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超声微泡爆破辅助骨髓间充质干细胞移植改善糖尿病肾病的机制研究
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作者 赵昆 冯钰瑾 +3 位作者 杨晓云 刘芬 宗美男 王一 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第10期937-941,共5页
目的探讨超声微泡爆破辅助骨髓间充质干细胞(BMSC)移植通过Toll样受体4(TLR-4)/核因子κB(NF-κB)信号通路对糖尿病肾病(DN)炎症反应及肾功能的改善作用及具体机制。方法建立DN大鼠模型,随机分为模型(Model)组、BMSC组、BMSC+微泡组、BM... 目的探讨超声微泡爆破辅助骨髓间充质干细胞(BMSC)移植通过Toll样受体4(TLR-4)/核因子κB(NF-κB)信号通路对糖尿病肾病(DN)炎症反应及肾功能的改善作用及具体机制。方法建立DN大鼠模型,随机分为模型(Model)组、BMSC组、BMSC+微泡组、BMSC+微泡+TLR-4/NF-κB通路激活剂脂多糖(BMSC+微泡+LPS)组,每组12只,另取12只大鼠作为对照(CK)组。采用生物化学分析仪、双缩脲法、HE染色法、Masson染色法、ELISA法、Western blotting检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、肌酐(sCr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白总量(24 h-UTP)、肾组织病理变化、纤维化情况、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、TLR-4和NF-κB表达。结果CK组肾组织结构正常、胶原纤维少;Model组肾组织病变明显,胶原纤维沉积严重;BMSC组及BMSC+微泡组病变依次减轻,而加用LPS后病变加重。与CK组比较,Model组FBG、TC、TG、sCr、BUN、24 h-UTP、IL-1β、TNF-α、TLR-4、NF-κB蛋白表达升高(P<0.05);与Model组相比,BMSC组上述蛋白表达降低(P<0.05);与BMSC组相比,BMSC+微泡组上述蛋白表达降低(P<0.05);与BMSC+微泡组比较,BMSC+微泡+LPS组上述蛋白表达升高(P<0.05)。结论超声微泡爆破辅助BMSC移植对DN大鼠的改善作用可能与抑制TLR-4/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 超声微泡爆破 骨髓充质干细胞 TLR-4/NF-κB信号通路 糖尿病肾病
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七叶苷联合骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤修复的影响
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作者 杨伟铭 梁超伦 +5 位作者 陈凌 李金金 柳思露 郑坤锐 谢典翁 李兴 《中成药》 北大核心 2025年第5期1486-1493,共8页
目的 探讨七叶苷联合骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)移植对大鼠脊髓损伤(SCI)修复的促进作用。方法 将大鼠随机分为假手术组、模型组、七叶苷组(20 mg/kg七叶苷,灌胃)、BM-MSCs组(1 mL 1×10^(6)/mL BM-MSCs,尾静脉注射)和联合给药组。... 目的 探讨七叶苷联合骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)移植对大鼠脊髓损伤(SCI)修复的促进作用。方法 将大鼠随机分为假手术组、模型组、七叶苷组(20 mg/kg七叶苷,灌胃)、BM-MSCs组(1 mL 1×10^(6)/mL BM-MSCs,尾静脉注射)和联合给药组。使用Allen’s法构建SCI大鼠模型,造模次日开始给药,持续14 d。于给药3、7、14 d,使用BBB评分评估大鼠后肢运动功能,并在造模后第14天进行大鼠足迹实验。给药14 d后,HE染色和尼氏染色观察脊髓组织变化;采用试剂盒检测脊髓组织SOD、GSH活性和MDA水平;免疫荧光法检测脊髓组织MAP2、GAP43和GFAP表达;Western blot法检测脊髓组织NQO-1、Nrf-2、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果 与模型组比较,七叶苷组、BM-MSCs组及联合给药组大鼠后肢功能、脊髓组织形态学均有改善(P<0.05),MDA水平降低(P<0.05),SOD和GSH活性升高(P<0.05),MAP2、GAP43荧光强度升高(P<0.05),GFAP荧光强度降低(P<0.05),NQO-1、Nrf-2、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),Bax蛋白表达降低(P<0.05),且联合给药组效果更佳(P<0.05)。结论 七叶苷联合BM-MSCs移植能有效改善SCI大鼠脊髓组织的损伤情况和后肢功能,其作用可能是通过激活Nrf-2/NQO-1信号通路抑制氧化应激反应,从而减少神经细胞的凋亡、阻断胶质瘢痕形成,促进干细胞分化重建神经元而实现的。 展开更多
关键词 七叶苷 骨髓充质干细胞 脊髓损伤 氧化应激 凋亡 Nrf-2/NQO-1信号通路
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牛磺熊去氧胆酸联合骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤的修复作用 被引量:1
