF)三种不同方式对神经组织超微结构的影响,促进高压冷冻-冷冻替代技术在神经生物学中的应用。透射电镜观察结果显示:与传统的化学固定相比,高压冷冻固定对神经组织样品具有较好的优势,能够减少化学处理所产生的人工假象;另一方面,对于不同动物的神经组织而言,所适用的固定方式也不相同,鼠脑适用于活检枪(biopsy gun)取样后直接进行HPF固定,所得结构比较完整,神经组织微观结构清晰。而在高压冷冻之前选用CF进行预固定,能加大样品结构保存的完整性,但在膜的细腻程度上不如直接进行高压冷冻制样的结果。线虫样品由于存在较厚的体壁保护,它更适于直接进行HPF处理,从而缩短了固定前的滞留时间,可有效保留腹部神经元超微结构。 展开更多
关键词 高压冷冻-冷冻替代 神经组织 活检枪 鼠脑 线虫
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应用高压冷冻-冷冻置换技术研究受Potyvirus侵染的寄主细胞超微结构 被引量:5
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作者 郑瑛 洪健 +1 位作者 祝建 陈集双 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期146-151,共6页
应用高压冷冻-冷冻置换技术(HPF-FS)制备了马铃薯Y病毒属的小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV)和大豆花叶病毒(SMV)侵染寄主植物叶细胞的超薄切片样品,并与传统化学固定方法进行比较。透射电镜观察结果显示:病毒粒子和内含体的形态分布在两种方... 应用高压冷冻-冷冻置换技术(HPF-FS)制备了马铃薯Y病毒属的小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV)和大豆花叶病毒(SMV)侵染寄主植物叶细胞的超薄切片样品,并与传统化学固定方法进行比较。透射电镜观察结果显示:病毒粒子和内含体的形态分布在两种方法处理的样品中无明显差异,但高压冷冻样品的细胞超微结构精细,细胞壁与细胞质之间边界清晰,质膜平滑而完整,细胞基质丰富;细胞核和叶绿体、线粒体等形态饱满,高尔基体潴泡结构及分泌小泡清晰,在ZYMV感染细胞的叶绿体中观察到囊泡结构。而化学处理的样品普遍存在细胞结构的收缩和变形,特别是质膜褶皱,与细胞壁分离,叶绿体呈梭形,片层结构发生改变,高尔基体潴泡结构及分泌小泡相当少见。实验结果有利于正确区别病毒所引起的细胞病理变化和化学处理而产生的人工假象。 展开更多
关键词 高压冷冻-冷冻置换 小西葫芦黄花叶病毒 大豆花叶病毒 超微结构
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高压冷冻及冷冻替代样品制备方法在体扫描电镜中的应用 被引量:5
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作者 顾嘉敏 许淑嫚 +3 位作者 郭帅 巩志伟 倪兵 刘铮 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期471-480,共10页
高压冷冻及冷冻替代技术是一种利用高压和低温对含水组织样品进行瞬间冷冻固定和低温脱水的电镜样品制备技术,它因可以保存更加真实的细胞超微结构而常应用于透射电镜观察和分析。本文利用模式动物小鼠为材料,将这种技术应用于体扫描电... 高压冷冻及冷冻替代技术是一种利用高压和低温对含水组织样品进行瞬间冷冻固定和低温脱水的电镜样品制备技术,它因可以保存更加真实的细胞超微结构而常应用于透射电镜观察和分析。本文利用模式动物小鼠为材料,将这种技术应用于体扫描电镜的样品制备,并与常规化学固定的样品制备进行比较。结果显示在小鼠心肌组织中,高压冷冻及冷冻替代技术可以有效避免常规制备样品中的细胞器膜结构皱缩、细胞质分布不均匀、细胞核膜收缩形成锯齿状、甚至局部断裂等现象,使细胞超微结构更接近其生活时的状态。 展开更多
关键词 高压冷冻-冷冻替代 心肌组织 超微结构 体扫描电镜成像 三维重构
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高压冷冻及冷冻替代技术在不同生物样品超微结构中的应用 被引量:3
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作者 葛灵 钦风凌 +3 位作者 祁方杰 涂溢晖 何钧 边玮 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期61-66,共6页
高压冷冻仪在固定样品时,高压和冷冻基本是同步发生的,使得生物样品在数毫秒的时间内被瞬时固定,保证其内部结构接近于生理状态,有效减少了化学固定法中的化学试剂对细胞结构的破坏,极大程度保存了细胞在近似自然状态下的超微结构。本... 高压冷冻仪在固定样品时,高压和冷冻基本是同步发生的,使得生物样品在数毫秒的时间内被瞬时固定,保证其内部结构接近于生理状态,有效减少了化学固定法中的化学试剂对细胞结构的破坏,极大程度保存了细胞在近似自然状态下的超微结构。本文分别采用化学固定法(CF)和高压冷冻固定法(HPF)对小鼠的睾丸组织、Hela细胞和酵母进行了样品制备,旨在比较这两种方法对不同生物样品超微结构的影响,促进高压冷冻-冷冻替代(HPF-FS)技术在生物学中的应用。透射电镜(TEM)观察结果显示:与传统的化学固定相比,高压冷冻固定可以清晰、完整地保存生物样品的膜结构和亚细胞器结构,细胞形态更加接近自然。 展开更多
关键词 高压冷冻-冷冻替代 超微结构 睾丸 HELA细胞 酵母
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