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骨髓间充质干细胞条件培养基对小鼠肺泡上皮细胞增殖的影响及机制 被引量：1
1
作者 周祉妤 昌建鈞 +2 位作者 候亚鹏 丁炎 聂宏光 《山东医药》 CAS 2018年第20期5-8,共4页
目的探讨骨髓间充质干细胞条件培养基(BMSCs-CM)对小鼠肺泡上皮细胞增殖的影响及机制。方法分离与培养小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),流式细胞仪检测细胞表面标记物示CD44阳性表达率为92.5%、CD34阴性表达率为97.3%,提示成功分离与培养BM... 目的探讨骨髓间充质干细胞条件培养基(BMSCs-CM)对小鼠肺泡上皮细胞增殖的影响及机制。方法分离与培养小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),流式细胞仪检测细胞表面标记物示CD44阳性表达率为92.5%、CD34阴性表达率为97.3%,提示成功分离与培养BMSCs,且纯度较高。当第2代细胞融合70%~80%时,提取BMSCs-CM。将人肺泡上皮细胞A549随机分为对照组、无血清组、BMSCs组、BMSCs-CM组。对照组以含10%血清的DMEM/F12培养基培养,无血清组以无血清的DMEM/F12培养基培养,BMSCs组加入已接种小鼠BMSCs的Transwell用无血清的DMEM/F12培养基共培养,BMSCs-CM组以获取的小鼠BMSCs-CM培养。培养24 h时,采用CCK-8法检测各组细胞相对存活率。将体外常规培养的肺泡Ⅱ型细胞(ATⅡ)随机分为对照组、BMSCs-CM组,对照组以无血清的DMEM/F12培养基培养24 h,BMSCs-CM组以获取的小鼠BMSCs-CM培养24 h,采用RT-PCR法检测钠通道蛋白α(α-ENa C)相对表达量。结果无血清组细胞相对存活率为(80.70±0.70)%,BMSCs组为(85.83±1.98)%,BMSCs-CM组为(91.28±1.91)%,BMSCs组与BMSCs-CM组均高于无血清组(P<0.05或<0.01)。对照组α-ENa C相对表达量为1.00±0.00,BMSCs-CM组为3.16±1.50,两组比较P<0.05。结论 BMSCs-CM可促进肺泡上皮细胞增殖,其作用机制可能与促进肺泡Ⅱ型细胞α-ENa C表达有关。 展开更多
关键词 肺泡上皮细胞 肺泡Ⅱ型细胞 骨髓间充质干细胞条件培养基 钠通道 钠通道蛋白α 小鼠
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骨髓间充质干细胞治疗早发性卵巢功能不全研究进展
2
作者 黄维维 徐哲昀 张治芬 《浙江临床医学》 2025年第2期306-308,共3页
早发性卵巢功能不全(POI),又称卵巢早衰,是指女性40岁之前出现卵巢功能部分或完全丧失[1]。主要症状包括月经异常、血清促性腺激素(FSH)水平升高以及雌激素水平下降。根据传统诊断标准,如果40岁以下的女性月经异常超过4个月,血清FSH水... 早发性卵巢功能不全(POI),又称卵巢早衰,是指女性40岁之前出现卵巢功能部分或完全丧失[1]。主要症状包括月经异常、血清促性腺激素(FSH)水平升高以及雌激素水平下降。根据传统诊断标准,如果40岁以下的女性月经异常超过4个月,血清FSH水平在间隔4周的两次检测中均>25 IU/L,可诊断为POI[2]。POI患者生育能力下降,同时由于雌激素水平降低,会出现一系列绝经相关症状,如潮热、盗汗、失眠、阴道干涩、焦虑和抑郁等。此外,患者还面临骨质疏松和心血管疾病风险,甚至出现神经退行性变化,如老年性痴呆等[3]。间充质干细胞(MSCs)因其强大的再生能力、免疫调节、抗炎抗氧化应激、组织修复等功能,在再生医学领域被视为一种可行的替代方案[4]。本文将综述骨髓来源间充质干细胞治疗POI的研究数据及其可能的治疗机制,旨在为POI的后续研究提供依据。 展开更多
关键词 月经异常 治疗机制 阴道干涩 骨髓间充质干细胞 老年性痴呆 早发性 卵巢早衰 骨质疏松
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骨髓间充质干细胞移植术对蛛网膜下腔出血脑损伤的防治效果研究
3
作者 伏帅 赵威 《中国医学工程》 2025年第2期49-53,共5页
目的 观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植术对蛛网膜下腔出血(SAH)患者脑损伤的防治效果。方法 该次研究为前瞻性研究,选取2021年12月至2023年12月期间河南科技大学第二附属医院收治的108例SAH患者为研究对象,采用计算机随机分组法将入组... 目的 观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植术对蛛网膜下腔出血(SAH)患者脑损伤的防治效果。方法 该次研究为前瞻性研究,选取2021年12月至2023年12月期间河南科技大学第二附属医院收治的108例SAH患者为研究对象,采用计算机随机分组法将入组患者分别列为常规组(54例)和BMSCs组(54例),常规组予以常规治疗,BMSCs组采用BMSCs移植术辅助治疗,比较两组患者的血管内皮功能、氧化应激指标、神经功能及预后情况。