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作者 文雅倩 梁超伦 +5 位作者 郑坤锐 谢典翁 杨海梅 邹梦迪 郭达 李兴 《中成药》 北大核心 2025年第1期66-72,共7页
目的探讨牛磺熊去氧胆酸联合骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤的修复作用。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、牛磺熊去氧胆酸组、骨髓间充质干细胞组和联合干预组,采用Allen’s法建立脊髓损伤(SCI)模型。造模后次日,牛磺熊去氧... 目的探讨牛磺熊去氧胆酸联合骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤的修复作用。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、牛磺熊去氧胆酸组、骨髓间充质干细胞组和联合干预组,采用Allen’s法建立脊髓损伤(SCI)模型。造模后次日,牛磺熊去氧胆酸组和联合干预组大鼠灌胃200 mg/kg牛磺熊去氧胆酸;造模后第3天,骨髓间充质干细胞组和联合干预组大鼠尾静脉注射1 mL第三代骨髓间充质干细胞(1×10^(6)/mL);假手术组和模型组大鼠则持续14 d生理盐水灌胃并后续尾静脉PBS注射。造模后第3、7、14天,观察大鼠后肢运动功能并进行BBB评分。给药结束后,通过足迹实验记录大鼠后肢运动轨迹,Western blot法检测脊髓组织IL-6、IL-10、Arg-1、PI3K、Akt蛋白表达,HE染色和Nissl染色观察脊髓组织病理变化,免疫荧光染色检测MAP2、GAP43、GFAP表达。结果与模型组比较,牛磺熊去氧胆酸组、骨髓间充质干细胞组和联合干预组大鼠后肢功能、脊髓组织形态学均有改善(P<0.05),MAP2、GAP43荧光强度和IL-10、Arg-1、p-PI3K、p-Akt蛋白表达升高(P<0.05),GFAP荧光强度和IL-6蛋白表达降低(P<0.05),其中联合干预组效果更佳(P<0.05)。结论牛磺熊去氧胆酸联合骨髓间充质干细胞移植可能通过激活PI3K/Akt信号通路,降低炎症反应,减轻继发损伤,促进轴突和髓鞘再生,达到恢复大鼠脊髓损伤功能的作用。 展开更多
关键词 牛磺熊去氧胆酸 骨髓充质干细胞 脊髓损伤 炎症 PI3K/AKT信号通路
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骨髓间充质干细胞移植抑制脊髓损伤后胶质瘢痕形成的机制 被引量:2
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作者 吴佳俊 席回林 +3 位作者 杜嘉妮 田春平 胡倩倩 杨彦玲 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期636-640,共5页
脊髓损伤(SCI)是一种严重的中枢神经系统疾病。其中脊髓损伤慢性期的胶质瘢痕对脊髓损伤后神经元生存以及轴突生长产生着不利的影响。随着间充质干细胞移植的发展,其中骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植在抑制脊髓损伤后胶质瘢痕形成展现出... 脊髓损伤(SCI)是一种严重的中枢神经系统疾病。其中脊髓损伤慢性期的胶质瘢痕对脊髓损伤后神经元生存以及轴突生长产生着不利的影响。随着间充质干细胞移植的发展,其中骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植在抑制脊髓损伤后胶质瘢痕形成展现出良好的前景。本文将从细胞和分子机制着重讨论骨髓间充质干细胞移植在基础实验中抑制脊髓损伤后胶质瘢痕形成的最新研究,以及目前应用骨髓间充质干细胞移植所面临的挑战和未来发展方向。 展开更多
关键词 脊髓损伤 骨髓充质干细胞 胶质瘢痕 细胞移植
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自体骨髓间充质干细胞移植对兔角膜碱烧伤炎症反应的抑制作用 被引量:7
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作者 吴利安 王从毅 +3 位作者 杨文 杨新光 张林 王佳慧 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期798-804,共7页
背景 眼表碱烧伤可引起角膜溃疡及角膜新生血管形成,导致角膜混浊,目前尚无有效的疗法.已有研究认为间充质干细胞(MSCs)移植具有修复角膜损伤的作用,但其在体内对角膜碱烧伤治疗的作用机制尚不清楚. 目的 研究兔自体骨髓间充质干细胞... 背景 眼表碱烧伤可引起角膜溃疡及角膜新生血管形成,导致角膜混浊,目前尚无有效的疗法.已有研究认为间充质干细胞(MSCs)移植具有修复角膜损伤的作用,但其在体内对角膜碱烧伤治疗的作用机制尚不清楚. 目的 研究兔自体骨髓间充质干细胞(BM SCs)对碱烧伤角膜的抗炎机制.方法 抽取2~3月龄日本大白兔骨髓,经体外分离培养得到BMSCs并进行传代,取第3代细胞用于实验,倒置相差显微镜下观察培养细胞的形态,采用流式细胞仪检测细胞表面标志物的表达,对细胞进行生物学鉴定.采用角膜贴敷NaOH滤纸法在24只日本大白兔的右眼建立中度角膜碱烧伤模型,然后将造模成功的实验兔应用随机数字表法随机分为2个组,于碱烧伤后1h分别在模型眼结膜下注射同种自体BMSCs悬液300μl(细胞密度5×106/μ1)(BMSCs组)或等容积PBS(PBS组),每组各12只.分别于移植后3、14和28 d于裂隙灯显微镜下观察角膜的混浊度变化并进行评分,采用组织病理学方法检查角膜组织中炎症反应程度并进行多形核中性粒细胞(PMNs)计数;采用免疫组织化学染色法定位并检测角膜组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达.