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构建骨骼肌特异表达人FS基因载体及其稳定转染绵羊胎儿成纤维细胞
被引量:
1
1
作者
王玮
袁建龙
+6 位作者
金永
朱兵
岳群华
梁浩
郭旭东
刘东军
仓明
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第11期140-145,共6页
旨在构建骨骼肌特异表达人卵泡抑制素(follistatin,FS)基因载体并得到其稳定转染的蒙古绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础。首先通过RT-PCR方法克隆得到人FS基因cDNA序列,然后与猪骨骼肌特...
旨在构建骨骼肌特异表达人卵泡抑制素(follistatin,FS)基因载体并得到其稳定转染的蒙古绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础。首先通过RT-PCR方法克隆得到人FS基因cDNA序列,然后与猪骨骼肌特异表达启动子α-actin以及红色荧光蛋白表达元件连接,构建成FS基因骨骼肌特异表达载体pCFCDS。脂质体介导外源表达载体转染绵羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选后得到稳定转染的绵羊转基因细胞克隆。PCR鉴定外源基因在细胞基因组中的整合,分析转基因细胞系的核型和生长状况。结果显示,成功构建得到绵羊骨骼肌特异表达人FS基因的真核表达载体,并得到其稳定转染的转基因绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础。
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关键词
绵羊
卵泡抑制素
骨骼肌特异表达载体
转基因细胞系
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职称材料
题名
构建骨骼肌特异表达人FS基因载体及其稳定转染绵羊胎儿成纤维细胞
被引量:
1
1
作者
王玮
袁建龙
金永
朱兵
岳群华
梁浩
郭旭东
刘东军
仓明
机构
内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第11期140-145,共6页
基金
国家"863"计划项目(2008AA101007)
内蒙古自治区自然科学基金重点项目(20080404Zd08)
文摘
旨在构建骨骼肌特异表达人卵泡抑制素(follistatin,FS)基因载体并得到其稳定转染的蒙古绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础。首先通过RT-PCR方法克隆得到人FS基因cDNA序列,然后与猪骨骼肌特异表达启动子α-actin以及红色荧光蛋白表达元件连接,构建成FS基因骨骼肌特异表达载体pCFCDS。脂质体介导外源表达载体转染绵羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选后得到稳定转染的绵羊转基因细胞克隆。PCR鉴定外源基因在细胞基因组中的整合,分析转基因细胞系的核型和生长状况。结果显示,成功构建得到绵羊骨骼肌特异表达人FS基因的真核表达载体,并得到其稳定转染的转基因绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础。
关键词
绵羊
卵泡抑制素
骨骼肌特异表达载体
转基因细胞系
Keywords
Sheep Follistatin(FS) Skeletal muscle specific expression vector Transgenic cell line
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
构建骨骼肌特异表达人FS基因载体及其稳定转染绵羊胎儿成纤维细胞
王玮
袁建龙
金永
朱兵
岳群华
梁浩
郭旭东
刘东军
仓明
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
1
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