结果 在不同治疗方案下,BMSCs组治疗1 d、3 d、5 d、7 d后的内皮素-1 (ET-1)水平分别为(60.23±10.45) ng/L、(54.49±10.27) ng/L、(48.66±10.37)ng/L、(42.19±10.25)ng/L,均低于常规组[(65.44±10.22)ng/L、(59.65±10.37)ng/L、(53.25±10.41)ng/L、(47.62±10.38) ng/L](P<0.05);一氧化氮(NO)水平分别为(45.22±10.25)μmol/L、(52.38±10.41)μmol/L、(58.25±10.33)μmol/L、(64.33±10.41)μmol/L,均高于常规组[(40.39±10.44)μmol/L、(47.65±10.23)μmol/L、(53.41±10.32)μmol/L、(59.44±10.21)μmol/L](P<0.05);BMSCs组的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)分别为(85.45±10.23) U/mL、(135.29±20.36) U/L,均高于常规组[(80.25±10.41) U/mL、(120.44±20.39) U/L],丙二醛(MDA)[(5.36±1.29) nmol/L]低于常规组[(6.22±1.65) nmol/L](P<0.05);BMSCs组的半乳糖凝集素3 (Galectin-3)、粒细胞巨噬细胞-集落刺激因子(GM-CSF)、神经肽Y (NPY)分别为(5.35±1.22)μg/L、(8.31±1.55)×10~3/mm^(3)、(187.66±20.41) pg/mL,均低于常规组[(6.28±1.44)μg/L、(10.41±2.36)×10~3/mm^(3)、(201.45±20.47) pg/mL](P<0.05);BMSCs组的格拉斯哥预后指数(GOS)[(4.52±1.36)分]高于常规组[(3.77±0.82)分],改良Fisher量表(mFS)评分[(1.44±0.23)分]低于常规组[(2.25±0.79)分](P<0.05)。结论 BMSCs移植术能减轻SAH患者的血管内皮损伤及氧化应激损伤,对促进患者神经功能恢复、避免继发脑损伤并改善患者预后情况均有积极意义。 展开更多
关键词 蛛网膜下腔出血 骨髓间充质干细胞移植 血管内皮功能 脑损伤 预后情况
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黄芪影响缺氧微环境中骨髓间充质干细胞增殖活性的PI3K-AKT信号通路分析 被引量：2
4
作者 田启会 张亮 龙亚丽 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期346-354,共9页
基于PI3K/AKT信号通路研究黄芪对缺氧环境中骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的细胞活性的影响。分别以黄芪冻干粉溶液低、中、高剂量(100、200和300μg·mL^(-1))干预低氧浓度(10%)环境中成骨... 基于PI3K/AKT信号通路研究黄芪对缺氧环境中骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的细胞活性的影响。分别以黄芪冻干粉溶液低、中、高剂量(100、200和300μg·mL^(-1))干预低氧浓度(10%)环境中成骨分化培养的BMSCs,通过高内涵实时成像系统观察BMSCs动态增殖情况及分化代数;进行无标记示踪模拟细胞运动轨迹,分析各组细胞运动速度、位移距离和路程的情况;通过激光共聚焦显微镜观察细胞线粒体膜电位,通过免疫荧光和RT-PCR检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白和基因表达水平的变化。结果显示:与对照组相比,10%低氧浓度条件下BMSCs增殖减慢、分化代数减少,运动速度减慢,位移距离和路程减少,线粒体膜电位活性降低,p-PI3K、p-AKT蛋白表达降低,PI3K和AKT基因表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.01);与低氧组相比,黄芪冻干粉溶液干预后,能显著维持缺氧环境中BMSCs增殖和分化活性,运动活力升高,线粒体膜电位活性提高,p-JAK2、p-STAT3蛋白和PI3K、AKT基因表达升高,差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。黄芪可能通过激活PI3K/AKT信号通路维持缺氧条件下BMSCs的增殖活性。 展开更多
关键词 缺氧 骨髓间充质干细胞 黄芪 增殖活性 PI3K/AKT信号通路
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大鼠骨髓间充质干细胞在海马神经元培养基中的定向分化 被引量：2
5
作者 李朝晖 蔡志平 +4 位作者 崔慧先 朱劲松 李莎 解国圣 薛磊 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期353-356,共4页