结果 体外分离培养的兔BMSCs贴壁生长,呈长梭形,细胞形态均一,传代后其形态无明显改变.细胞表面黏附分子标志物CD29和CD90阳性表达的细胞比例分别为99.18%和97.94%,而造血细胞标志物CD34和CD31的阳性表达分别为0.74%和0.15%.造模后兔右眼出现角膜混浊、上皮脱落、角膜基质水肿和新生血管形成,移植后14d和28 d BMSCs组混浊度评分分别为2.37±0.52和2.25±0.50,均明显低于PBS组的3.00±0.53和3.25±0.50,差异均有统计学意义(t=2.376、2.828,均P<0.05);移植后14 d和28 d BMSCs组角膜中PMNs数目分别为(34.17±1.85)/12个视野和(25.64±3.86)/12个视野,明显少于PBS组的(42.70±1.54)/12个视野和(32.67±1.42)/12个视野,差异均有统计学意义(t=10.021、4.832,均P=0.000);移植后14 d和28 d BMSCs组角膜组织中MMP-2蛋白的阳性表达量(A值)分别为0.388±0.016和0.384±0.006,明显低于PBS组的0.438±0.006和0.412±0.005,差异均有统计学意义(t=10.205、13.514,均P=0.000).结论 角膜碱烧伤后早期行自体BMSCs移植可减少PMNs浸润,减轻角膜的炎症反应,下调或抑制MMP-2在受损角膜处的表达,抑制基质胶原纤维的降解,从而减少碱烧伤后角膜溃疡的发生。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞移植/方法 生物分子标志物 化学烧伤/治疗 角膜病/治疗 病理性新生血管/化学诱导 炎症/预防和治疗 基质金属蛋白酶 动物模型
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肾上腺髓质素基因转染增强骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死大鼠心室重构及心功能的影响 被引量:5
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作者 林茂海 苏津自 许昌声 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1692-1699,共8页
目的:研究肾上腺髓质素(ADM)基因转染增强骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对心肌梗死大鼠心室重构及心功能的治疗作用。方法:贴壁法体外分离、扩增培养大鼠骨髓间充质干细胞,用X-gal染色测含ADM基因的重组腺病毒(Ad-ADM)对MSCs感染率,ELISA... 目的:研究肾上腺髓质素(ADM)基因转染增强骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对心肌梗死大鼠心室重构及心功能的治疗作用。方法:贴壁法体外分离、扩增培养大鼠骨髓间充质干细胞,用X-gal染色测含ADM基因的重组腺病毒(Ad-ADM)对MSCs感染率,ELISA检测Ad-ADM转染后细胞上清液ADM的含量。通过结扎左冠状动脉前降支制备大鼠心肌梗死模型;以DAPI标记细胞通过心肌局部注射移植MSCs;采用生理记录仪测量大鼠的心功能,荧光显微镜观察移植细胞在心脏存活及分布,免疫组化检测ADM在心肌梗死区的表达及心梗区血管密度;天狼猩红染色检测胶原含量,用偏振光显微镜分析Ⅰ/Ⅲ型胶原比率。结果:重组腺病毒对MSCs的转染率与病毒感染复数(MOI)具有量效关系,MOI为150时细胞的感染率达95.4%;转染Ad-ADM后,MSCs可有效表达ADM,7 d时达到表达高峰,与对照组相比明显增加[(26.53±1.42vs1.34±0.08)ng/L,P<0.05],15 d后与空白对照组无差别[(2.20±1.44vs1.52±0.33)ng/L,P>0.05];在受体大鼠的心脏切片上有DAPI标记的移植细胞的存活;与对照组及其它组相比,ADM基因修饰的MSCs组心肌梗死区ADM的表达增加;与对照组比较,单纯细胞移植组心梗区新生血管密度增高(P<0.01);而与单纯MSCs移植组及单纯Ad-ADM注射组比较,ADM基因修饰的MSCs移植组梗死区血管密度增高更明显(P<0.05);单纯MSCs移植组能降低梗死区Ⅰ/Ⅲ型胶原比率(P<0.01),并能改善左室功能;与单纯细胞组比较ADM基因修饰的MSCs移植组梗死区Ⅰ/Ⅲ型胶原比率降低更明显(P<0.05),而左室功能改善更多。结论:ADM转染的MSCs移植可能通过局部ADM表达的增加,增强MSCs移植的血管新生作用及降低梗死区Ⅰ/Ⅲ型胶原比率,从而增强单纯MSCs细胞移植改善心功能的作用。 展开更多
关键词 肾上腺髓质素 重组腺病毒 心肌梗死 血管生成 心室重构 骨髓间充质干细胞移植
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骨髓间充质干细胞移植对木瓜蛋白酶和[60Co]照射所致大鼠肺气肿的作用 被引量:14
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作者 甄国华 刘红梅 +3 位作者 张珍祥 张惠兰 顾乃兵 徐永健 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1529-1533,共5页
