从生物能学观点看,冷环境下棕色脂肪解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)解偶联是机体产热和维持体温的重要机制,但成年人棕色脂肪含量极低,因而其产热的意义受到质疑。尽管研究证实运动促进脂肪棕色化,但其受环境温度、性别、训练...从生物能学观点看,冷环境下棕色脂肪解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)解偶联是机体产热和维持体温的重要机制,但成年人棕色脂肪含量极低,因而其产热的意义受到质疑。尽管研究证实运动促进脂肪棕色化,但其受环境温度、性别、训练水平等诸多因素影响较大,因此研究结果难以一致。研究从热力学角度探讨冷环境的运动适应以及能量转换过程,从分子层面揭示:运动时骨骼肌内的无效循环加快,通过Ca^(2+)跨膜转运、磷酸肌酸穿梭、α-磷酸甘油穿梭等路径,实现Ca^(2+)、磷酸肌酸、还原型辅酶Ⅰ(reduced nicotinamide adenine dinucleotide,NADH)跨膜转移,底物总量不发生变化,但伴随三磷酸腺苷(ATP)水解和产热。从热力学第一定律(ΔU=Q+W)来看,生物氧化释放的化学能(ΔU)是产热(Q)和肌肉对外做功,即肌肉收缩(W)之和。产热包括解偶联蛋白(uncoupling protein,UCP)解偶联产热和无效循环产热两部分,UCP1是脂肪棕色化和产热的重要标志。从热力学判断,冷环境下运动是否依赖脂肪产热以维持体温,在很大程度上还取决于无效循环的产热以及肌肉对外做功。因此,运动并非总能促进白色脂肪棕色化,甚至不能看作是运动促进健康的标志。展开更多
研究旨在探究家兔骨骼肌卫星细胞的分离、培养、鉴定和诱导分化方法,建立系统的家兔骨骼肌卫星细胞培养体系。选用1日龄新西兰白兔作为试验动物,分离后腿肌肉组织后采用胶原酶联合胰酶消化法分离骨骼肌卫星细胞。利用差速贴壁法对骨骼...研究旨在探究家兔骨骼肌卫星细胞的分离、培养、鉴定和诱导分化方法,建立系统的家兔骨骼肌卫星细胞培养体系。选用1日龄新西兰白兔作为试验动物,分离后腿肌肉组织后采用胶原酶联合胰酶消化法分离骨骼肌卫星细胞。利用差速贴壁法对骨骼肌卫星细胞进行纯化,并在低血清条件下诱导骨骼肌卫星细胞分化形成成熟肌管。通过蛋白免疫印迹技术分析检测骨骼肌卫星细胞标志基因肌肉细胞生成素(myogenin,MyoG)的表达,并通过肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MHC)免疫荧光染色法对诱导分化得到的骨骼肌卫星细胞进行鉴定。结果表明,分离纯化后的家兔骨骼肌卫星细胞通常呈长梭形,并显示出明显的折光性。进一步对分离的细胞进行成肌诱导分化后,成功诱导肌管形成,蛋白免疫印迹结果显示MyoG在分化后的细胞中表达量显著升高,免疫荧光鉴定呈MHC阳性。综上所述,试验成功分离和培养家兔原代骨骼肌卫星细胞,建立了完整的家兔骨骼肌卫星细胞培养及诱导分化技术体系,为进一步的家兔骨骼肌卫星细胞的体外研究提供了坚实的基础。展开更多
文摘研究旨在探究家兔骨骼肌卫星细胞的分离、培养、鉴定和诱导分化方法,建立系统的家兔骨骼肌卫星细胞培养体系。选用1日龄新西兰白兔作为试验动物,分离后腿肌肉组织后采用胶原酶联合胰酶消化法分离骨骼肌卫星细胞。利用差速贴壁法对骨骼肌卫星细胞进行纯化,并在低血清条件下诱导骨骼肌卫星细胞分化形成成熟肌管。通过蛋白免疫印迹技术分析检测骨骼肌卫星细胞标志基因肌肉细胞生成素(myogenin,MyoG)的表达,并通过肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MHC)免疫荧光染色法对诱导分化得到的骨骼肌卫星细胞进行鉴定。结果表明,分离纯化后的家兔骨骼肌卫星细胞通常呈长梭形,并显示出明显的折光性。进一步对分离的细胞进行成肌诱导分化后,成功诱导肌管形成,蛋白免疫印迹结果显示MyoG在分化后的细胞中表达量显著升高,免疫荧光鉴定呈MHC阳性。综上所述,试验成功分离和培养家兔原代骨骼肌卫星细胞,建立了完整的家兔骨骼肌卫星细胞培养及诱导分化技术体系,为进一步的家兔骨骼肌卫星细胞的体外研究提供了坚实的基础。