目的：观察大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）在大鼠海马神经元条件培养液中向神经元的分化。方法：以回收的海马神经元Neurobasal加B27作为条件培养基，DMEM加bFGF作为无血清培养基，普通Neurobasal加B27作为神经元基础培养基分别诱导第5... 目的：观察大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）在大鼠海马神经元条件培养液中向神经元的分化。方法：以回收的海马神经元Neurobasal加B27作为条件培养基，DMEM加bFGF作为无血清培养基，普通Neurobasal加B27作为神经元基础培养基分别诱导第5代BMSCs12h和24h；免疫细胞化学显色方法鉴定各组神经元样细胞，计数和比较各组阳性细胞阳性率。结果：经海马神经元条件培养基诱导，大鼠BMSCs能够分化为神经元样细胞，免疫细胞化学显色呈微管相关蛋白－II（MAP—II）和神经元特异性烯醇化酶（NSE）阳性；且阳性比例明显高于其他实验组，差异有统计学意义。结论：BMSCs在海马神经元条件培养基中可以分化为神经元样细胞，其分化效果优于传统DMEM加bFGF无血清培养基和神经元基础培养基。 展开更多
关键词 海马神经元 骨髓间充质干细胞 神经元样细胞 神经元基础培养基 无血清培养基
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人脐带血间充质干细胞条件培养基在白血病患儿口腔黏膜炎中的疗效观察 被引量：5
6
作者 门倩倩 曹秀艳 +1 位作者 卢伟 吴南海 《护士进修杂志》 2017年第3期257-259,共3页
目的探讨人脐带血间充质干细胞条件培养基在白血病患儿口腔黏膜炎中的临床疗效。方法 2015年1-12月收治的白血病患儿312例,共发生口腔黏膜炎124例,随机分为两组,每组62例。对照组采用生理盐水漱口后,在溃疡面涂抹外用重组人粒细胞巨噬... 目的探讨人脐带血间充质干细胞条件培养基在白血病患儿口腔黏膜炎中的临床疗效。方法 2015年1-12月收治的白血病患儿312例,共发生口腔黏膜炎124例,随机分为两组,每组62例。对照组采用生理盐水漱口后,在溃疡面涂抹外用重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子凝胶(金扶宁rhGM-CSF);观察组采用生理盐水漱口后,在溃疡面涂抹人脐带血间充质干细胞培养基(hUCB-MSC-CM)。观察两组患儿口腔创面愈合时间及愈合率。结果观察组口腔创面愈合时间5~14d,愈合率91.9%;对照组口腔创面愈合时间5~14d,愈合率67.7%,观察组明显优于对照组(P<0.05)。结论人脐带血间充质干细胞培养基在白血病患儿口腔黏膜炎中疗效显著。 展开更多
关键词 人脐带血间充质干细胞条件培养基 白血病患儿 口腔黏膜炎 护理
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基于间充质干细胞的无细胞疗法治疗马骨关节炎的研究进展
7
作者 贾雨辰 蒋辉 +2 位作者 兰芯儿 李靖 朱怡平 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第4期1924-1931,共8页
骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种造成马运动功能障碍的慢性退行性关节疾病。近年来,关节内注射间充质干细胞(mesenchymal stromal cell,MSC)及其衍生物成为治疗马OA的潜在手段。基于MSC的无细胞疗法是分离MSC分泌的生物活性物质后将... 骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种造成马运动功能障碍的慢性退行性关节疾病。近年来,关节内注射间充质干细胞(mesenchymal stromal cell,MSC)及其衍生物成为治疗马OA的潜在手段。基于MSC的无细胞疗法是分离MSC分泌的生物活性物质后将其作为制剂替代MSC的治疗方法,目前主要制剂包括间充质干细胞条件培养基(mesenchymal stromal cell condition medium,MSC-CM)和细胞外囊泡(extracellular vesicle,EV),理论上具有更低的免疫原性和致癌风险,显示出巨大的应用潜力。由于制备过程中的组织来源、分离程序、培养条件和保存条件等会影响MSC的分泌成分和治疗效果,有必要进一步针对OA治疗优化出更加成熟可靠的制备流程。目前认为MSC无细胞疗法对OA的可能治疗机制为MSC分泌的各种生物活性因子激活或抑制细胞通路发挥免疫调节功能、抑制软骨细胞凋亡、促进软骨和基质的修复与合成、抑制基质分解代谢。近年来关于MSC无细胞疗法治疗马OA的研究大多停留在体外细胞层面研究,但研究发现,MSC无细胞疗法对软骨细胞具有抗炎和促生长的效果,这表明MSC无细胞疗法在治疗马OA方面具有应用潜力。笔者对MSC无细胞疗法的制剂制备、治疗机制、应用潜力等方面进行了综述,以期为其未来的研究和临床应用提供参考。 展开更多
关键词 间充质干细胞 无细胞疗法 马骨关节炎 细胞外囊泡 间充质干细胞条件培养基
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A549肺癌细胞条件培养液促进人骨髓间充质干细胞的增殖和迁移 被引量：1
8
作者 姜杨 王璐璐 +6 位作者 金海峰 姚立杰 张嵩 刘丹阳 李永涛 张善强 沈雷 《解剖学杂志》 CAS 2021年第1期13-17,共5页