目的:研究骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对木瓜蛋白酶和[^(60)Co]照射所致肺气肿的影响及其机制。方法:雌性大鼠随机分为对照组、肺气肿组和肺气肿+MSCs移植组。将大鼠进行[^(60)Co]照射,在气管内滴入木瓜蛋白酶建立雌性大鼠肺气肿模型,... 目的:研究骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对木瓜蛋白酶和[^(60)Co]照射所致肺气肿的影响及其机制。方法:雌性大鼠随机分为对照组、肺气肿组和肺气肿+MSCs移植组。将大鼠进行[^(60)Co]照射,在气管内滴入木瓜蛋白酶建立雌性大鼠肺气肿模型,然后将培养的雄性大鼠MSCs经尾静脉注射到雌性肺气肿大鼠。观察移植后大鼠肺组织的病理学变化;通过PCR和Y染色体荧光原位杂交(Y-FISH)示踪雄性大鼠MSCs在雌性肺气肿大鼠肺组织内的植入情况;用Y-FISH和肺泡表面活性物质蛋白C(SP-C)免疫荧光显色方法检测雄性大鼠MSCs在受体肺组织内是否分化为II型肺泡上皮细胞。结果:肺气肿组、肺气肿+MSCs移植组大鼠均出现肺气肿改变,但后者较前者的肺气肿明显减轻,2组之间的肺泡平均内衬间隔、平均肺泡面积和单位面积肺泡数均有显著差异;PCR结果显示肺气肿+MSCs移植组的大鼠肺脏基因组DNA中可以扩增出位于Y染色体的Sry基因片段;Y-FISH显示肺气肿+MSCs移植组的雌性大鼠肺组织中有Y染色体阳性的细胞,并且部分Y染色体阳性细胞同时表达SP-C。结论:MSCs移植能够减轻木瓜蛋白酶和[^(60)Co]照射所致的肺气肿,这可能与移植的MSCs在受体肺组织中的植入和分化为II型肺泡上皮细胞有关。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞移植 肺气肿 木瓜蛋白酶 钴放射性同位素
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骨髓间充质干细胞移植降低缺血-再灌注肠黏膜通透性的实验研究 被引量:2
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作者 江海涛 朱维铭 +3 位作者 顾立立 曲林林 李秋荣 黎介寿 《肠外与肠内营养》 CAS 北大核心 2010年第2期93-97,共5页
目的:观察骨髓间充质干细胞移植对缺血-再灌注损伤的肠黏膜通透性变化的影响。方法:体外分离、培养和扩增雄性SD大鼠骨髓间充质干细胞,将雌性SD大鼠随机分为三组,A组为假手术组,仅行剖腹,不夹闭肠系膜上动脉;B组大鼠行肠系膜上动脉夹闭4... 目的:观察骨髓间充质干细胞移植对缺血-再灌注损伤的肠黏膜通透性变化的影响。方法:体外分离、培养和扩增雄性SD大鼠骨髓间充质干细胞,将雌性SD大鼠随机分为三组,A组为假手术组,仅行剖腹,不夹闭肠系膜上动脉;B组大鼠行肠系膜上动脉夹闭45min后开放,取培养至第三代的骨髓间充质干细胞直接肠黏膜下注射移植;C组大鼠夹闭肠系膜上动脉45min后开放,黏膜下注射等量的等渗盐水。术后第3和第6天行乳果糖/甘露醇(L/M)灌胃,6h后收集尿液测定尿L/M比值。取回肠组织行Y染色体原位杂交检测供鼠来源的细胞。测定血浆D-乳酸水平。结果:移植的骨髓间充质干细胞能向缺血-再灌注损伤的肠黏膜归巢,细胞移植的大鼠肠黏膜通透性较C组明显降低(P<0.05)。结论:骨髓间充质干细胞移植可抑制缺血-再灌注损伤后肠黏膜通透性的升高,维护肠黏膜机械屏障的完整性。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞移植 缺血-再灌注 肠黏膜通透性
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骨髓间充质干细胞移植治疗小儿重度脑性瘫痪的疗效观察 被引量:17
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作者 杜侃 栾佐 +4 位作者 屈素清 刘卫鹏 汪兆艳 杨印祥 杨辉 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期55-58,共4页
目的观察自体骨髓间充质干细胞移植治疗重度脑性瘫痪儿童的临床疗效。方法对50例重症脑性瘫痪患儿进行骨髓间充质干细胞移植,移植前、后6个月进行自身对照,比较患儿粗大运动和综合功能的进步程度,并随访移植后0、1、3、6、12个月患儿一... 目的观察自体骨髓间充质干细胞移植治疗重度脑性瘫痪儿童的临床疗效。方法对50例重症脑性瘫痪患儿进行骨髓间充质干细胞移植,移植前、后6个月进行自身对照,比较患儿粗大运动和综合功能的进步程度,并随访移植后0、1、3、6、12个月患儿一般情况。结果 50例患儿自体骨髓间充质干细胞培养均成功。移植后6个月失访1例,至12个月失访4例,余46例完成观察。移植后6例患儿在手术后3~5 d即出现显著临床改善,大部分患儿在移植后3个月左右运动能力进步,6个月之后进步幅度减缓。移植前6个月综合功能评估进步程度为(19.14±9.82)%,移植后6个月为(28.49±10.52)%,移植后进步显著大于移植前(P=0.001),其中以运动和认知改善明显。粗大运动功能评估总百分比从移植前的(23.80±10.64)%,上升到移植后(27.31±11.72)%,平均每月上升(1.05±0.49)%,显著大于移植前6个月进步幅度(P=0.001)。结论自体骨髓间充质干细胞移植对康复治疗效果不佳的重症脑瘫患儿有明显临床改善作用,能够有效促进患儿各功能区的发育。 展开更多
关键词 脑瘫 骨髓充质干细胞 移植 综合功能评定 粗大运动功能评估
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自体骨髓间充质干细胞移植治疗糖尿病足1例 被引量:8
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作者 陆德宾 陈兵 +3 位作者 梁自文 姜友昭 李晓艳 蔡红卫 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1125-1125,共1页
关键词 骨髓充质干细胞 糖尿病足 移植 自体
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骨髓间充质干细胞移植对急性脊髓损伤大鼠神经功能恢复及Nogo-A表达的影响 被引量:16
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作者 黄洁萍 翁金森 +4 位作者 王锋 刘楠 贾小力 张逸仙 王杰华 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期582-586,I0001,共6页
目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)静脉注射移植对急性脊髓损伤(SCI)大鼠神经功能恢复及Nogo-A表达的影响。方法:采用全贴壁法分离培养大鼠BMSCs,雌性SD大鼠96只,随机分成4组,假手术组(sham组)、损伤对照组(SCI组)、溶剂对照组(vehicle... 目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)静脉注射移植对急性脊髓损伤(SCI)大鼠神经功能恢复及Nogo-A表达的影响。方法:采用全贴壁法分离培养大鼠BMSCs,雌性SD大鼠96只,随机分成4组,假手术组(sham组)、损伤对照组(SCI组)、溶剂对照组(vehicle组)和BMSCs治疗组(BMSCs组),24只/组。采用改良Allen法制作大鼠急性SCI模型,BMSCs移植前用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记,BMSCs组于造模成功10min后自大鼠尾静脉注射BMSCs悬液1ml(5×106个BMSCs);vehicle组则注射1ml0.01m的磷酸盐缓冲液(PBS)。术后第1天、第3天、第7天和第14天通过进行BBB神经行为学评分对神经功能进行评估,观察其恢复状况,免疫组化及RT-PCR法检测Nogo-A表达。结果:BMSCs组损伤周边区脊髓组织中观察到CFSE染色的阳性细胞;BMSCs组术后第7天和第14天神经功能评估明显优于SCI组、vehicle组;BMSCs组术后第3天、第7天和第14天脊髓损伤区周边组织中Nogo-A表达较SCI组和Vehicle组明显降低(P<0.01)。结论:BMSCs移植可以通过下调SCI中Nogo-A的生成来促进脊髓损伤后大鼠神经功能的恢复。 展开更多
关键词 骨髓充质干细胞 脊髓损伤 神经功能 NOGO-A
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miRNA let-7b修饰的骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后脊髓NF-200、GFAP表达的影响 被引量:9
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作者 徐玉生 崔浩 +4 位作者 张松 王培松 朱海洋 钟斌 苗金红 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2015年第3期400-403,共4页
目的:通过观察miRNA let-7b修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脊髓损伤大鼠的运动功能恢复的作用,探讨miRNA let-7b在损伤脊髓修复中的作用和机制。方法:60只成年SD大鼠分为对照组、BMSCs组、miRNA组,每组20只。采用改良Allen's... 目的:通过观察miRNA let-7b修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脊髓损伤大鼠的运动功能恢复的作用,探讨miRNA let-7b在损伤脊髓修复中的作用和机制。方法:60只成年SD大鼠分为对照组、BMSCs组、miRNA组,每组20只。采用改良Allen's法制备脊髓损伤模型。造模后1周,BMSCs组行BMSCs移植,miRNA组移植miRNA let-7b慢病毒载体感染的BMSCs,对照组注射生理盐水。移植后第3天至8周,按BBB标准量表对大鼠后肢运动功能进行评分,用免疫组化方法检测脊髓中神经丝蛋白-200(NF-200)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果:实验时间内,各组大鼠BBB评分和脊髓NF-200表达持续升高;不同时间点BBB评分和脊髓NF-200表达以miRNA组最高,BMSCs组次之,对照组最低(P<0.05)。移植后各组脊髓GFAP表达均呈持续性增高,各时间点GFAP阳性表达面积以对照组最大,BMSCs次之,miRNA组最小(P<0.05)。结论:miRNA let-7b可能通过促进BMSCs分化为神经元样细胞、抑制脊髓损伤后反应性胶质细胞的增生及胶质瘢痕形成等机制促进损伤后的神经功能恢复。 展开更多
关键词 MIRNA let-7b 骨髓充质干细胞 脊髓损伤 细胞移植 大鼠
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大黄苷元对骨髓间充质干细胞移植脑缺血大鼠血脑屏障的作用与机制 被引量:11
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作者 李建生 刘敬霞 +4 位作者 孙捷 赵跃武 苏静 郭晓燕 李宁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1628-1633,共6页