目的:探讨A549肺癌细胞对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)增殖和运动的影响。方法:以提取A549肺癌细胞和BEAS-2B正常人肺上皮细胞上清液制备条件培养基,培养的hBMSCs分别为A549组和BEAS-2B组;2组均添50 nmol/L趋化因子-8(CXCL-8),分别为A54... 目的:探讨A549肺癌细胞对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)增殖和运动的影响。方法:以提取A549肺癌细胞和BEAS-2B正常人肺上皮细胞上清液制备条件培养基,培养的hBMSCs分别为A549组和BEAS-2B组;2组均添50 nmol/L趋化因子-8(CXCL-8),分别为A549 C组和BEAS-2B C组,若同时添加100 nmol/L triciribine(Akt抑制剂)分别为A549 CT组和BEAS-2B CT组;A549组加入100 nmol/L triciribine为A549 T组。正常条件下培养的hBMSCs为对照组。ELISA检测细胞上清液中CXCL-8含量和hBMSCs裂解液Akt、P-Akt蛋白的表达。MTT实验、流式细胞仪和transwell细胞小室实验分别检测各组hBMSCs吸光度值(A490值)、细胞凋亡率和细胞迁移数目。结果:与BEAS-2B上清液相比,A549上清液中CXCL-8含量明显升高。各组hBMSCs的A490值、细胞凋亡率、细胞迁移数目、Akt和P-Akt蛋白表达等均具有显著差异,尤以A549 C组hBMSCs最明显。与A549 C组相比,A549 CT组hBMSCs的A490值和细胞迁移数目、Akt和P-Akt蛋白表达均降低,细胞凋亡率升高较显著。结论:A549细胞表达的CXCL-8能激活Akt通路,促进hBMSCs增殖和运动。 展开更多
关键词 趋化因子-8 人骨髓间充质干细胞 AKT信号通路 细胞迁移
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骨髓间充质干细胞对骨关节炎大鼠软骨损伤的影响及机制研究
9
作者 张锤 张坤娟 +3 位作者 刘冰 尹乃宁 孙飞虎 郝康 《成都医学院学报》 CAS 2024年第5期774-778,共5页
目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对骨关节炎(OA)大鼠软骨损伤的影响及其机制。方法大鼠膝关节腔内注射木瓜蛋白酶构建OA模型,将构建成功的20只OA大鼠按照随机数字表法分为OA组和治疗组,每组10只;同时将膝关节腔内注射等量生理盐水的10... 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对骨关节炎(OA)大鼠软骨损伤的影响及其机制。方法大鼠膝关节腔内注射木瓜蛋白酶构建OA模型,将构建成功的20只OA大鼠按照随机数字表法分为OA组和治疗组,每组10只;同时将膝关节腔内注射等量生理盐水的10只大鼠作为对照组。HE染色观察大鼠膝关节软骨损伤,Mankin's评分法评估膝关节软骨病理损伤程度,缚线法检测大鼠膝关节肿胀度,医用测角尺检测大鼠膝关节被动活动度,流式细胞仪检测大鼠脾脏辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)比例,生化试剂盒检测大鼠血清中白细胞介素-17(IL-17)含量和软骨组织中丙二醛(MDA)、Fe2+含量,蛋白质印迹法检测软骨组织中乳酸脱氢酶A(LDHA)、己糖激酶2(HK2)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达水平。结果与对照组比较,OA组和治疗组大鼠膝关节软骨组织Mankin's评分、膝关节肿胀度、Th17细胞比例、Th17/Treg比值、血清IL-17含量和软骨组织中Fe2+含量、MDA含量及LDHA、HK2、PKM2、ACSL4蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);膝关节被动活动度、Treg细胞比例和软骨组织中GPX4蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与OA组比较,治疗组大鼠膝关节软骨组织Mankin's评分、膝关节肿胀度、Th17细胞比例、Th17/Treg比值、血清IL-17含量和软骨组织中Fe2+含量、MDA含量及LDHA、HK2、PKM2、ACSL4蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);膝关节被动活动度、Treg细胞比例和软骨组织中GPX4蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。结论BMSCs治疗可明显改善OA大鼠软骨损伤,其作用机制可能与改善Th17/Treg细胞平衡和软骨糖酵解、铁死亡有关。 展开更多
关键词 骨关节炎 骨髓间充质干细胞 软骨损伤
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脂肪来源间充质干细胞条件培养基对小型猪腹腔镜肝损伤氧化应激反应的影响 被引量：1
10
作者 焦智慧 张千振 +6 位作者 王月 刘涛 刘博洋 马亚军 刘笑凝 朴晨曦 王洪斌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1734-1743,共10页