目的观察脑缺血/再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性(BBB)改变,并从对纤溶酶系统调节的影响方面探讨大黄苷元、BMSCs移植及其联合保护微血管损伤的作用机制。方法体外培养扩增BMSCs;大鼠随机分组;线栓法制备MCAO模型;术后3h再灌注24h,将BMSC... 目的观察脑缺血/再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性(BBB)改变,并从对纤溶酶系统调节的影响方面探讨大黄苷元、BMSCs移植及其联合保护微血管损伤的作用机制。方法体外培养扩增BMSCs;大鼠随机分组;线栓法制备MCAO模型;术后3h再灌注24h,将BMSCs由同侧颈内动脉移植入脑,大黄苷元灌胃用药;观察脑微血管病理改变,免疫组织化学法测定BMSCs移植后d7(早期)、d14(中期)和d28(后期)IgG和LN、tPA和PAI表达变化。结果模型组大鼠微血管残缺、破损,脑组织IgG和tPA表达增强,随再灌注时间延长呈增加趋势;LN和PAI表达减弱,其中PAI随再灌注时间延长呈减弱趋势。与模型组比较,大黄苷元组d7、移植组d14和d28、联合组各时间点大鼠微血管结构改善明显;大黄苷元组各时间点的IgG和tPA表达均减弱,LN增强,d14的PAI表达增强;移植组d14和d28的IgG和tPA表达减弱,LN增强;联合组各时间点IgG和d14的tPA表达减弱,d7的LN和各时间点PAI表达增强。联合组d7的微血管结构较移植组完整,其d28的tPA表达分别较大黄苷元和移植组降低,d14和d28的LN、d7和d28的PAI-1均较大黄苷元和移植组增强。结论脑缺血/再灌注损伤后微血管基底膜层连蛋白降解明显,BBB通透性随再灌注时间延长而增加;BMSCs移植后早期保护微血管受损的作用不明显,此后随移植时间的延长而增强;大黄苷元可使BMSCs移植早期的作用提前及中、后期作用增强,其作用机制可能与增强PAI-1表达以调节纤溶酶平衡,进而减轻微血管基底膜胶原降解有关。 展开更多
关键词 脑缺血 大鼠 大黄苷元 骨髓充质干细胞 血脑屏障 纤溶酶
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骨髓间充质干细胞移植重建极重度放射损伤小鼠造血功能 被引量:8
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作者 刘凡凤 邱慧颖 +4 位作者 解琳娜 章卫平 郑晓丽 高磊 王健民 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1015-1019,共5页
目的:探讨小鼠骨髓间充质干细胞(mouse bone marrow mesenchymal stem cell,mMSC)单独输注对重度放射损伤小鼠造血功能重建的影响。方法:将体外培养扩增的雄性C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞输注给受致死剂量全身照射(8 Gy)的雌性C57BL/6... 目的:探讨小鼠骨髓间充质干细胞(mouse bone marrow mesenchymal stem cell,mMSC)单独输注对重度放射损伤小鼠造血功能重建的影响。方法:将体外培养扩增的雄性C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞输注给受致死剂量全身照射(8 Gy)的雌性C57BL/6小鼠,检测移植后外周血象、骨髓有核细胞数、病理变化、粒-单核细胞系祖细胞集落(CFU-GM)计数及性染色体比例,以未输注MSCs的小鼠作对照。结果:对照组小鼠(n=6)在照射后20d内全部死于造血功能衰竭;MSCs组移植后血象明显下降,但2周后迅速恢复,28d时恢复到照射前的60 %左右,42d外周血象基本恢复。MSC促进骨髓有核细胞数及CFU-GM快速恢复,有利于骨髓组织学的明显恢复改善。移植后42 d ,仍可在受致死量照射的受体鼠内检测到供体MSC,但不能长期植入。结论:小鼠骨髓间充质干细胞单独输注可促进重度放射损伤小鼠的造血功能恢复,其植入时间长短可能与输注的细胞量有关。 展开更多
关键词 骨髓 充质干细胞 放射损伤 造血系统
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骨髓间充质干细胞移植重建碱烧伤眼表的实验研究 被引量:12
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作者 刘国华 晏晓明 +1 位作者 杨松霖 李海丽 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2008年第11期810-813,共4页
目的探索人骨髓间充质干细胞(MSCs)的诱导分化条件,观察负载人MSCs的羊膜移植重建碱烧伤大鼠眼表的疗效。方法传三代人MSCs分组培养,不同条件刺激后种于羊膜表面。碱烧伤后1个月大鼠随机分A、B、C和D组:A组(A1、A2、A3、A4)移植不同条... 目的探索人骨髓间充质干细胞(MSCs)的诱导分化条件,观察负载人MSCs的羊膜移植重建碱烧伤大鼠眼表的疗效。方法传三代人MSCs分组培养,不同条件刺激后种于羊膜表面。碱烧伤后1个月大鼠随机分A、B、C和D组:A组(A1、A2、A3、A4)移植不同条件诱导的人MSCs,B组移植人角膜缘干细胞(LSCs),C组移植羊膜,D组未治疗。术后观察眼表并评分,2周和1个月时行印迹细胞学(IC)检查,1个月时切片行苏木精-伊红染色,免疫组织化学和免疫荧光检测溴脱氧尿嘧啶(BrdU)、ABCG2、K3/K12、Cx43和血管内皮生长因子(VEGF)。结果术后A、B组较C、D组角膜新生血管和炎性细胞减少、透明度增加(P<0.05)。IC检查示A、B组未见杯状细胞,C、D组可见杯状细胞。A、B组均形成3层以上上皮细胞,C组3层左右,D组为1~2层。免疫组织化学和免疫荧光检查示:A、B组角膜表面可检测到BrdU、ABCG2阳性细胞;A组Cx43均为阴性,A4组中有2个标本K3/K12为弱阳性,其余A组标本均为阴性,B组K3/K12、Cx43均为阳性;A、B组VEGF均较低,C组较强,D组最强。结论人MSCs与人LSCs相同,可成功重建碱烧伤大鼠眼表。其眼表重建功能可能与抗炎和抗血管化作用有关。 展开更多
关键词 骨髓充质干细胞 角膜缘干细胞 移植 角膜 碱烧伤
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骨髓间充质干细胞移植对豚鼠皮肤深Ⅱ度烧伤的治疗作用 被引量:8
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作者 呼和塔娜 郭丽 +4 位作者 凌翎 卢日峰 王建辉 尹飞 范洪学 《中国康复理论与实践》 CSCD 2005年第1期13-15,共3页