旨在探究脂肪来源间充质干细胞条件培养基(adipose-derived mesenchymal stem cells-conditioned medium,ADSCs-CM)对小型猪肝损伤氧化应激反应的影响,作者选取24头健康小型猪,随机分为4组,每组6只,分别为模型组(IRI)、DMEM对照组(DMEM)... 旨在探究脂肪来源间充质干细胞条件培养基(adipose-derived mesenchymal stem cells-conditioned medium,ADSCs-CM)对小型猪肝损伤氧化应激反应的影响,作者选取24头健康小型猪,随机分为4组,每组6只,分别为模型组(IRI)、DMEM对照组(DMEM)、ADSCs-CM治疗组(CM)和ADSCs治疗组(ADSCs)。4组均通过腹腔镜技术建立小型猪肝缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)合并部分肝切除的肝损伤模型,IRI组移植生理盐水,DMEM组移植浓缩的基础培养基,CM组移植浓缩的脂肪来源间充质干细胞培养基,ADSCs组移植脂肪间充质干细胞。各组分别于术前、术后1、3、7 d采集血液与肝组织样本,使用肝功能检测试剂盒对血清中总胆红素(T-BIL)、乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白(TP)进行检测;使用氧化应激检测试剂盒对肝组织中丙二醛(MDA)、髓内过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)进行检测。结果显示:术后1、3 d:模型组和对照组肝功能严重损伤,发生明显氧化应激反应,CM和ADSCs治疗组显著促进肝功能的恢复,且氧化应激相应指标较模型组和对照组表达明显下降。术后7 d,各组基本恢复到术前水平。结果显示:腹腔镜肝缺血再灌注合并肝部分切除损伤可致小型猪发生氧化应激反应,脂肪来源间充质干细胞及其条件培养基均可改善肝损伤后的氧化应激反应。 展开更多
关键词 小型猪 腹腔镜 肝缺血再灌注合并部分肝切除损伤 脂肪间充质干细胞条件培养基 氧化应激
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骨痹通消颗粒对激素型股骨头坏死人骨髓间充质干细胞成骨与成脂分化的影响 被引量：1
11
作者 王壮壮 周正新 +5 位作者 朱磊 朱彩玉 顾一帆 李子鹏 陈少奇 李胜 《中国医药导报》 CAS 2024年第3期28-33,39,共7页
目的 探究骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死人骨髓间充质干细胞(h BMMSC)成骨与成脂分化的影响。方法 取激素性股骨头坏死患者骨髓,体外进行h BMMSC的培养,通过细胞形态学观察、成骨及成脂分化潜能来鉴定h BMMSC。以完培组(基础培养基+10... 目的 探究骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死人骨髓间充质干细胞(h BMMSC)成骨与成脂分化的影响。方法 取激素性股骨头坏死患者骨髓,体外进行h BMMSC的培养,通过细胞形态学观察、成骨及成脂分化潜能来鉴定h BMMSC。以完培组(基础培养基+10%的胎牛血清)作为对照,采用CCK-8法测定1%、2%、5%、8%、10%体积分数的骨痹通消含药血清A组作用24 h后对细胞增殖的影响。细胞在96孔板的培养过程中,每孔加入地塞米松溶液0.52μl,以完培组(基础培养基+10%的胎牛血清)和损伤组(基础培养组+10%的胎牛血清+0.52μl地塞米松溶液)作为对照,采用CCK-8法测定2%、5%、8%体积分数的骨痹通消含药血清B组对激素环境中细胞活力的影响。以无激素诱导细胞作为对照组(基础培养基+10%的胎牛血清),将体外激素诱导的h BMMSC细胞分为模型组(基础培养基+10%的胎牛血清+10-5mol/L地塞米松溶液)、实验组(基础培养基+5%的骨痹通消含药血清+10-5mol/L地塞米松溶液)。茜素红染色试剂盒测定各组成骨分化后矿化结节的形成;油红O染色试剂盒测定各组成脂分化后脂滴的形成;RT-q PCR测定成脂相关标志基因PPARγ、C/EBP-α与Fabp4中m RNA的表达,Western blot检测成骨相关蛋白BMP-2、Runx2及β-catenin的蛋白表达含量。结果 原代细胞培养7 d后,可见梭形、纺锤形或多角形的贴壁细胞。第三代细胞生长均匀,平行排列,透光率好。成骨诱导21 d,细胞发生改变,局部细胞聚集,并有矿化结节产生,茜素红染色呈阳性;成脂诱导21 d,脂滴与油红O染液结合变为红色,油红O染色呈阳性。与完培组比较,10%体积分数的含药血清A组细胞活力下降(P<0.05)。与完培组比较,损伤组细胞活力下降(P<0.05);与损伤组比较,2%、5%、8%体积分数的含药血清B组细胞活力升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组染色面积降低(P<0.05);与模型组比较,实验组中矿化结节与沉积升高,染色范围也更广(P<0.05)。与对照组比较,模型组细胞内脂质积累增多(P<0.05);与模型组比较,实验组较细胞内脂质积累降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组PPARγ、C/EBP-α和Fabp4的表达量升高(P<0.01),与模型组比较,实验组PPARγ、C/EBP-α和Fabp4的表达量降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组BMP-2、Runx2及β-catenin蛋白表达含量升高(P<0.01),与模型组比较,实验组BMP-2、Runx2及β-catenin蛋白表达含量降低(P<0.05)。结论 骨痹通消颗粒能够促进激素性股骨头坏死h BMMSC的增殖及其向成骨分化的能力,抑制成脂分化,为临床上防治激素性股骨头坏死提供了理论基础。 展开更多
关键词 激素性股骨头坏死 人骨髓间充质干细胞 成骨分化 成脂分化
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补肾中药调控骨髓间充质干细胞防治多发性硬化的机制探索 被引量：1
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作者 李春雨 王蕾 《环球中医药》 CAS 2024年第9期1713-1718,共6页
髓鞘再生障碍是脱髓鞘疾病如多发性硬化(multiple sclerosis,MS)的重要病理环节,而中医药具有促进髓鞘再生的潜在优势。中医学认为,肾藏精,精化髓,髓上行充脑。MS患者的基本病机为肾精亏虚,脑髓失养,损伤的轴突再髓鞘化困难,从而导致神... 髓鞘再生障碍是脱髓鞘疾病如多发性硬化(multiple sclerosis,MS)的重要病理环节,而中医药具有促进髓鞘再生的潜在优势。中医学认为,肾藏精,精化髓,髓上行充脑。MS患者的基本病机为肾精亏虚,脑髓失养,损伤的轴突再髓鞘化困难,从而导致神经功能障碍。因此补肾生髓为其根本治法,补肾中药治疗MS疗效显著。研究发现,骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)是一类具有强大分化潜能的多能干细胞,其分泌的外泌体可透过血脑屏障,其功能特点与中医肾藏精主骨生髓充脑的理论具有高度相关性,且BMSCs对MS也有良好的治疗作用。研究还证实,补肾中药可促进BMSCs增殖分化、定向迁移和调节自噬与凋亡。因此推测补肾中药调控BMSCs可能是其防治MS的机制之一。本研究为中医药防治MS等脱髓鞘疾病提供了新思路。 展开更多
关键词 多发性硬化 肾主骨生髓充脑 骨髓间充质干细胞 补肾中药 髓鞘再生 机制
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间充质干细胞条件培养基中的分泌因子与牙周组织再生研究进展 被引量：1
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作者 周雪纯 孙新华 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期595-597,共3页
牙周炎是导致成年人牙齿缺失的最主要原因,理想的治疗目标是重建缺损的牙周组织,恢复牙齿的功能。近年来研究发现,干细胞诱导组织再生的能力来源于其旁分泌特性,其分泌的各种生物活性因子存在于间充质干细胞条件培养基(MSC-CM)中,发挥... 牙周炎是导致成年人牙齿缺失的最主要原因,理想的治疗目标是重建缺损的牙周组织,恢复牙齿的功能。近年来研究发现,干细胞诱导组织再生的能力来源于其旁分泌特性,其分泌的各种生物活性因子存在于间充质干细胞条件培养基(MSC-CM)中,发挥免疫调节和抗炎活性,调控细胞的迁移、增殖及分化,促进血管新生及牙周组织的修复。本文探讨了MSC-CM的基本概念及其应用于牙周组织再生方面的研究进展。 展开更多
关键词 间充质干细胞 条件培养基 牙周组织再生
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大鼠骨髓间充质干细胞分离培养及其形态观察 被引量：14
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作者 康新勤 臧伟进 +2 位作者 宋土生 于晓江 曾菊绒 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期518-519,共2页
目的　分离和培养大鼠骨髓组织中的间充质干细胞 ,并观察其生长形态。方法　利用造血干细胞和骨髓间充质干细胞不同生长特性 ,采用贴壁法分离并用含 15 % (体积分数 )FBS的低糖型DMEM培养基培养。结果　分离培养得到的细胞中随着换液次... 目的　分离和培养大鼠骨髓组织中的间充质干细胞 ,并观察其生长形态。方法　利用造血干细胞和骨髓间充质干细胞不同生长特性 ,采用贴壁法分离并用含 15 % (体积分数 )FBS的低糖型DMEM培养基培养。结果　分离培养得到的细胞中随着换液次数的增加红细胞和造血细胞逐渐减少 ;骨髓组织中贴壁得到间充质干细胞呈梭形、纺锤形和多角形。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 分离 培养 形态
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镍钛记忆合金表面处理与骨髓间充质干细胞体外培养的生物相容性评价 被引量：17
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作者 夏亚一 王天民 +5 位作者 李波 达国祖 孙正义 张钦 吴萌 程峰 《中国生物医学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第1期54-58,共5页