目的探讨骨髓间充质干细胞 (MSCs)治疗皮肤深Ⅱ度烧伤的机制。方法体外培养扩增的MSCs悬液 ,以 2× 10 6/ml(A组 )和 2× 10 7/ml(B组 )两种细胞密度移植给皮肤深Ⅱ度烧的受体鼠创面 ,观察创面愈合速度 ,用免疫组织化学检测因... 目的探讨骨髓间充质干细胞 (MSCs)治疗皮肤深Ⅱ度烧伤的机制。方法体外培养扩增的MSCs悬液 ,以 2× 10 6/ml(A组 )和 2× 10 7/ml(B组 )两种细胞密度移植给皮肤深Ⅱ度烧的受体鼠创面 ,观察创面愈合速度 ,用免疫组织化学检测因子Ⅷ的表达。细胞移植后的第 15、3 0、5 0天 ,通过PCR方法检测创面皮肤组织中移植供体鼠的Y染色体基因表达。结果A、B组治疗侧的创面愈合速度均快于对照侧 ,A、B组治疗侧间无显著性差异。因子Ⅷ检测示第 15、3 0天时 ,A、B两组的微血管密度均多于对照侧 ,A、B组治疗侧间无显著性差异。PCR检测结果表明 ,第 15、3 0、5 0天时在部分受体鼠恢复的创面上有供体鼠Y染色体基因表达。结论骨髓MSCs对皮肤深Ⅱ度烧伤具有明显的疗效。 展开更多
关键词 骨髓充质干细胞 皮肤烧伤 细胞移植 治疗 豚鼠
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自体骨髓间充质干细胞移植促进缺血下肢血管新生的实验研究 被引量:13
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作者 黄蓉 梁瑜祯 卢炳丰 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第7期706-710,共5页
目的干细胞移植是治疗下肢缺血性疾病的新方向。文中探讨自体骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)移植对下肢缺血的治疗作用。方法 12只新西兰兔被构建成左下肢缺血模型并随机分成对照组和治疗组,对照组于缺... 目的干细胞移植是治疗下肢缺血性疾病的新方向。文中探讨自体骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)移植对下肢缺血的治疗作用。方法 12只新西兰兔被构建成左下肢缺血模型并随机分成对照组和治疗组,对照组于缺血局部肌内注射DMEM培养基,治疗组注射体外扩增的自体BM-MSCs悬液。移植4周后,行双下肢CT动脉造影(CT angiography,CTA)、血流灌注(CT perfusion imaging,CTPI)及患肢石蜡切片HE染色。结果 1肢体缺血后的动态观察显示对照组2例出现不同程度表皮坏死、趾甲脱落,治疗组则未见坏死,且肌肉萎缩较轻。2CTA示治疗组侧支血管生成较对照组明显增多,且与已有的血管相互连接形成侧支血管网。3CTPI示治疗组血流灌注比对照组明显增加。4HE染色示治疗组毛细血管密度及毛细血管数/肌纤维数的比值均显著高于对照组[(6.500±1.049)个/HP vs(3.670±0.816)个/HP,(9.68±0.56)%vs(5.87±0.86)%,P<0.01]。2组均未见微小坏死灶,治疗组也未见血肿、骨样组织或纤维瘤形成。结论自体BM-MSCs移植可促进缺血下肢血管新生,可作为效治肢体缺血性疾病的一种有疗手段。 展开更多
关键词 骨髓充质干细胞 自体移植 血管新生 下肢缺血
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大鼠骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的实验研究 被引量:6
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作者 王海萍 张雷 +4 位作者 赵静 吴志刚 吕洋 王浩宇 邵素霞 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第2期209-213,共5页
目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对心肌梗死大鼠左心功能的影响以及在心肌病大鼠体内存活、分化的情况。方法结扎左冠状动脉前降支制备大鼠心肌梗死模型,采用同种异体大鼠BMSCs体外分离、纯化、扩增,胶体金标记。按照对BMSCs的处... 目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对心肌梗死大鼠左心功能的影响以及在心肌病大鼠体内存活、分化的情况。方法结扎左冠状动脉前降支制备大鼠心肌梗死模型,采用同种异体大鼠BMSCs体外分离、纯化、扩增,胶体金标记。按照对BMSCs的处理方式和心肌内注射的成分不同随机分为3组:A组接受BMSCs移植治疗;B组移植经5-氮胞苷体外诱导的BMSCs;C组列为对照组,注射等量培养基;每组12只。4周后通过血流动力学各项指标评价BMSCs移植对大鼠心功能的改善情况;免疫组织化学法检测移植细胞的存活和分化。结果与对照组C组相比,移植组A,B两组左心功能显著改善(P<0.01)。A,B两组之间无显著性差异。移植组左心室收缩压(LVSP)、左心室等容期压力最大变化速率(±dp/dtmax)明显高于对照组(P<0.01),左心室舒张末期压(LVEDP)明显低于对照组(P<0.01)。移植的BMSCs能在心外膜下、梗死区及与正常心肌的交界处存活并向心肌细胞分化,心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)和α-横纹肌肌动蛋白(α-sarcomeric actin)表达阳性。结论同种异体BMSCs移植入大鼠心肌梗死区后能明显改善心功能并向心肌细胞转化。 展开更多
关键词 骨髓充质干细胞 心肌梗死 细胞移植 心功能 大鼠
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不同剂量骨髓间充质干细胞移植对大鼠矽肺纤维化形成的影响 被引量:14