目的 :评价镍钛记忆合金表面不同方法处理后的生物相容性。方法 :镍钛形态记忆合金表面氮化钛、类金刚石处理后 ,选择不同方法表面处理试验片 6 0个 (10mm× 5mm× 1mm) ,与骨髓间充质干细胞体外共同培养 ,观察1d、5d、8d培养... 目的 :评价镍钛记忆合金表面不同方法处理后的生物相容性。方法 :镍钛形态记忆合金表面氮化钛、类金刚石处理后 ,选择不同方法表面处理试验片 6 0个 (10mm× 5mm× 1mm) ,与骨髓间充质干细胞体外共同培养 ,观察1d、5d、8d培养液中镍离子的释放量、培养液中的羟脯氨酸和碱性磷酸酶含量 ,观察细胞生长情况 ,并进行组织免疫学染色观察细胞内蛋白质含量。结果 :细胞计数第 1d各组间无明显差异 ,第 5d、8d类金刚石及氮化钛组细胞数较镍钛合金组明显增多 (P <0 0 5 )。镍离子释放浓度氮化钛组、类金刚石组与与镍钛记忆合金组之间有差异 (P <0 0 1)。细胞内嗜银蛋白染色光镜下观察类金刚石及氮化钛组核内黑色颗粒较镍钛合金组多并且颗粒较大 ,与镍钛合金组有显著性差异 (p <0 0 5 )。镍钛合金组与类金刚石组细胞培养液中羟脯氨酸含量在第 5d、8d明显较第 1d降低 ,但氮化钛组羟脯氨酸含量逐渐增高 ,与其他两组比较有差异 (p<0 0 5 )。第 5d、8d碱性磷酸酶水平明显下降 ,但氮化钛组与其他组比较有统计学差异 (p <0 0 5 )。第 1d、5d、8d的细胞爬片行转化生长因子 β1免疫组织化学染色光镜下细胞胞浆出现棕色颗粒 ,图像分析仪测灰度值 ,各组间无明显差异 (p >0 0 5 )。结论 :氮化钛表面处理后镍钛记忆合金? 展开更多
关键词 镍钛记忆合金 生物相容性 骨髓间充质干细胞 表面处理
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大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及GFP转染标记 被引量：10
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作者 王亭忠 马爱群 +2 位作者 蒋文慧 徐正云 席雨涛 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期431-434,共4页
目的建立大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离和培养方法,检测绿色荧光蛋白基因转染MSCs的瞬时表达及转染效率.方法应用Percoll密度梯度离心法分离大鼠MSCs,贴壁法不断纯化,流式细胞仪检测2代细胞表面CD34、CD71和CD90的表达,然后用pEGFP... 目的建立大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离和培养方法,检测绿色荧光蛋白基因转染MSCs的瞬时表达及转染效率.方法应用Percoll密度梯度离心法分离大鼠MSCs,贴壁法不断纯化,流式细胞仪检测2代细胞表面CD34、CD71和CD90的表达,然后用pEGFP-N3与Lipofectamine 2000不同浓度比例转染MSCs,荧光倒置显微镜下观察瞬时表达及转染效率.结果①原代MSCs多呈纺锤形或梭形,有聚集生长的倾向,多3～5个细胞成为一个集落.传代后,细胞变为形态均一的排列有序的成纤维细胞样,长梭形,胞浆突起较少,胞体轮廓不甚清晰,胞体也相对较大;②GFP转染后24 h即可见绿色荧光蛋白表达,72 h表达最强,此后逐渐减弱,到4周时仍可见少量表达;③转染效率与质粒和脂质体的浓度比例有关,1:2到1:3最高.结论利用Percoll密度梯度离心法结合贴壁法可以获得比较纯的MSCs;GFP转染是一种较好的MSCs标记方法. 展开更多
关键词 大鼠 骨髓间充质干细胞 培养 绿色荧光蛋白 转染
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成年大鼠骨髓间充质干细胞的体外培养及生物学特性 被引量：9
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作者 郑健樑 杨玉霞 +2 位作者 张平 林健贤 张文忻 《国际眼科杂志》 CAS 2006年第3期562-564,共3页
目的:探讨成年大鼠的骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离、体外培养方法,为其应用提供大量种子细胞。方法:用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓MSCs,传代扩增,对细胞进行免疫组化染色鉴定。结果:取得较高纯度的成体大鼠骨髓MSCs,... 目的:探讨成年大鼠的骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离、体外培养方法,为其应用提供大量种子细胞。方法:用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓MSCs,传代扩增,对细胞进行免疫组化染色鉴定。结果:取得较高纯度的成体大鼠骨髓MSCs,并保持细胞的活性;成体大鼠骨髓MSCs在体外培养中为贴壁生长,培养3～4d后开始大量增殖,并形成星形、梭形的细胞增殖集群,对分离后所获得的细胞进行免疫组化染色,细胞CD44,FN均阳性,CD34,CD31均阴性。结论:采用密度梯度离心结合贴壁培养法可获得较高纯度的MSCs,是实用、便捷和可行的方法。 展开更多
关键词 间充质干细胞 细胞培养 骨髓 大鼠
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蒙古马骨髓间充质干细胞的分离培养及多向分化潜能的研究 被引量：8
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作者 张焱如 刘宗正 +3 位作者 韦林盖 苏小虎 赵一萍 芒来 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1357-1361,共5页
旨在探索一个高效分离和扩增蒙古马骨髓间充质干细胞的方法,并通过形态学和多向分化能力进行鉴定。抽取蒙古马骨髓标本,利用密度梯度离心和差异贴壁法分离MSCs,体外扩增后传代,进行相差显微镜形态学观察。在地塞米松、IBMX、胰岛素及罗... 旨在探索一个高效分离和扩增蒙古马骨髓间充质干细胞的方法,并通过形态学和多向分化能力进行鉴定。抽取蒙古马骨髓标本,利用密度梯度离心和差异贴壁法分离MSCs,体外扩增后传代,进行相差显微镜形态学观察。在地塞米松、IBMX、胰岛素及罗格列酮的作用下向脂肪细胞诱导分化,以及在地塞米松、VitC、β-磷酸甘油等作用下向成骨细胞诱导分化。结果显示原代和传代细胞呈梭形成纤维细胞样外观,生长增殖能力良好。经定向诱导分化后,细胞分别呈现脂肪细胞、成骨细胞的表型特征。证明所纯化的细胞为尚未分化的基质细胞,而不是组织的成体细胞,它具有多向分化潜能。 展开更多
关键词 蒙古马 骨髓间充质干细胞 细胞培养 细胞分化
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SD大鼠骨髓间充质干细胞的体外培养及表型、纯度鉴定 被引量：9
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作者 陈凯 康现江 +2 位作者 张平 穆淑梅 郭明申 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第11期34-36,共3页
目的探索获得高纯度MSCs简单、系统的实验方法。方法采用贴壁培养法体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs），确定最佳接种密度，经数次传代后纯化，以表面抗原CD29、CD44作为标志分子，CD34作为阴性对照，免疫荧光法鉴定MSCs的生物学... 目的探索获得高纯度MSCs简单、系统的实验方法。方法采用贴壁培养法体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs），确定最佳接种密度，经数次传代后纯化，以表面抗原CD29、CD44作为标志分子，CD34作为阴性对照，免疫荧光法鉴定MSCs的生物学特性及纯度。结果以0．5—1×10^10个／L的细胞密度接种骨髓细胞原代培养时间明显缩短，免疫荧光法鉴定MSCs生物学特性好，第3代时已达较高纯度。结论本实验建立了较为理想的MSCs体外培养体系，纯化速度快，鉴定方法简单，为进一步研究MSCs生物学行为及临床应用奠定了基础。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 细胞培养 大鼠
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人骨髓间充质干细胞体外培养及鉴定 被引量：12
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作者 梁雪 粟永萍 +5 位作者 孔佩艳 陈幸华 彭贤贵 徐辉 曾东风 艾国平 《医学研究生学报》 CAS 2007年第5期459-462,466,I0001,共6页
目的:体外分离、培养、鉴定人骨髓间充质干细胞(hBMSC)。方法:利用密度梯度离心法分离出人骨髓单个核细胞(MNC),通过贴壁筛选法建立hBMSC的体外培养体系,并通过一系列检测方法对所培养的细胞进行鉴定。结果:细胞主要呈“成纤维样”,但... 目的:体外分离、培养、鉴定人骨髓间充质干细胞(hBMSC)。方法:利用密度梯度离心法分离出人骨髓单个核细胞(MNC),通过贴壁筛选法建立hBMSC的体外培养体系,并通过一系列检测方法对所培养的细胞进行鉴定。结果:细胞主要呈“成纤维样”,但体积较大、形状不规则、细胞质突起多,细胞核大而疏松,核仁明显。流式细胞仪检测:CD34阳性率为2.09%、CD29阳性率为94.46%;CD54及CD105表达阳性。细胞周期及透射电镜检测提示细胞处于相对原始状态。免疫细胞化学染色显示:CD14、CD45、胶原蛋白Ⅱ呈阴性;CD106、CD166、纤维连接蛋白、波形蛋白及胶原纤维酸性蛋白呈阳性。细胞化学染色:糖原染色呈强阳性;碱性磷酸酶染色呈阴性。通过诱导分化培养可诱导出成骨细胞。结论:成功建立了稳定的hBMSC体外培养体系,按照此培养体系进行培养可获得hBMSC。hBMSC可传代培养,但在培养过程中细胞逐渐出现老化现象,且不能冻存。 展开更多
关键词 人骨髓间充质干细胞 造血微环境 细胞培养
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