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作者 赵曼曼 崔建忠 +5 位作者 李冉 都凌杰 田艳霞 阚泉 张娟 高俊玲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2205-2210,共6页
目的:研究外源性骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大鼠矽肺纤维化的疗效,并探讨其量效关系。方法:体外分离、培养雄性5周龄SD大鼠BMSCs。将50只健康SD雌性大鼠随机分为5组:对照组、矽肺模型组、BMSCs治疗A组(1×109/L)、BMSCs治疗B组(... 目的:研究外源性骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大鼠矽肺纤维化的疗效,并探讨其量效关系。方法:体外分离、培养雄性5周龄SD大鼠BMSCs。将50只健康SD雌性大鼠随机分为5组:对照组、矽肺模型组、BMSCs治疗A组(1×109/L)、BMSCs治疗B组(3×109/L)和BMSCs治疗C组(5×109/L),每组10只。采用非暴露式气管插管一次性灌注二氧化硅(SiO2)粉尘混悬液法建立大鼠矽肺模型,并给予不同剂量BMSCs干预治疗,各组大鼠于21 d处死取材。采用HE染色和Masson染色观察肺组织形态学变化;免疫组织化学法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)和转化生长因子β(TGF-β)的定位和分布;免疫印迹法检测TNF-α、TGF-β、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的蛋白表达量;免疫荧光法检测性别决定区Y(SRY)蛋白证实BMSCs的归巢。结果:矽肺模型组较对照组大鼠有明显炎症细胞浸润、矽结节形成、胶原沉积等病理改变,BMSCs治疗A组较矽肺模型组病理改变有所缓解,BMSCs治疗B组病情缓解更加显著,但BMSCs治疗C组较矽肺模型组病理改变加重。大鼠肺组织TNF-α、TGF-β、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的情况:BMSCs治疗C组>矽肺模型组>BMSCs治疗A组>BMSCs治疗B组>对照组,除BMSCs治疗C组与矽肺模型组比较差异无统计学意义外(P>0.05),其它各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。激光扫描共聚焦显微镜观察到BMSCs治疗B组大鼠肺组织中SRY阳性表达,心、肝、脾、肾组织中未见明显表达。结论:外源性BMSCs移植对大鼠矽肺纤维化有一定的拮抗作用,并且存在剂量-效应关系。 展开更多
关键词 矽肺 骨髓充质干细胞 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原 肿瘤坏死因子α 转化生长因子Β
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骨髓间充质干细胞移植对缺血再灌注大鼠脑神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响 被引量:10
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作者 黄月 许予明 +1 位作者 宋波 方树友 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第5期862-864,共3页
目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对缺血再灌注大鼠脑组织神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法:SD大鼠84只,随机分为假手术组(n=12)、模型组(n=24)、磷酸盐缓冲液(PBS)组(n=24)和MSCs组(n=24)。模型组、PBS组和MSCs组采... 目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对缺血再灌注大鼠脑组织神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法:SD大鼠84只,随机分为假手术组(n=12)、模型组(n=24)、磷酸盐缓冲液(PBS)组(n=24)和MSCs组(n=24)。模型组、PBS组和MSCs组采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血模型,假手术组除不插尼龙线外,其余步骤相同。PBS组和MSCs组分别于建模成功后24h分别经颈动脉注入等体积的PBS液和已制备好的同种异体MSCs悬液。每组于脑缺血2h再灌注2d、4d、6d、8d时行神经功能缺损评分及脑灌注固定取材,采用免疫组化染色及TUNEL检测脑组织Bcl-2、Bax蛋白的表达及凋亡细胞数。结果:假手术组在各时间点神经功能评分为0分,无神经功能缺损,未见细胞凋亡,未见Bcl-2和Bax表达。与模型组和PBS组比较,脑缺血2h再灌注4d开始,MSCs组神经细胞凋亡数、Bax蛋白表达和神经功能缺损评分较低,Bcl-2蛋白表达较高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:骨髓间充质干细胞移植能改善脑损伤大鼠的功能;上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,减少神经细胞凋亡,可能是其主要机制之一。 展开更多
关键词 骨髓充质干细胞 脑缺血 再灌注损伤 凋亡 BCL-2 BAX 大鼠
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